| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| 1.1 脱水素基因概述及研究进展 | 第12-16页 |
| 1.1.1 脱水素的结构特征 | 第12-13页 |
| 1.1.2 脱水素的功能 | 第13-14页 |
| 1.1.3 脱水素基因的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2 Westernblot介绍及应用 | 第16-17页 |
| 1.3 实时荧光定量PCR的原理以及应用 | 第17-19页 |
| 1.3.1 qRT-PCR技术的原理及探针种类 | 第17页 |
| 1.3.2 qRT-PCR技术的应用 | 第17-19页 |
| 1.4 Na~+和K~+的积累与盐胁迫应答作用 | 第19页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 转脱水素基因烟草蛋白表达水平的鉴定 | 第21-29页 |
| 2.1 试验材料、试剂及仪器 | 第21-23页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 试验仪器及设备 | 第22-23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 转基因烟草叶片总蛋白的提取 | 第23页 |
| 2.2.2 蛋白定量 | 第23-24页 |
| 2.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第24-25页 |
| 2.2.4 Western blot验证 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-28页 |
| 2.3.1 蛋白质定量结果 | 第26-27页 |
| 2.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第27-28页 |
| 2.3.3 Western blot结果分析 | 第28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 第三章 盐胁迫和低温胁迫转基因烟草SsDHN基因表达量分析 | 第29-42页 |
| 3.1 试验材料、试剂及仪器 | 第29-30页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 3.1.2 试剂 | 第29页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第29-30页 |
| 3.2 试验方法 | 第30-33页 |
| 3.2.1 烟草的胁迫处理 | 第30页 |
| 3.2.2 烟草各组织总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 3.2.3 反转录 | 第31页 |
| 3.2.4 引物设计 | 第31页 |
| 3.2.5 引物检测 | 第31-32页 |
| 3.2.6 qRT-PCR反应 | 第32-33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-40页 |
| 3.3.1 RNA的检测结果 | 第33页 |
| 3.3.2 引物的检测 | 第33-35页 |
| 3.3.3 实时荧光定量PCR数据分析 | 第35-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 3.4.1 低温胁迫 | 第40-41页 |
| 3.4.2 盐胁迫 | 第41-42页 |
| 第四章 转基因烟草抗逆生理功能分析 | 第42-52页 |
| 4.1 试验材料与试剂 | 第42页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第42页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第42页 |
| 4.1.3 主要仪器及设备 | 第42页 |
| 4.2 试验方法 | 第42-44页 |
| 4.2.1 组织培养烟草种子及发芽率的测定 | 第42-43页 |
| 4.2.2 盐胁迫幼苗及恢复 | 第43页 |
| 4.2.3 Na~+、K~+离子含量的测定 | 第43-44页 |
| 4.2.4 数据统计及分析 | 第44页 |
| 4.3 结果与分析 | 第44-50页 |
| 4.3.1 组培种子的发芽情况 | 第44-45页 |
| 4.3.2 烟草苗根长的测定 | 第45-47页 |
| 4.3.3 盐胁迫幼苗及恢复结果分析 | 第47页 |
| 4.3.4 K~+和Na~+含量测定结果分析 | 第47-50页 |
| 4.4 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-53页 |
| 1.脱水素基因成功表达 | 第52页 |
| 2.SsDHN基因在低温和盐胁迫条件下相对表达量呈上调趋势 | 第52页 |
| 3.非生物胁迫下转基因烟草的生长状态和生理指标好于野生型 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读学位期间发表文章 | 第61-62页 |
