| 摘要 | 第5-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 前言 | 第18-42页 |
| 1. 糖胺聚糖的分类,结构以及其生物活性 | 第18-31页 |
| 1.1. 肝素/硫酸乙酰肝素类的结构和功能 | 第19-26页 |
| 1.1.1. 肝素及低分子量肝素 | 第20-26页 |
| 1.1.2.硫酸乙酰肝素 | 第26页 |
| 1.2. 硫酸软骨素和硫酸皮肤素 | 第26-28页 |
| 1.2.1. 硫酸软骨素和硫酸皮肤素结构 | 第26-27页 |
| 1.2.2. 硫酸软骨素和硫酸皮肤素功能 | 第27-28页 |
| 1.3. 硫酸角质素 | 第28-30页 |
| 1.4. 透明质酸 | 第30-31页 |
| 2. 糖胺聚糖的分离纯化方法 | 第31-39页 |
| 2.1. 糖胺聚糖的提取 | 第32-33页 |
| 2.1.1. 碱提取法 | 第32页 |
| 2.1.2. 蛋白酶水解消化法 | 第32-33页 |
| 2.2. 糖胺聚糖的分离 | 第33-34页 |
| 2.3. 糖胺聚糖的分析检测方法 | 第34-39页 |
| 2.3.1. 酶法获得糖胺聚糖二糖 | 第34-36页 |
| 2.3.2. 分离检测酶解二糖 | 第36-39页 |
| 3 甲壳胺以及甲壳胺衍生物 | 第39-40页 |
| 4 基于综述本论文提出的假设及解决手段 | 第40-42页 |
| 第一章 肝素/硫酸乙酰肝素亚硝酸降解后PMP衍生结构分析 | 第42-99页 |
| 1. 实验材料和仪器 | 第43页 |
| 2. 实验步骤 | 第43-47页 |
| 2.1. 2,5脱水甘露糖,2,5脱水塔罗糖的制备、衍生条件的优化及其衍生物的液质联用检测 | 第43-44页 |
| 2.2. 肝素五糖和肝素亚硝酸降解、PMP衍生后液质联用分析 | 第44页 |
| 2.3. PMP对亚硝酸降解产物衍生效率的检测 | 第44-45页 |
| 2.4. 脱硫肝素五糖和肝素的亚硝酸降解衍生产物结构分析 | 第45页 |
| 2.5. 肝素亚硝酸降解产物的二级质谱分析 | 第45-46页 |
| 2.6. 艾杜糖醛酸外切酶来验证结构 | 第46页 |
| 2.7. 几种商品低分子肝素的液质联用分析 | 第46页 |
| 2.8. 硫酸乙酰肝素及其脱乙酰产物的亚硝酸降解及液质分析 | 第46页 |
| 2.9. 脱乙酰有无脱硫现象的验证 | 第46-47页 |
| 2.10. 肝素五糖,肝素,低分子肝素(依诺肝素,那曲肝素,达纳肝素)检测限和线性范围 | 第47页 |
| 2.11. 酶解分析肝素二糖组成 | 第47页 |
| 3. 实验结果 | 第47-96页 |
| 3.1. 2,5脱水甘露糖和2,5脱水塔罗糖的制备、衍生条件的优化 | 第48-53页 |
| 3.2. 肝素五糖、肝素亚硝酸降解PMP衍生后高效液相分析 | 第53-60页 |
| 3.3. PMP衍生亚硝酸肝素/肝素五糖效率的检测 | 第60-64页 |
| 3.4. 肝素亚硝酸降解PMP衍生产物在HPLC上出峰顺序的确定 | 第64-79页 |
| 3.4.1. 2种二硫酸酯二糖顺序的确定 | 第64-65页 |
| 3.4.2. 3种单糖硫酸酯二糖顺序的确定 | 第65-71页 |
| 3.4.3. 2种无硫酸酯二糖顺序的确定 | 第71-73页 |
| 3.4.4. 二级串联质谱用于硫酸酯二糖顺序的最终确定及验证 | 第73-77页 |
| 3.4.5. 使用艾杜糖醛酸外切酶来验证结构 | 第77-79页 |
| 3.5. 亚硝酸降解PMP衍生后HPLC-UV-MS分析技术在肝素和类肝素中的应用 | 第79-84页 |
| 3.5.1. 在碱解获得的依诺肝素中的应用 | 第79-82页 |
| 3.5.2. 在亚硝酸降解得到的低分子量肝素中的应用 | 第82-84页 |
| 3.6. 亚硝酸降解PMP衍生后HPLC-UV-MS分析技术在硫酸乙酰肝素的应用和改进 | 第84-92页 |
| 3.6.1. 硫酸乙酰肝素亚硝酸降解PMP衍生后HPLC-UV-MS分析 | 第85-87页 |
| 3.6.2. 硫酸乙酰肝素脱乙酰后亚硝酸降解PMP衍生后HPLC-UV-MS分析 | 第87-90页 |
| 3.6.3. 用肝素五糖检测脱乙酰反应是否有脱硫现象 | 第90-92页 |
| 3.7. 检测限和线性范围 | 第92页 |
| 3.8. 肝素酶Ⅰ Ⅱ Ⅲ酶解肝素二糖SAX-HPLC分析和亚硝酸降解PMP衍生HPLC得到的结果比较 | 第92-96页 |
| 4. 本章结论 | 第96-97页 |
| 5. 本章小结 | 第97-99页 |
| 第二章 硫酸软骨素/硫酸皮肤素/硫酸角质素,肼解脱乙酰亚硝酸降解后PMP衍生结构分析 | 第99-143页 |
| 1. 实验部分 | 第100页 |
| 1.1. 实验材料和仪器 | 第100页 |
| 2. 实验步骤 | 第100-102页 |
| 2.1. 脱乙酰条件优化 | 第100页 |
| 2.2. 硫酸软骨素A,C,硫酸皮肤素,鲨鱼硫酸软骨素,鱿鱼硫酸软骨素,透明质酸的亚硝酸降解PMP柱前衍生HPLC-UV-MS结构分析 | 第100-101页 |
