| 英文缩略词 | 第8-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 材料与方法 | 第17-38页 |
| 一、实验材料 | 第17-24页 |
| 1. 细胞 | 第17页 |
| 2. 免疫组化芯片 | 第17页 |
| 3. 动物 | 第17-18页 |
| 4. 主要试剂 | 第18-21页 |
| 5. 主要仪器与设备 | 第21-22页 |
| 6. 计算机分析软件 | 第22页 |
| 7. 主要试剂及其配方 | 第22-24页 |
| 二、实验方法 | 第24-38页 |
| 1. 肝癌细胞的培养 | 第24页 |
| 2. 肝癌干细胞相关亚群的无血清悬浮培养 | 第24页 |
| 3. 杂交瘤细胞的培养 | 第24-25页 |
| 4. 无血清杂交瘤上清的收集 | 第25页 |
| 5. ELISA酶联免疫吸附试验 | 第25-26页 |
| 6. 流式细胞荧光 | 第26-27页 |
| 7. 细胞免疫荧光 | 第27-29页 |
| 8. 肝癌干细胞体外生物学特征的分析 | 第29-31页 |
| 9. 肝癌干细胞体内致瘤能力的分析 | 第31页 |
| 10. 抗肝癌干细胞单抗对肝癌干细胞生物学功能影响的分析 | 第31-33页 |
| 11. 动物实验 | 第33-34页 |
| 12. Western-Blot及斑点杂交实验 | 第34-35页 |
| 13. 疏水层析纯化IgM抗体 | 第35-36页 |
| 14. 抗原纯化鉴定 | 第36-37页 |
| 15. 统计学分析 | 第37-38页 |
| 第一部分 抗人肝癌干细胞单抗的筛选与鉴定 | 第38-78页 |
| 一、实验结果 | 第38-71页 |
| (一) 抗人肝癌干细胞单抗的筛选 | 第38-47页 |
| 1. 人肝癌干细胞单抗的制备与初筛 | 第38页 |
| 2. 抗人肝癌干细胞单抗的类和亚类及产量的测定 | 第38-40页 |
| 3. 活细胞流式荧光术差异初筛抗人肝癌干细胞单抗 | 第40-44页 |
| 4. 活细胞流式荧光术差异复筛抗人肝癌干细胞单抗 | 第44-47页 |
| (二) 抗人肝癌干细胞单抗15B7的研究 | 第47-71页 |
| 1. 活细胞流式荧光术检测15B7~+细胞在Be17402-V3 sphere细胞中的富集 | 第47-48页 |
| 2. 细胞免疫荧光术检测单抗15B7识别抗原在Be17402-V3细胞中的定位 | 第48-49页 |
| 3. 双色细胞免疫荧光检测15B7与ESA~+肝癌干细胞的共染 | 第49-50页 |
| 4. 双色流式荧光术检测单抗15B7与肝癌干细胞标志物ESA~+共染 | 第50-51页 |
| 5. 15B7~+细胞自我更新能力的分析 | 第51-52页 |
| 6. 15B7~+细胞侵袭能力的分析 | 第52-53页 |
| 7. 15B7~+细胞的耐药性分析 | 第53-54页 |
| 8. 15B7~+细胞裸鼠体内致瘤性分析 | 第54-55页 |
| 9. 15B7单克隆抗体的纯化 | 第55-56页 |
| 10. 单抗15B7抑制肝癌细胞自我更新能力的分析 | 第56-57页 |
| 11. 单抗15B7抑制肝癌细胞侵袭能力的分析 | 第57-58页 |
| 12. 单抗15B7抑制肝癌细胞增殖能力的分析 | 第58-59页 |
| 13. 单抗15B7降低肝癌细胞耐药能力的检测 | 第59-60页 |
| 14. 单抗15B7治疗肝癌的体内实验研究 | 第60-61页 |
| 15. 人肝癌组织细胞中单抗15B7的表达水平 | 第61-62页 |
| 16. 免疫组化检测单抗15B7在人肝癌组织中的表达及临床相关性分析 | 第62-63页 |
| 17. Western-Blot鉴定15B7识别的靶抗原及其分子量 | 第63-64页 |
| 18. 15B7靶抗原的分离 | 第64-65页 |
| 19. 15B7靶抗原的鉴定 | 第65-67页 |
| 20. 细胞免疫荧光共定位验证单抗15B7识别的靶抗原 | 第67-69页 |
| 21. Western-Blot验证单抗15B7的靶抗原 | 第69页 |
| 22. 免疫共沉淀验证单抗15B7识别的靶抗原 | 第69-71页 |
| 二、讨论 | 第71-76页 |
| 三、小结 | 第76-78页 |
| 第二部分 抗肿瘤干细胞单抗多靶点联合治疗 | 第78-97页 |
| 一、实验结果 | 第78-93页 |
| (一) 联合单抗9A9和15D2对肝癌细胞系Be17402-V3的功能抑制研究 | 第78-87页 |
| 1. 活细胞流式术检测单抗与干细胞标志物ESA的共染及富集 | 第78-80页 |
| 2. 联合单抗抑制肝癌细胞的自我更新能力分析 | 第80-82页 |
| 3. 联合单抗抑制肝癌细胞的侵袭能力分析 | 第82-84页 |
| 4. 联合单抗抑制肝癌亲本细胞及sphere细胞的增殖能力分析 | 第84-86页 |
| 5. 联合单抗抑制肝癌细胞系Be17402-V3的耐药能力分析 | 第86-87页 |
| (二) 联合单抗9A9和15D2对肺癌细胞系SPCA-1的功能抑制研究 | 第87-93页 |
| 1. 活细胞流式术检测单抗9A9和15D2细胞在SPCA-1细胞中的共染及富集 | 第87-89页 |
| 2. 联合单抗抑制肺癌细胞系SPCA-1的自我更新能力分析 | 第89-91页 |
| 3. 联合单抗抑制肺癌细胞系SPCA-1的侵袭能力分析 | 第91-93页 |
| 二、讨论 | 第93-96页 |
| 三、小结 | 第96-97页 |
| 论文综述 | 第97-103页 |
| 参考文献 | 第103-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 附录 | 第107-108页 |
| 个人简历 | 第108-109页 |
| 基金资助情况 | 第109-110页 |
