| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 细菌鞭毛简介 | 第11-16页 |
| 1.1.1 鞭毛的合成和组装 | 第12-14页 |
| 1.1.2 鞭毛合成的调控 | 第14-15页 |
| 1.1.3 鞭毛的运动性和生物膜 | 第15页 |
| 1.1.4 鞭毛基因第一级表达产物FlhD4C2复合体的结构与功能研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2 沙门氏菌FliT、FliD蛋白的介绍 | 第16-18页 |
| 1.3 大肠杆菌O157：H7 Z0021蛋白的介绍 | 第18-20页 |
| 1.4 晶体结构的解析 | 第20-22页 |
| 1.4.1 X射线的产生 | 第20页 |
| 1.4.2 X射线衍射原理 | 第20-22页 |
| 1.5 本课题的研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 stFliD与stFliT94作用最小片段的确定 | 第23-31页 |
| 2.1 实验材料和方法 | 第23-28页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第24页 |
| 2.1.3 实验方法 | 第24-28页 |
| 2.1.3.1 构建表达载体 | 第24-27页 |
| 2.1.3.2 构建FliT94和FliD共表达菌株 | 第27页 |
| 2.1.3.3 蛋白质过表达与纯化 | 第27-28页 |
| 2.2 实验结果 | 第28-29页 |
| 2.2.1 stFliDl-116aa、stFliD1-215aa、stFliD215-end的蛋白纯化 | 第28页 |
| 2.2.2 确定与stFliT94作用的stFliD最小片段 | 第28-29页 |
| 2.3 本章小结 | 第29-31页 |
| 第三章 stFliT94-stFliD215-end蛋白复合物的纯化结晶 | 第31-41页 |
| 3.1 实验方法与步骤 | 第31-32页 |
| 3.1.1 蛋白复合物的纯化结晶 | 第31页 |
| 3.1.2 胰蛋白酶酶切条件的摸索 | 第31-32页 |
| 3.1.3 胰蛋白酶酶解产物大量纯化实验 | 第32页 |
| 3.2 实验结果 | 第32-40页 |
| 3.2.1 stFliT94-stFliD(215-end)蛋白纯化结晶 | 第32-34页 |
| 3.2.2 stFliT94-stF1iD(215-end)no-tag蛋白复合物纯化结晶 | 第34-37页 |
| 3.2.3 stFliT94-stFliD(215-end)胰蛋白酶切蛋白复合物的纯化 | 第37-39页 |
| 3.2.4 stFliT94-stFliD(215-end)蛋白复合体结晶条件筛选和晶体优化 | 第39-40页 |
| 3.3 本章小结 | 第40-41页 |
| 第四章 stFliT与stFliD、stFlhD_4C_2相互作用研究 | 第41-49页 |
| 4.1 实验材料及仪器 | 第41-42页 |
| 4.1.1 菌株及载体 | 第41页 |
| 4.1.2 仪器与试剂 | 第41-42页 |
| 4.2 具体实验步骤 | 第42-44页 |
| 4.2.1 stFliT突变体的构建及突变体蛋白纯化 | 第42-43页 |
| 4.2.2 Pull down实验步骤 | 第43-44页 |
| 4.3 实验结果 | 第44-48页 |
| 4.3.1 stFliT突变体蛋白纯化 | 第44-45页 |
| 4.3.2 stFliT-stFliD pull down实验 | 第45-47页 |
| 4.3.3 stFliT-stFlhDC复合物pull down实验 | 第47-48页 |
| 4.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第五章 大肠杆菌O157：H7 Z0021蛋白结构与功能研究 | 第49-61页 |
| 5.1 Z0021蛋白背景介绍 | 第49-51页 |
| 5.2 Z0021蛋白基本信息 | 第51-52页 |
| 5.3 实验材料和方法 | 第52-54页 |
| 5.3.1 菌株及载体 | 第52页 |
| 5.3.2 试剂和仪器 | 第52页 |
| 5.3.3 基因的克隆 | 第52-54页 |
| 5.4 实验结果 | 第54-60页 |
| 5.4.1 Z0021蛋白纯化 | 第54-59页 |
| 5.4.2 Z0021蛋白对细菌移动性的影响 | 第59-60页 |
| 5.5 本章小结 | 第60-61页 |
| 全文总结 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第69页 |
