| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第13-34页 |
| 第一章 精原干细胞自我更新机制的研究进展 | 第13-34页 |
| 1.1 精原干细胞 | 第14-19页 |
| 1.1.1 精原干细胞的概念 | 第14-15页 |
| 1.1.2 精原干细胞的来源 | 第15-16页 |
| 1.1.3 精原干细胞的生物学特征与鉴定标志 | 第16-18页 |
| 1.1.4 生殖细胞体外分化能力鉴定 | 第18-19页 |
| 1.2 精原干细胞自我更新的机制研究 | 第19-27页 |
| 1.2.1 影响精原干细胞自我更新的相关因子 | 第19-21页 |
| 1.2.2 影响精原干细胞自我更新的相关基因 | 第21-23页 |
| 1.2.3 影响精原干细胞自我更新的相关小 RNA | 第23-24页 |
| 1.2.4 影响精原干细胞自我更新的相关通路 | 第24-25页 |
| 1.2.5 表观遗传修饰对精原干细胞自我更新的影响 | 第25-27页 |
| 1.3 Ras/Raf/MAP2K/MAPK 通路的研究进展 | 第27-32页 |
| 1.3.1 Ras/Raf/MAP2K/MAPK 信号通路的组成与信号通路激活过程 | 第27-29页 |
| 1.3.2 Ras/Raf/MAP2K/MAPK 信号通路对精原干细胞自我更新影响的研究进展 | 第29-31页 |
| 1.3.3 Ras/Raf/MAP2K/MAPK 信号通路的抑制剂 | 第31-32页 |
| 1.3.4 PD0325901 的功能 | 第32页 |
| 1.4 存在的问题及展望 | 第32-34页 |
| 试验研究 | 第34-65页 |
| 第二章 奶山羊精原干细胞的获取与生物学特性检测 | 第34-49页 |
| 2.1 材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第34页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第34-35页 |
| 2.1.3 主要仪器与耗材 | 第35页 |
| 2.2 方法 | 第35-41页 |
| 2.2.1 主要溶液配制 | 第35-37页 |
| 2.2.2 奶山羊精原干细胞的分离、纯化 | 第37-38页 |
| 2.2.3 奶山羊精原干细胞的培养与传代 | 第38页 |
| 2.2.4 半定量 PCR 检测鉴定 | 第38-39页 |
| 2.2.5 碱性磷酸酶染色鉴定 | 第39页 |
| 2.2.6 免疫荧光染色鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2.7 体外诱导分化鉴定 | 第40-41页 |
| 2.2.8 试验数据处理 | 第41页 |
| 2.3 结果 | 第41-47页 |
| 2.3.1 奶山羊精原干细胞的基因表达检测 | 第41-42页 |
| 2.3.2 奶山羊精原干细胞碱性磷酸酶表达检测 | 第42页 |
| 2.3.3 奶山羊精原干细胞的蛋白表达检测 | 第42-43页 |
| 2.3.4 奶山羊精原干细胞的体外分化能力检测 | 第43-47页 |
| 2.4 讨论 | 第47-48页 |
| 2.5 小结 | 第48-49页 |
| 第三章 阻断 MAPK 信号通路对奶山羊精原干细胞自我更新的影响 | 第49-57页 |
| 3.1 材料 | 第49页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第49页 |
| 3.1.2 主要试剂及耗材 | 第49页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第49页 |
| 3.2 方法 | 第49-51页 |
| 3.2.1 溶液配制 | 第49-50页 |
| 3.2.2 不同 PD0325901 浓度下 AP 阳性率检测 | 第50页 |
| 3.2.3 不同 PD0325901 浓度下细胞数量统计 | 第50页 |
| 3.2.4 不同 PD0325901 浓度下细胞生长曲线检测 | 第50页 |
| 3.2.5 不同 PD0325901 浓度下细胞 BrdU 阳性率检测 | 第50-51页 |
| 3.2.6 细胞凋亡检测 | 第51页 |
| 3.2.7 阻断 MAPK 通路对细胞周期影响检测 | 第51页 |
| 3.3 结果 | 第51-55页 |
| 3.3.1 不同 PD0325901 浓度下 AP 阳性率检测 | 第51-52页 |
| 3.3.2 不同 PD0325901 浓度下细胞数量统计 | 第52-53页 |
| 3.3.3 不同 PD0325901 浓度下细胞生长曲线检测 | 第53页 |
| 3.3.4 不同 PD0325901 浓度下细胞 BrdU 阳性率检测 | 第53-54页 |
| 3.3.5 Ras/Raf/MAP2K/MAPK 信号通路对细胞凋亡的影响 | 第54-55页 |
| 3.3.6 阻断 Ras/Raf/MAP2K/MAPK 信号通路对细胞周期的影响 | 第55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-56页 |
| 3.5 小结 | 第56-57页 |
| 第四章 MAPK 信号通路对奶山羊精原干细胞自我更新影响的机理探讨 | 第57-65页 |
| 4.1 材料 | 第57页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第57页 |
| 4.1.2 主要试剂及耗材 | 第57页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第57页 |
| 4.2 方法 | 第57-59页 |
| 4.2.1 溶液配制 | 第57-58页 |
| 4.2.2 Ras/Raf/MAP2K/MAPK 信号通路在奶山羊精原干细胞中表达情况检测 | 第58页 |
| 4.2.3 Western Blotting 检测 Ras/Raf/MAP2K/MAPK 信号通路阻断 | 第58-59页 |
| 4.2.4 免疫荧光染色检测 Ras/Raf/MAP2K/MAPK 信号通路阻断后下游转录因子表达情况 | 第59页 |
| 4.3 结果 | 第59-62页 |
| 4.3.1 MAPK 在奶山羊精原干细胞中表达情况检测 | 第59-61页 |
| 4.3.2 Western Blotting 检测 Ras/Raf/MAP2K/MAPK 信号通路阻断 | 第61-62页 |
| 4.3.3 阻断 Ras/Raf/MAP2K/MAPK 信号通路后下游转录因子表达情况检测 | 第62页 |
| 4.4 讨论 | 第62-64页 |
| 4.5 小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65页 |
| 创新点 | 第65页 |
| 进一步研究课题 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 附录 | 第75-77页 |
| 缩略词 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介及攻读硕士学位期间的主要学术成 | 第79页 |
