| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 词汇缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1 奶牛乳腺炎的病因及危害 | 第11-12页 |
| 2 奶牛乳腺组织的防御机制 | 第12-13页 |
| 2.1 乳头管的机械性屏障作用 | 第12-13页 |
| 2.2 免疫细胞的防御作用 | 第13页 |
| 3 奶牛乳腺炎的分类及诊断方法 | 第13-14页 |
| 3.1 临床型乳腺炎 | 第13页 |
| 3.2 隐性乳腺炎 | 第13-14页 |
| 3.3 慢性乳腺炎 | 第14页 |
| 3.4 奶牛乳腺炎的诊断方法 | 第14页 |
| 4 金黄色葡萄球菌 | 第14-15页 |
| 4.1 金黄色葡萄球菌的相关特征 | 第14-15页 |
| 4.2 金黄色葡萄球菌毒力因子 | 第15页 |
| 5 microRNA的研究进展 | 第15-17页 |
| 5.1 microRNA的生成过程 | 第15-16页 |
| 5.2 microRNA的生物学功能 | 第16页 |
| 5.3 microRNA调控机制 | 第16-17页 |
| 6 miR-145研究进展 | 第17-18页 |
| 6.1 hsa-miR-145对肿瘤的抑制作用 | 第17-18页 |
| 6.2 奶牛乳腺中miR-145的研究状况 | 第18页 |
| 7 FSCN1基因研究进展 | 第18-19页 |
| 8 本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 miR-145在牛乳腺上皮细胞系(Mac-T)中的功能研究 | 第20-31页 |
| 1 试验准备 | 第20-21页 |
| 1.1 试验材料 | 第20页 |
| 1.2 试验主要试剂配制 | 第20页 |
| 1.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2 试验方法 | 第21-26页 |
| 2.1 Sau攻毒奶牛乳腺组织microRNA表达谱数据分析 | 第21-22页 |
| 2.2 Mac-T的复苏及培养 | 第22页 |
| 2.3 miR-145在Mac-T中的过表达和干扰 | 第22-24页 |
| 2.4 过表达miR-145的Mac-T细胞因子分泌量检测 | 第24-25页 |
| 2.5 过表达miR-145的Mac-T细胞EdU增殖试验 | 第25-26页 |
| 3 试验结果 | 第26-29页 |
| 3.1 过表达和干扰miR-145表达量的效果 | 第26-27页 |
| 3.2 miR-145对Mac-T细胞因子分泌量的影响 | 第27-28页 |
| 3.3 miR-145对Mac-T增殖的影响 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 5 小结 | 第30-31页 |
| 第三章 miR-145靶基因的预测及靶基因FSCN1的识别 | 第31-52页 |
| 1 试验准备 | 第31-33页 |
| 1.1 试验材料 | 第31页 |
| 1.2 试验主要试剂配制 | 第31-32页 |
| 1.3 主要仪器 | 第32-33页 |
| 2 试验方法 | 第33-46页 |
| 2.1 Sau攻毒奶牛乳腺组织的转录组数据预测筛选靶基因 | 第33-34页 |
| 2.2 miR-145在Mac-T中对预测靶基因的过表达和干扰 | 第34-36页 |
| 2.3 Western Blot验证 | 第36-39页 |
| 2.4 miR-145靶向FSCN1的双荧光素酶报告基因验证 | 第39-46页 |
| 3 试验结果 | 第46-50页 |
| 3.1 荧光定量PCR和Western Blot结果表明miR-145对FSCN1的表达有干扰作用 | 第46-48页 |
| 3.2 双荧光素酶报告载体活性检测结果 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| 4.1 miR-145和FSCN1的靶向关系验证 | 第50-51页 |
| 4.2 双荧光素酶报告基因系统的优势 | 第51页 |
| 5 小结 | 第51-52页 |
| 第四章 FSCN1在Mac-T细胞中的功能研究 | 第52-62页 |
| 1 试验准备 | 第52页 |
| 1.1 试验材料 | 第52页 |
| 1.2 试验主要试剂配制 | 第52页 |
| 1.3 主要仪器 | 第52页 |
| 2 试验方法 | 第52-56页 |
| 2.1 靶向干扰FSCN1的siRNA序列的设计及合成 | 第52-54页 |
| 2.2 siRNA敲降FSCN1效率验证 | 第54-56页 |
| 2.3 敲降FSCN1的Mac-T免疫因子分泌量检测 | 第56页 |
| 2.4 敲降FSCN1的Mac-T细胞EdU增殖试验 | 第56页 |
| 3 试验结果 | 第56-60页 |
| 3.1 siRNA敲降FSCN1效果对比 | 第56-57页 |
| 3.2 敲降FSCN1对Mac-T细胞因子分泌量的影响 | 第57-58页 |
| 3.3 敲降FSCN1对Mac-T细胞增殖的影响 | 第58页 |
| 3.4 敲降FSCN1与过表达miR-145对比对Mac-T细胞增殖及细胞因子分泌的影响 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 4.1 FSCN1基因相对表达量 | 第60页 |
| 4.2 FSCN1基因对细胞增殖和细胞因子分泌的影响 | 第60页 |
| 4.3 Bta-miR-145靶向FSCN1基因对细胞增殖和细胞因子分泌的影响 | 第60-61页 |
| 5 小结 | 第61-62页 |
| 第五章 全文结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 | 第71-74页 |
| 附录一: 攻金葡菌组与对照组差异显著miRNA统计表 | 第71-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表和参与发表的学术论文目录 | 第75-76页 |
