| 中文摘要 | 第3-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 英文缩略词 | 第12-17页 |
| 前言 | 第17-22页 |
| 第一章 己烯雌酚对小鼠精母细胞染毒模型建立及损伤效应评价 | 第22-40页 |
| 1.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 1.1.1 细胞系 | 第22页 |
| 1.1.2 主要生化材料、试剂盒 | 第22-23页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 1.1.4 主要耗材 | 第24页 |
| 1.1.5 主要生物信息学分析软件、程序、数据库 | 第24页 |
| 1.2 实验方法 | 第24-30页 |
| 1.2.1 GC-2细胞培养及药物配置 | 第24页 |
| 1.2.2 CCK8法检测细胞活性 | 第24页 |
| 1.2.3 细胞形态观察 | 第24-25页 |
| 1.2.4 流式细胞仪检测细胞周期 | 第25页 |
| 1.2.5 EdU法检测细胞增殖 | 第25-26页 |
| 1.2.6 活性氧检测 | 第26-27页 |
| 1.2.7 Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态 | 第27页 |
| 1.2.8 流式细胞仪测凋亡率 | 第27-28页 |
| 1.2.9 Western Blot法检测Bax、Bcl-2、Caspase 3、Caspase 9表达水平 | 第28-30页 |
| 1.3 实验结果 | 第30-38页 |
| 1.3.1 DES对GC-2细胞的增殖抑制作用 | 第30页 |
| 1.3.2 DES对GC-2细胞形态学改变的影响 | 第30-31页 |
| 1.3.3 DES对GC-2细胞周期的影响 | 第31-33页 |
| 1.3.4 DES对GC-2新生细胞的影响 | 第33页 |
| 1.3.5 DES对GC-2细胞内ROS含量的影响 | 第33-35页 |
| 1.3.6 DES诱导GC-2细胞出现凋亡的形态 | 第35页 |
| 1.3.7 DES对GC-2细胞凋亡率的影响 | 第35-37页 |
| 1.3.8 DES对GC-2细胞凋亡蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
| 1.4 讨论 | 第38-40页 |
| 第二章 DNA甲基化在己烯雌酚生殖毒性中的作用研究 | 第40-66页 |
| 2.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第40-41页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第41页 |
| 2.1.3 主要生物信息学数据库 | 第41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-48页 |
| 2.2.1 全基因组甲基化检测 | 第41-42页 |
| 2.2.1.1 DNA提取 | 第41-42页 |
| 2.2.1.2 5-mC点杂交法检测DNA总甲基化水平 | 第42页 |
| 2.2.2 Real-time PCR法检测DNMTs mRNA的表达 | 第42-44页 |
| 2.2.3 Western blot法检测GC-2细胞DNMTs蛋白水平 | 第44页 |
| 2.2.4 DNA甲基化芯片 | 第44-45页 |
| 2.2.5 MSP验证DNA甲基化修饰异常基因 | 第45-48页 |
| 2.2.6 DNA测序 | 第48页 |
| 2.2.7 Real-time PCR检测GC-2细胞Rxra mRNA表达 | 第48页 |
| 2.3 实验结果 | 第48-64页 |
| 2.3.1 DES对GC-2细胞DNA总甲基化水平的影响 | 第48-49页 |
| 2.3.2 DES对GC-2细胞DNMTs mRNA表达的影响 | 第49-50页 |
| 2.3.2.1 DNMTs各基因及β-actin的熔解曲线 | 第49页 |
| 2.3.2.2 Real-time PCR检测DNMTs mRNA表达水平 | 第49-50页 |
| 2.3.3 DES对GC-2细胞DNMTs蛋白表达的影响 | 第50-51页 |
| 2.3.4 DNA甲基化芯片检测结果 | 第51-61页 |
| 2.3.5 MSP检测基因甲基化状态 | 第61-62页 |
| 2.3.6 Rxra基因MSP扩增产物的测序结果 | 第62-63页 |
| 2.3.7 DES对GC-2细胞Rxra mRNA表达的影响 | 第63-64页 |
| 2.3.7.1 Rxra基因及β-actin的熔解曲线 | 第63页 |
| 2.3.7.2 Real-time PCR检测Rxra mRNA表达水平 | 第63-64页 |
| 2.4 讨论 | 第64-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 在学期间的研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
