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美洲棉铃虫、烟粉虱转座子标记技术创建及紫外诱导桃蚜差减文库构建

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
前言第15-16页
第一章 文献综述第16-36页
   ·昆虫转座子研究第17-22页
     ·转座子的发现第17页
     ·转座子的分类和结构特征第17-19页
     ·转座的模式和特点第19-20页
     ·转座作用的遗传学效应第20-21页
     ·转座子与寄主基因组进化第21-22页
     ·转座子的表达序列标签第22页
     ·基于昆虫转座子表达载体及分子策略控制昆虫传播的疾病第22页
   ·种群替代控制蚊子传播疟疾第22-29页
     ·种群替代的内容第22-23页
     ·种群替代的实施机制第23-24页
     ·转座子介导的驱动机制第24-25页
     ·全长转座子Hztransib 的发现第25-26页
     ·转座子Transib 家族的研究概况第26页
     ·活性转座元件的调控机制与构建第26-29页
   ·基于烟粉虱转座子MITES 的分子标记技术第29-34页
     ·烟粉虱的为害第29-30页
     ·烟粉虱的生物型多样性第30页
     ·烟粉虱的入侵生物学第30-31页
     ·分子标记技术及其在烟粉虱生物型鉴定中的应用第31-32页
     ·基于MITE 转座子的分子标记第32-34页
   ·紫外线增强与蚜虫进化第34-36页
第二章 转座子的克隆和筛选第36-51页
   ·实验材料第36-37页
     ·实验昆虫第36-37页
     ·实验试剂和原料第37页
     ·实验仪器及器械第37页
   ·实验方法第37-43页
     ·昆虫基因组DNA 的提取第37-38页
     ·转座子扩增与载体构建第38-40页
     ·昆虫细胞的转染过程第40-41页
     ·昆虫或细胞RNA 提取与检测第41-42页
     ·质粒转染昆虫细胞转录水平的RT-PCR 检测第42-43页
   ·结果与分析第43-49页
     ·棉红铃虫转座子载体的获得与鉴定第43-45页
     ·棉铃虫转座子的获得第45-46页
     ·转座子在昆虫细胞中的转录活性分析第46-48页
     ·转座子Hztransib 的自然历史第48-49页
   ·讨论第49-51页
第三章 HZTRANSIB 转座子在H. ZEA 中的种群动态第51-61页
   ·实验材料第51-52页
     ·实验昆虫第51-52页
     ·实验试剂及耗材第52页
   ·实验方法第52-53页
     ·转座子展示技术第52-53页
     ·数据分析第53页
   ·结果与分析第53-59页
     ·转座子Hztransib 在H. zea 中的拷贝数第53-56页
     ·插入位点多态性和位点占有频率第56-58页
     ·转座子Hztransib 完整拷贝数的频率第58-59页
   ·讨论第59-60页
   ·小结第60-61页
第四章 H. ZEA 种群遗传多样性分析第61-66页
   ·材料与方法第61-62页
     ·实验材料第61页
     ·DNA 的提取与PCR 扩增第61页
     ·数据分析第61-62页
   ·结果与分析第62-65页
     ·棉铃虫转座子标记的遗传多样性分析第62-63页
     ·棉铃虫种群内的遗传变异第63-64页
     ·品系间遗传距离和遗传相似性(聚类分析)第64-65页
   ·讨论第65页
   ·小结第65-66页
第五章 HZTRANSIB 转座子POLYA 的定点、多点与区域突变第66-76页
   ·实验材料第66页
   ·实验方法第66-72页
     ·转座子Hztransib 的转录活性分析(RT-PCR)第67页
     ·棉铃虫转座子人工突变载体的构建与突变原则第67-68页
     ·突变设计第68-69页
     ·突变载体的构建第69-72页
   ·结果与分析第72-74页
     ·突变质粒检测第72-74页
     ·突变质粒RT-PCR 检测第74页
   ·讨论第74-76页
     ·Hztransib 加尾类型第74页
     ·Hztransib 沉默突变第74-75页
     ·关于突变方法第75-76页
第六章 烟粉虱MITE 转座子的发现与克隆第76-83页
   ·材料与方法第76-77页
     ·实验材料第76页
     ·实验方法第76-77页
     ·克隆、测序与鉴定第77页
   ·结果与分析第77-81页
     ·烟粉虱中MITEs 的发现与特征鉴定第77-81页
   ·讨论第81-83页
第七章 基于MITE 转座子标记技术的创建第83-91页
   ·材料与方法第83-87页
     ·供试烟粉虱第83页
     ·单头烟粉虱DNA 提取第83-84页
     ·烟粉虱的COI 基因的限制性片段长度多态性第84-85页
     ·基于MITEs 的转座子展示技术第85-87页
     ·烟粉虱B 型Q 型插入图谱比较第87页
     ·多样性与MITE-转座子展示技术的可重复性第87页
     ·烟粉虱MITE 标记连锁检验第87页
   ·结果与分析第87-90页
     ·MITE 转座子标记技术的构建及烟粉虱中的MITE 水平的插入第87-88页
     ·MITE 转座子标记技术鉴定Q 型和B 型差异第88-90页
   ·讨论第90页
   ·小结第90-91页
第八章 紫外诱导桃蚜差减文库构建第91-100页
   ·实验材料第91页
     ·供试蚜虫第91页
     ·所需试剂耗材第91页
   ·实验方法第91-94页
     ·UV 处理第91-92页
     ·SSH 差减文库的构建第92-94页
   ·结果与分析第94-97页
     ·差减文库的构建及文库质量鉴定第94-95页
     ·消减文库的测序和分析第95-97页
   ·讨论第97-100页
     ·差减文库基因分类第97页
     ·差减文库部分基因功能分析第97-100页
综合讨论第100-101页
 (一) 环境-昆虫-转座子三者的关系第100页
 (二) 利用转座子标记昆虫种群遗传变异第100-101页
创新点第101-102页
进一步研究的内容第102-103页
参考文献第103-114页
附录第114-115页
致谢第115-116页
作者简介第116页

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