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CREPT和p15RS结合RNA聚合酶II的结构生物学研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第1章 引言第10-32页
    1.1 问题的提出第10页
    1.2 选题背景及意义第10-11页
    1.3 文献综述第11-31页
        1.3.1 细胞周期及其调控第12-16页
        1.3.2 RNA聚合酶II与转录调控第16-28页
        1.3.3 RPR结构域与RTT103家族蛋白第28-31页
    1.4 本文的研究方案第31-32页
第2章 材料和方法第32-51页
    2.1 实验材料第32-36页
        2.1.1 基因与载体第32-34页
        2.1.2 菌种与细胞第34页
        2.1.3 常用缓冲液的配制第34-35页
        2.1.4 培养基的配制第35-36页
    2.2 实验方法第36-51页
        2.2.1 构建表达载体第36-40页
        2.2.2 蛋白表达第40-41页
        2.2.3 蛋白纯化第41-44页
        2.2.4 蛋白质晶体生长第44-47页
        2.2.5 蛋白质晶体的X射线衍射及结构解析第47-48页
        2.2.6 荧光偏振第48-49页
        2.2.7 分析超速离心第49页
        2.2.8 多角度静态光散射第49页
        2.2.9 免疫共沉淀第49-50页
        2.2.10 荧光素酶报告基因检测第50-51页
第3章 CREPT和p15RS全长蛋白的表达纯化第51-54页
    3.1 引言第51页
    3.2 实验结果与分析第51-53页
        3.2.1 CREPT和p15RS全长蛋白序列分析第51页
        3.2.2 CREPT和p15RS全长蛋白的表达和纯化第51-53页
    3.3 小结第53-54页
第4章 CREPT-RPR和p15RS-RPR结合RNA聚合酶II CTD的生化研究第54-59页
    4.1 引言第54页
    4.2 实验结果与分析第54-58页
        4.2.1 CREPT-RPR与p15RS-RPR蛋白性质分析第54页
        4.2.2 CREPT-RPR和p15RS-RPR的表达纯化第54-56页
        4.2.3 CREPT-RPR和p15RS-RPR与RNA聚合酶II CTD的相互作用第56-58页
    4.3 小结第58-59页
第5章 CREPT-RPR和p15RS-RPR的结晶与结构解析第59-68页
    5.1 引言第59页
    5.2 实验结果与分析第59-67页
        5.2.1 CREPT-RPR和p15RS-RPR的晶体生长和优化第59-62页
        5.2.2 p15RS-RPR的结构解析第62-63页
        5.2.3 p15RS-RPR与CREPT-RPR的结构分析第63-67页
    5.3 小结第67-68页
第6章 CREPT-CTD和p15RS-CTD的纯化与结晶研究第68-83页
    6.1 引言第68页
    6.2 实验结果与分析第68-81页
        6.2.1 CREPT-CTD和p15RS-CTD蛋白性质分析第68-69页
        6.2.2 CREPT-CTD的晶体生长第69-70页
        6.2.3 CREPT-CTD的结构解析第70-71页
        6.2.4 CREPT-CTD的结构分析第71-72页
        6.2.5 p15RS-CTD的晶体生长第72-77页
        6.2.6 p15RS-CTD的相位问题第77-81页
    6.3 小结第81-83页
第7章 CREPT-CTD同源二聚体间的相互作用第83-93页
    7.1 引言第83页
    7.2 实验结果与分析第83-91页
        7.2.1 基于结构的CRETP-CTD功能分析第83-84页
        7.2.2 溶液中CREPT-CTD和p15RS-CTD的状态第84-87页
        7.2.3 CREPT-CTD同源二聚体间的相互作用第87-90页
        7.2.4 CREPT-CTD同源二聚体的形成对于CREPT的功能影响第90-91页
    7.3 小结第91-93页
第8章 总结和展望第93-98页
参考文献第98-111页
致谢第111-113页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第113页

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