| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词中英文对照表 | 第12-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-23页 |
| 1.1 伪狂犬病毒的概述 | 第13-15页 |
| 1.1.1 伪狂犬病毒的分子生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.1.2 伪狂犬病毒的流行情况 | 第14-15页 |
| 1.2 肿瘤抑制因子p53概述 | 第15-22页 |
| 1.2.1 p53与先天性抗病毒免疫力 | 第16页 |
| 1.2.2 p53与细胞凋亡 | 第16-19页 |
| 1.2.3 p53与病毒的相互作用 | 第19-22页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 p53过表达及敲低细胞株的构建及验证 | 第23-36页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 质粒、细胞与病毒 | 第23-24页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.4 培养基的配制 | 第25页 |
| 2.2 方法 | 第25-30页 |
| 2.2.1 PPL慢病毒载体构建 | 第25-28页 |
| 2.2.2 p53过表达及敲低细胞株的构建及验证 | 第28-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-34页 |
| 2.3.1 构建pLenti-CMV-GFP-Puro-TP53 | 第30-31页 |
| 2.3.2 Lv-pCDH与Lv-p53病毒液感染PK15细胞 | 第31页 |
| 2.3.3 qPCR验证pCDH与pCDH-P53细胞株中p53基因的表达量 | 第31-32页 |
| 2.3.4 WB检测pCDH与pCDH-P53细胞株中p53蛋白表达量 | 第32页 |
| 2.3.5 shRNA干扰细胞系p53的检测 | 第32-33页 |
| 2.3.6 qPCR验证p53-knockdown的PK15细胞株中p53基因的表达量 | 第33-34页 |
| 2.3.7 WB验证p53-knockdown的PK15细胞株中p53蛋白的表达量 | 第34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 p53影响PRV在PK-15细胞中复制的研究 | 第36-52页 |
| 3.1 材料 | 第37-39页 |
| 3.1.1 细胞与病毒 | 第37页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第38-39页 |
| 3.1.4 培养基的配制 | 第39页 |
| 3.2 方法 | 第39-45页 |
| 3.2.1 病毒的滴度测定 | 第39-40页 |
| 3.2.2 荧光定量PCR检测方法 | 第40-42页 |
| 3.2.3 WB检测方法 | 第42-45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-50页 |
| 3.3.1 PRV病毒滴度测定 | 第45-46页 |
| 3.3.2 p53在感染PRV的PK-15细胞中表达量的测定 | 第46-48页 |
| 3.3.3 p53在感染PRV的p53过表达稳定细胞系中表达量的测定 | 第48-50页 |
| 3.3.4 PFTα影响PRV在PK-15细胞中复制情况的测定 | 第50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-51页 |
| 3.5 小结 | 第51-52页 |
| 全文结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
