| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-31页 |
| 1 黄曲霉毒素简介 | 第14-23页 |
| 1.1 黄曲霉毒素的分子结构及理化性质 | 第14-15页 |
| 1.2 AFB1的危害 | 第15-16页 |
| 1.3 食品中AFT的限量标准 | 第16-17页 |
| 1.4 黄曲霉毒素B1的检测方法 | 第17-23页 |
| 1.4.1 理化检测方法 | 第17-20页 |
| 1.4.2 免疫学检测方法 | 第20-23页 |
| 1.4.3 生物学检测方法 | 第23页 |
| 2 抗独特型抗体 | 第23-29页 |
| 2.1 抗独特性抗体的由来——免疫网络学说 | 第24-25页 |
| 2.2 抗独特型抗体及其种类 | 第25页 |
| 2.3 抗独特型抗体的制备方法 | 第25-27页 |
| 2.3.1 多克隆Aid制备技术 | 第26页 |
| 2.3.2 单克隆Aid制备技术 | 第26-27页 |
| 2.3.3 基因工程技术制备Aid | 第27页 |
| 2.4 抗独特型抗体的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.4.1 抗AFB1抗独特型抗体亚型的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.4.2 抗AFB1抗独特型抗体特异性的鉴定 | 第28页 |
| 2.5 抗独特型抗体的应用 | 第28-29页 |
| 2.5.1 应用于无毒免疫学检测 | 第28页 |
| 2.5.2 在疫苗研究中的应用 | 第28-29页 |
| 2.5.3 在自身免疫疾病治疗方面的应用 | 第29页 |
| 2.5.4 制备抗体酶 | 第29页 |
| 3 选题的目的和意义 | 第29-31页 |
| 第二章 抗体纯化及酶切片段的制备 | 第31-51页 |
| 1 材料 | 第32-33页 |
| 1.1 主要仪器 | 第32页 |
| 1.2 主要试剂 | 第32-33页 |
| 2 方法 | 第33-41页 |
| 2.1 抗AFB1兔多克隆抗体的纯化及其特性鉴定 | 第33-38页 |
| 2.1.1 实验试剂的准备 | 第33-35页 |
| 2.1.2 抗体的纯化 | 第35页 |
| 2.1.3 纯化血清的特性鉴定 | 第35-38页 |
| 2.2 兔血清抗体双片段F(ab')_2的制备 | 第38-41页 |
| 2.2.1 酶切条件的优化 | 第38-39页 |
| 2.2.2 酶切片段的纯化 | 第39页 |
| 2.2.3 纯化前后双片段F(ab')_2特性的鉴定 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-49页 |
| 3.1 抗黄曲霉毒素B1兔多克隆抗体纯化纯化前后的性质分析 | 第41-43页 |
| 3.1.1 抗体纯化前后效价分析 | 第41页 |
| 3.1.2 抗体纯化前后灵敏度分析 | 第41-42页 |
| 3.1.3 纯化前后抗体纯度检测 | 第42-43页 |
| 3.1.4 饱和硫酸铵三步盐析纯化抗体 | 第43页 |
| 3.2 纯化兔血清多克隆抗体F(ab')_2片段的制备及片段特性的鉴定 | 第43-49页 |
| 3.2.1 酶切前酸化处理对抗体的影响 | 第43-44页 |
| 3.2.2 酶切条件的优化 | 第44-46页 |
| 3.2.3 酶切片段的纯化 | 第46页 |
| 3.2.4 酶切片段纯化前后纯度比较 | 第46-47页 |
| 3.2.5 酶切片段的滴度测定 | 第47-49页 |
| 4 小结与讨论 | 第49-51页 |
| 4.1 小结 | 第49页 |
| 4.2 讨论 | 第49-51页 |
| 4.2.1 抗体纯化 | 第49页 |
| 4.2.2 蛋白酶的选择 | 第49-50页 |
| 4.2.3 酶切条件的选择 | 第50页 |
| 4.2.4 分离纯化条件的选择 | 第50-51页 |
| 第三章 抗独特型抗体的制备及特异性分析 | 第51-67页 |
| 1 材料与方法 | 第52-57页 |
| 1.1 材料 | 第52-53页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第52页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第52页 |
| 1.1.3 主要材料 | 第52-53页 |
| 1.2 方法 | 第53-57页 |
| 1.2.1 ELISA相关溶液的配制 | 第53页 |
| 1.2.2 动物饲养及处理 | 第53页 |
| 1.2.3 免疫方法 | 第53-54页 |
| 1.2.4 抗独特型抗体(抗血清)的制备及分析 | 第54-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-64页 |
| 2.1 抗体产生进程 | 第57-58页 |
| 2.2 间接非竞争ELISA测定抗独特型多抗的效价 | 第58-61页 |
| 2.2.1 包被溶液pH值对包被抗原包被效果的影响 | 第58-59页 |
| 2.2.2 多克隆抗体效价的测定 | 第59-61页 |
| 2.3 抗Ab1和F(ab')_2抗血清的间接竞争ELISA灵敏度分析 | 第61-64页 |
| 2.3.1 Ab1和F(ab')_2免疫所得抗独特型抗体间接竞争ELISA的竞争抑制曲线 | 第61-62页 |
| 2.3.2 Ab2与包被抗原(AFB1-cOVA)竞争Ab1中的AFB1结合位点 | 第62-64页 |
| 2.3.3 抗Ab1和F(ab')_2抗血清同AFB1的内影像关系的初步研究 | 第64页 |
| 3 小结与讨论 | 第64-67页 |
| 3.1 小结 | 第64-65页 |
| 3.1.1 包被条件的优化 | 第64-65页 |
| 3.1.2 抗独特型抗体血清间接非竞争ELISA分析 | 第65页 |
| 3.1.3 抗独特型抗体血清间接竞争ELISA及内影像关系的分析 | 第65页 |
| 3.2 讨论 | 第65-67页 |
| 3.2.1 抗原 | 第66页 |
| 3.2.2 实验动物 | 第66-67页 |
| 第四章 总结与展望 | 第67-69页 |
| 1 总结 | 第67-68页 |
| 1.1 抗体的纯化 | 第67页 |
| 1.2 抗体片段F(ab')_2的制备及分离纯化 | 第67页 |
| 1.3 抗独特型多抗的制备及其内影像关系初步研究 | 第67-68页 |
| 2 展望 | 第68-69页 |
| 2.1 单克隆抗体的制备 | 第68页 |
| 2.2 抗独特型抗体的检测 | 第68页 |
| 2.3 ELISA无毒检测试剂盒的研制 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
