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阳离子化昆布多糖作为基因载体的初步研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
英文缩略词表第8-17页
第1章 前言第17-20页
第2章 聚乙烯亚胺改性阳离子昆布多糖的构建与鉴定第20-28页
    2.1 实验试剂与仪器第20-21页
        2.1.1 实验试剂第20页
        2.1.2 实验仪器第20-21页
    2.2 实验方法第21-23页
        2.2.1 昆布多糖的阳离子化修饰第21-22页
        2.2.2 红外分光光度法第22页
        2.2.3 质子核磁共振波谱法第22页
        2.2.4 热分析法第22-23页
        2.2.5 电位检测第23页
    2.3 实验结果第23-26页
        2.3.1 FTIR第23页
        2.3.2 ~1H-NMR第23-24页
        2.3.3 TGA第24-25页
        2.3.4 电位检测第25-26页
    2.4 讨论第26-28页
第3章 载体 Lam-PEI 与核酸体外相互作用研究第28-38页
    3.1 实验材料与仪器第28-30页
        3.1.1 质粒与细胞株第28页
        3.1.2 实验试剂第28-29页
        3.1.3 实验仪器第29页
        3.1.4 主要试剂配制第29-30页
    3.2 实验方法第30-32页
        3.2.1 Lam-PEI 与 DNA 相互作用研究第30页
            3.2.1.1 粒径与电位检测第30页
            3.2.1.2 DNA 凝胶阻滞试验第30页
            3.2.1.3 透射电镜第30页
        3.2.2 Lam-PEI 与 RNA 相互作用研究第30页
        3.2.3 体外细胞实验第30-32页
            3.2.3.1 细胞培养第30-31页
            3.2.3.2 MTT 法检测细胞存活率第31页
            3.2.3.3 细胞转染效率测定第31-32页
    3.3 实验结果第32-37页
        3.3.1 Lam-PEI 与 DNA 相互作用第32-36页
            3.3.1.1 Lam-PEI/DNA 复合物粒径与电位第32页
            3.3.1.2 DNA 凝胶阻滞试验第32-33页
            3.3.1.3 透射电镜第33页
            3.3.1.4 细胞毒性实验第33-35页
            3.3.1.5 体外细胞转染实验第35-36页
        3.3.2 Lam-PEI 与 siRNA 相互作用第36-37页
            3.3.2.1 Lam-PEI 结合 siRNA 能力测试第36-37页
            3.3.2.2 体外细胞转染实验第37页
    3.4 讨论第37-38页
第4章 Lam-PEI 负载 Bmi-1 siRNA 体外抗肿瘤作用研究第38-50页
    4.1 实验材料与仪器第38-39页
    4.2 实验方法第39-42页
        4.2.1 Bmi-1 mRNA 表达水平分析第39-41页
            4.2.1.1 细胞总 RNA 的提取第39-40页
            4.2.1.2 总 RNA 的定量及鉴定第40页
            4.2.1.3 RT-PCR第40-41页
        4.2.2 MTT 法检测细胞抑制率第41页
        4.2.3 FCM 检测细胞的周期分布第41-42页
        4.2.4 FCM 检测细胞凋亡第42页
    4.3 实验结果第42-48页
        4.3.1 靶向 Bmi-1 的 siRNA 序列筛选第42-44页
            4.3.1.1 RT-PCR第42-43页
            4.3.1.2 细胞抑制率第43-44页
        4.3.2 Lam-PEI/siRNA-II 对 MCF-7 细胞抑制率第44-45页
        4.3.3 细胞周期分布第45-46页
        4.3.4 细胞凋亡第46-47页
        4.3.5 RT-PCR第47-48页
    4.4 讨论第48-50页
第5章 Lam-PEI 负载 Bmi-1 siRNA 体内抗肿瘤作用研究第50-57页
    5.1 实验仪器与材料第50页
    5.2 实验方法第50-51页
        5.2.1 荷瘤裸鼠模型的建立第50页
        5.2.2 Lam-PEI 转运 siRNA 肿瘤给药系统对裸鼠肿瘤组织的影响第50-51页
            5.2.2.1 裸鼠给药方法第50-51页
            5.2.2.2 肿瘤生长抑制率的考察第51页
        5.2.3 RT-PCR 检测裸鼠肿瘤中的 Bmi-1 mRNA 的表达第51页
    5.3 实验结果第51-55页
        5.3.1 荷瘤裸鼠模型建立第51-52页
        5.3.2 Lam-PEI 载体对裸鼠体重的影响第52页
        5.3.3 Lam-PEI 载体对裸鼠肿瘤组织的影响第52-53页
        5.3.4 Lam-PEI 载体对裸鼠肿瘤的抑制作用第53-55页
        5.3.5 Lam-PEI 载体对裸鼠肿瘤中 Bmi-1 mRNA 表达的影响第55页
    5.4 讨论第55-57页
第6章 叶酸靶向阳离子化昆布多糖的构建及体外活性研究第57-67页
    6.1 实验试剂与仪器第57页
    6.2 实验方法第57-59页
        6.2.1 叶酸靶向阳离子化昆布多糖的合成与表征第57-59页
            6.2.1.1 Lam-PEI 的合成第57-58页
            6.2.1.2 红外分光光度分析法第58页
            6.2.1.3 紫外分光光度分析法第58页
            6.2.1.41 H-NMR第58-59页
            6.2.1.5 电位检测第59页
        6.2.2 Lam-PEI-FA 与 siRNA 体外相互作用第59页
            6.2.2.1 Lam-PEI-FA 结合 siRNA 能力测试第59页
            6.2.2.2 转染效率第59页
            6.2.2.3 MTT 法检测细胞抑制率第59页
            6.2.2.4 FCM 检测转染细胞的周期分布第59页
            6.2.2.5 FCM 检测细胞凋亡第59页
    6.3 实验结果第59-66页
        6.3.1 Lam-PEI-FA 的表征第59-62页
            6.3.1.1 FT-IR第59-60页
            6.3.1.2 UV 吸收光谱图第60-61页
            6.3.1.3 1H-NMR第61页
            6.3.1.4 电位检测第61-62页
        6.3.2 Lam-PEI-FA 与 siRNA 体外相互作用第62-66页
            6.3.2.1 Lam-PEI-FA 结合 siRNA 能力测试第62-63页
            6.3.2.2 转染效率第63-64页
            6.3.2.3 细胞抑制率第64页
            6.3.2.4 细胞周期分布第64-65页
            6.3.2.5 细胞凋亡第65-66页
    6.4 讨论第66-67页
全文总结第67-68页
参考文献第68-72页
综述第72-86页
    参考文献(综述)第82-86页
个人简历第86页
获得学士学位与硕士学位的学校和时间第86页
在校期间发表的学术论文与研究成果第86-87页
致谢第87页

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