摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-16页 |
1 金黄色葡萄球菌及其致病性 | 第11-13页 |
1.1 S.aureus的生物学特性及其毒力 | 第11-13页 |
1.2 S.aureus的非抗生素类抑制因子 | 第13页 |
2 外源氨基酸与乳蛋白合成间的相互关系 | 第13-14页 |
3 细胞焦亡与炎症反应 | 第14-16页 |
3.1 细胞程序性死亡及其生物学基础 | 第14-15页 |
3.2 细胞焦亡与炎症反应 | 第15-16页 |
第二章 S.aureus入侵人乳腺上皮细胞对外源氨基酸吸收和乳蛋白合成的影响 | 第16-59页 |
1 引言 | 第16-17页 |
1.1 金黄色葡萄球菌性乳腺炎 | 第16页 |
1.2 乳腺炎对乳汁分泌和质量的影响 | 第16-17页 |
1.3 目的和意义 | 第17页 |
2 材料和方法 | 第17-28页 |
2.1 材料 | 第17-18页 |
2.1.1 细胞系 | 第17页 |
2.1.2 菌株 | 第17页 |
2.1.3 氨基酸 | 第17页 |
2.1.4 主要试剂和耗材 | 第17-18页 |
2.2 方法 | 第18-28页 |
2.2.1 培养MCF-10A细胞 | 第18页 |
2.2.2 培养S.aureus | 第18-19页 |
2.2.3 用S.aureus入侵MCF-10A的方法 | 第19-20页 |
2.2.4 S.aureus入侵MCF-10A后细胞内菌落计数方法 | 第20页 |
2.2.5 S.aureus在MCF-10A细胞内增殖菌落计数方法 | 第20页 |
2.2.6 激光共聚焦显微镜观察S.aureus入侵MCF-10A | 第20-21页 |
2.2.7 ELISA检测三种乳蛋白成分和三种氨基酸的含量 | 第21-25页 |
2.2.8 细胞总RNA提取和cDNA合成及qPCR检测 | 第25-27页 |
2.2.9 WesternBlot检测细菌入侵及外源添加氨基酸对细胞mTOR信号通路活性的影响 | 第27页 |
2.2.10 数据统计学分析 | 第27-28页 |
3 结果 | 第28-56页 |
3.1 S.aureus入侵人乳腺上皮细胞MCF-10A并在细胞内增殖 | 第28-30页 |
3.1.1 S.aureus入侵人乳腺上皮细胞MCF-10A | 第28-29页 |
3.1.2 S.aureus在人乳腺上皮细胞MCF-10A内增殖 | 第29-30页 |
3.2 催乳素(PRL)对MCF-10A合成与分泌α-la、β-lg及Csn2的影响不明显 | 第30-31页 |
3.3 S.aureus入侵抑制MCF-10A吸收外源谷氨酸、天冬氨酸和亮氨酸 | 第31-33页 |
3.4 S.aureus入侵MCF-10A影响α-la、β-lg及Csn2的合成和分泌 | 第33-36页 |
3.5 外源氨基酸促进MCF-10A细胞α-la、β-lg和Csn2蛋白编码基因转录及蛋白质合成与分泌 | 第36-43页 |
3.5.1 外源氨基酸促进MCF-10A细胞α-la、β-lg和Csn2蛋白编码基因转录 | 第36-38页 |
3.5.2 外源氨基酸促进MCF-10A细胞α-la、β-lg及Csn2蛋白质合成与分泌 | 第38-43页 |
3.6 S.aureus入侵MCF-10A抑制氨基酸诱导的α-la、β-lg及Csn2的合成与分泌 | 第43-51页 |
3.6.1 S.aureus入侵MCF-10A抑制单一氨基酸诱导的α-la、β-lg及Csn2的合成与分泌 | 第43-49页 |
3.6.2 S.aureus入侵MCF-10A抑制复合氨基酸诱导的α-la、β-lg及Csn2的合成与分泌 | 第49-51页 |
3.7 S.aureus入侵MCF-10A细胞抑制乳蛋白合成机制的初步探讨 | 第51-56页 |
3.7.1 氨基酸激活ERK/mTORC1信号通路 | 第51-53页 |
3.7.2 S.aureus入侵MCF-10A细胞抑制ERK/mTORC1信号通路 | 第53-54页 |
3.7.3 S.aureus入侵MCF-10A诱导细胞焦亡 | 第54-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
4.1 细菌入侵与细胞内增殖 | 第56页 |
4.2 入侵时间与乳蛋白的合成与分泌 | 第56页 |
4.3 细菌入侵与氨基酸吸收及乳蛋白合成的关系 | 第56-57页 |
4.4 机制探讨 | 第57页 |
4.5 细菌入侵与ERK/mTORC1通路、焦亡及乳蛋白合成与分泌抑制的关系 | 第57-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |
附录 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
硕士期间发表论文 | 第66页 |