摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-20页 |
1.1 PRRSV 概论 | 第10-12页 |
1.1.1 PRRS 简介 | 第10页 |
1.1.2 PRRSV 的类型及感染途径 | 第10-11页 |
1.1.3 PRRSV 的形态特征 | 第11-12页 |
1.2 PRRSV 的分子生物学研究概况 | 第12-15页 |
1.2.1 PRRSV 的非结构蛋白 | 第12-13页 |
1.2.2 PRRSV 的结构蛋白 | 第13-15页 |
1.3 GP5 蛋白研究概况 | 第15-17页 |
1.3.1 GP5 蛋白的结构与功能 | 第15-16页 |
1.3.2 GP5 蛋白免疫的国内外研究进展 | 第16-17页 |
1.4 选题目的、意义及依据 | 第17-20页 |
1.4.1 选题目的、意义 | 第17-18页 |
1.4.2 选题依据 | 第18-20页 |
第二章 GP5、GP5-Fc 和 GP5N-Fc 蛋白的表达及纯化 | 第20-27页 |
2.1 材料与试剂 | 第20-21页 |
2.1.1 菌株、质粒与细胞 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂盒及试剂 | 第20页 |
2.1.3 主要溶液的配方 | 第20-21页 |
2.1.4 主要仪器 | 第21页 |
2.2 方法 | 第21-25页 |
2.2.1 重组质粒的构建 | 第21-22页 |
2.2.2 重组质粒的表达及检测 | 第22-24页 |
2.2.3 GP5、GP5-Fc 和 GP5N-Fc 蛋白的纯化 | 第24-25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-27页 |
2.3.1 GP5 蛋白表达检测 | 第25-26页 |
2.3.2 GP5、GP5-Fc 和 GP5N-Fc 蛋白纯化检测 | 第26-27页 |
第三章 GP5、GP5-Fc 和 GP5N-Fc 蛋白免疫及免疫效果的分析 | 第27-33页 |
3.1 材料与试剂 | 第27页 |
3.1.1 毒株、细胞和实验动物 | 第27页 |
3.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第27页 |
3.1.3 主要溶液的配方 | 第27页 |
3.1.4 主要仪器 | 第27页 |
3.2 方法 | 第27-30页 |
3.2.1 免疫小鼠制备抗血清 | 第27-28页 |
3.2.2 纯化 TA-12 病毒 | 第28页 |
3.2.3 GP5、GP5-Fc 和 GP5N-Fc 蛋白免疫效果分析 | 第28-30页 |
3.3 结果与分析 | 第30-33页 |
3.3.1 间接 ELISA 与 Western-blot 检测 | 第30-31页 |
3.3.2 病毒中和实验 | 第31-33页 |
第四章 GP5 胞内外结构域免疫原性的分析 | 第33-40页 |
4.1 材料与试剂 | 第33页 |
4.1.1 菌株和质粒 | 第33页 |
4.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第33页 |
4.1.3 主要溶液的配制 | 第33页 |
4.1.4 主要仪器 | 第33页 |
4.2 方法 | 第33-37页 |
4.2.1 重组质粒 pGEX-2T-GP5N 和 pGEX-2T-GP5C 的构建 | 第33-35页 |
4.2.2 重组质粒 pGEX-2T-GP5N、pGEX-2T-GP5C 的表达及检测 | 第35页 |
4.2.3 GST-GP5N 和 GST-GP5C 蛋白的纯化 | 第35-36页 |
4.2.4 间接 ELISA 检测 | 第36-37页 |
4.3 结果与分析 | 第37-40页 |
4.3.1 质粒 pGEX-2T-GP5N 和 pGEX-2T-GP5C 的构建 | 第37页 |
4.3.2 GST-GP5N 和 GST-GP5C 蛋白表达检测 | 第37-38页 |
4.3.3 GST-GP5N 和 GST-GP5C 蛋白纯化检测 | 第38-39页 |
4.3.4 ELISA 分析 | 第39-40页 |
第五章 讨论 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
作者简介 | 第50页 |