| 2.3. 硫酸软骨素中硫酸角质素的分离 | 第101页 |
| 2.4. CS,DS和KS中二糖的二级质谱分析 | 第101页 |
| 2.5. 传统酶解法分析CS和DS二糖 | 第101-102页 |
| 3. 实验结果 | 第102-139页 |
| 3.1. 脱乙酰条件优化 | 第102-109页 |
| 3.2. 脱乙酰硫酸软骨素A、B、C,多硫酸软骨素和透明质酸产物的硝酸降解PMP衍生物的HPLC-UV-MS分析 | 第109-122页 |
| 3.2.1. 硫酸软骨素A、C的分析 | 第109-113页 |
| 3.2.2. 硫酸皮肤素的分析 | 第113-116页 |
| 3.2.3. 多硫酸软骨素的分析 | 第116-120页 |
| 3.2.4. 脱乙酰透明质酸的分析 | 第120-122页 |
| 3.3. 鲨鱼软骨多糖中硫酸角质素的发现、分离及鉴定 | 第122-127页 |
| 3.3.1. 鲨鱼软骨多糖中硫酸角质素的发现 | 第122-123页 |
| 3.3.2. 鲨鱼软骨多糖中硫酸角质素的纯化 | 第123页 |
| 3.3.3. 鲨鱼软骨多糖中硫酸角质素的鉴定 | 第123-127页 |
| 3.4. 硫酸软骨素A、B、C和硫酸角质素二糖的二级质谱分析 | 第127-130页 |
| 3.5. 过硫酸软骨素脱氨产物亚硝酸降解PMP衍生后的HPLC-MS分析 | 第130-134页 |
| 3.6. 传统酶降解获得硫酸软骨素类二糖及其HPLC-SAX-UV分析方法的优缺点 | 第134-139页 |
| 4. 本章结论 | 第139-141页 |
| 5. 本章小结 | 第141-143页 |
| 第三章 甲壳胺/磺化壳胺亚硝酸降解PMP衍生结构分析 | 第143-170页 |
| 1. 实验部分 | 第144页 |
| 1.1. 实验材料和仪器 | 第144页 |
| 2. 实验步骤 | 第144-146页 |
| 2.1. 乙酰化甲壳胺及磺化甲壳胺的制备 | 第144-145页 |
| 2.2. 亚硝酸降解条件的优化及应用 | 第145页 |
| 2.3. 亚硝酸降解产物的PMP衍生及HPLC-MS分析 | 第145页 |
| 2.4. 电导滴定测定甲壳胺乙酰度 | 第145-146页 |
| 2.5. ~H-NMR测定测定甲壳胺乙酰度 | 第146页 |
| 2.6. ~(13)C-NMR测定磺化甲壳胺结构 | 第146页 |
| 3. 实验结果 | 第146-166页 |
| 3.1. 亚硝酸降解甲壳胺条件优化 | 第147-148页 |
| 3.2. 乙酰化甲壳胺和磺化甲壳胺的制备 | 第148-149页 |
| 3.3. 亚硝酸降解PMP衍生HPLC-MS法测定甲壳胺乙酰度及结构分析 | 第149-154页 |
| 3.4. 电导滴定测定甲壳胺乙酰度 | 第154-155页 |
| 3.5. ~1H-NMR测定测定甲壳胺乙酰度 | 第155-157页 |
| 3.6. 磺化甲壳胺的亚硝酸降解PMP柱前衍生HPLC-MS分析 | 第157-165页 |
| 3.7. 磺化甲壳胺~(13)C-NMR分析 | 第165-166页 |
| 4. 本章结论 | 第166-168页 |
| 5. 本章小结 | 第168-170页 |
| 第四章 吡唑啉酮类化合物的合成及在还原性糖类上的应用 | 第170-193页 |
| 1. 实验材料和仪器 | 第171页 |
| 2. 实验步骤 | 第171-172页 |
| 2.1 制备D5苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(D5PMP) | 第171页 |
| 2.2 制备D3苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(D3PMP) | 第171-172页 |
| 2.3 D3PMP,D5PMP在衍生还原糖上的应用 | 第172页 |
| 3. 实验结果 | 第172-190页 |
| 3.1 制备D5苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(D5 PMP) | 第174-175页 |
| 3.2 制备D3苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(D3 PMP) | 第175页 |
| 3.3 D3PMP,D5PMP在衍生糖类化学上的应用 | 第175-190页 |
| 3.3.1 D3PMP,D5PMP衍生糖链的可行性 | 第175-177页 |
| 3.3.2 同位素PMP衍生二糖的应用 | 第177-190页 |
| 4. 本章结论 | 第190-192页 |
| 5. 本章小结 | 第192-193页 |
| 参考文献 | 第193-202页 |
| 结语 | 第202-204页 |
| 创新点 | 第204-205页 |
| 致谢 | 第205-206页 |
| 个人简历 | 第206页 |
| 发表、待发表的文章及专利 | 第206-207页 |
