| Abstract | 第1-12页 |
| Chapter 1:Introduction | 第12-21页 |
| ·Literature review | 第13-21页 |
| ·Shikimic acid pathway | 第13-14页 |
| ·Shikimic acid | 第14-15页 |
| ·Thermosensitive plasmid methods | 第15-17页 |
| ·PCR technique | 第17-18页 |
| ·Description of shiA gene | 第18-19页 |
| ·Meaning of the study | 第19-20页 |
| ·Objectives of this study | 第20-21页 |
| Chapter 2:Materials and Methods | 第21-35页 |
| ·Materials | 第21-27页 |
| ·Chemical and Biological reagents | 第21-25页 |
| ·Instruments and equipments | 第25-27页 |
| ·Methods | 第27-35页 |
| ·Bacteriological techniques | 第27-28页 |
| ·Bacterial growth conditions | 第27-28页 |
| ·Presevration of Culture | 第28页 |
| ·Genetics Methods | 第28-30页 |
| ·Molecular biology techniques | 第30-33页 |
| ·Spectrophotometric methods | 第33页 |
| ·Software used | 第33-35页 |
| Chapter 3:Results | 第35-52页 |
| ·Construction of shiA gene knocked out mutants of E. coli JM83 and JDL02 | 第35-47页 |
| ·PCR amplification of shiA (f) and shiA (b) | 第36-38页 |
| ·Cloning of PCR products | 第38-39页 |
| ·Construction of pMAK-shiA (f)-shiA (b) plasmid | 第39-40页 |
| ·Cointegration of Plasmid into chromosome | 第40-43页 |
| ·Plasmid excision from chromosome | 第43-44页 |
| ·Elimination of thermosensitive plasmid | 第44-46页 |
| ·Sequencing | 第46-47页 |
| ·Analysis of Shikimic acid accumulation | 第47-52页 |
| ·Standard curve of Shikimic acid | 第47-49页 |
| ·Validation of spectrophotometric method | 第49页 |
| ·Shikimic acid assay | 第49-50页 |
| ·Optimization of shikimie acid accumulation | 第50页 |
| ·Shikimic acid transport | 第50-52页 |
| Chapter4:Discussion | 第52-55页 |
| ·Gene targeting | 第52页 |
| ·Deletion of shiA gene on E. coli chromosome | 第52-53页 |
| ·Use of expression plasmid | 第53-54页 |
| ·Transport of shikimic acid in new strains | 第54-55页 |
| Conclusion | 第55-56页 |
| References | 第56-60页 |
| ACKNOWLEDGMENTS | 第60-61页 |
