摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略词表 | 第10-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-23页 |
1.家畜分子遗传育种研究进展 | 第12-15页 |
1.1 我国肉牛产业的发展近况 | 第12-13页 |
1.2 家畜分子遗传育种研究进展 | 第13页 |
1.3 肉牛分子标记辅助育种的研究 | 第13-15页 |
2.基因影响肉牛肌肉生长发育相关性状的研究 | 第15-16页 |
3.CDC10基因与肉牛生长性状相关研究进展 | 第16-20页 |
3.1 CDC10基因的结构和功能 | 第16-17页 |
3.2 CDC10基因是调控肉牛肌肉生长的重要功能基因 | 第17-18页 |
3.3 CDC10-323G>CSNP位点对CDC10表达和肉牛肌肉生长的影响 | 第18-20页 |
4.ELK1转录因子研究概述 | 第20-23页 |
4.1 ETS家族的结构和功能 | 第20-22页 |
4.2 ELK1基因的结构和功能 | 第22-23页 |
第二部分 实验研究 | 第23-80页 |
前言 | 第23-24页 |
1.材料与方法 | 第24-49页 |
1.1 主要仪器设备及分子生物耗材 | 第24-25页 |
1.2 实验动物 | 第25页 |
1.3 PCR-RFLP检测 | 第25-28页 |
1.4 Real-timePCR分析各组织中CDC10的表达量 | 第28-30页 |
1.5 生物信息学手段分析突变位点转录因子的结合情况 | 第30页 |
1.6 CMV-DsRed/U6-shRNA干扰载体的构建 | 第30-34页 |
1.7 有效shRNA序列的筛选 | 第34-39页 |
1.8 CMV-CDC10/ELK1-IRES-GFP过表达载体的构建 | 第39-45页 |
1.9 双荧光报告载体的构建及活性分析 | 第45-46页 |
1.10 WST1细胞增殖检测 | 第46-47页 |
1.11 EdU细胞增殖检测 | 第47-48页 |
1.12 数据统计分析方法 | 第48-49页 |
2.结果 | 第49-74页 |
2.1 CDC10基因-323G>CSNP位点遗传结构分析 | 第49-54页 |
2.2 CDC10基因在西门塔尔牛不同组织的表达量 | 第54页 |
2.3 双荧光素酶启动子活性分析结果 | 第54-56页 |
2.4 CMV-DsRed/U6-shRNA(CDC10)干扰载体构建结果 | 第56页 |
2.5 有效shRNA的筛选 | 第56-58页 |
2.6 干扰CDC10后细胞增殖检测结果 | 第58-59页 |
2.7 CMV-DsRed/U6-shRNA(CDC10)载体转染细胞后的细胞增殖能力 | 第59页 |
2.8 CMV-CDC10-IRES-GFP过表达载体的构建 | 第59-62页 |
2.9 过表达CDC10后细胞增殖检测结果 | 第62-63页 |
2.10 CMV-CDC10-IRES-GFP过表达载体转染细胞后的细胞增殖能力 | 第63页 |
2.11 CMV-DsRed/U6-shRNA(ELK1)干扰载体构建结果 | 第63-64页 |
2.12 ELK1基因有效shRNA的筛选 | 第64-66页 |
2.13 干扰ELK1后细胞增殖检测结果 | 第66页 |
2.14 CMV-DsRed/U6-shRNA(ELK1)干扰载体转染细胞后的细胞增殖能力 | 第66-67页 |
2.15 CMV-ELK1-IRES-GFP过表达载体构建结果 | 第67-70页 |
2.16 ELK1转录因子对基因CDC10的调控作用 | 第70-72页 |
2.17 双荧光报告载体的构建结果 | 第72页 |
2.18 WST1细胞增殖检测结果 | 第72-73页 |
2.19 CMV-ELK1-IRES-GFP载体转染细胞后的细胞增殖能力 | 第73-74页 |
3.讨论 | 第74-79页 |
3.1 黄牛CDC10-323G>CSNP位点多态性 | 第74页 |
3.2 CDC10-323G>CSNP位点作为分子标记用于我国肉牛育种的可能性 | 第74-75页 |
3.3 CDC10基因对成肌细胞增殖的调控 | 第75-77页 |
3.4 ELK1基因对CDC10表达的调控及对成肌细胞增殖的影响 | 第77-79页 |
4.结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-91页 |
致谢 | 第91页 |