| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-26页 |
| 1.1 结核病概况 | 第12页 |
| 1.2 结核分枝杆菌的持续感染机制 | 第12-14页 |
| 1.3 精氨酸代谢及一氧化氮的免疫调节作用 | 第14-20页 |
| 1.3.1 精氨酸代谢及NO的生物学特性 | 第14-16页 |
| 1.3.2 一氧化氮合酶(NOS)及精氨酸酶 | 第16页 |
| 1.3.3 细胞因子与iNOS和阳离子氨基酸转运蛋白(CAT-2B)的作用 | 第16-18页 |
| 1.3.4 NO在分枝杆菌致病机理方面的免疫调节作用 | 第18-20页 |
| 1.4 树突状细胞与免疫调节 | 第20-23页 |
| 1.4.1 树突状细胞(DCs)的功能及分类 | 第20页 |
| 1.4.2 NO与树突状细胞(DCs) | 第20-22页 |
| 1.4.3 树突状细胞(DCs)与机体免疫 | 第22-23页 |
| 1.5 细胞凋亡的概念及主要信号通路 | 第23-26页 |
| 1.5.1 细胞凋亡的概念及其检测方法 | 第23-24页 |
| 1.5.2 细胞凋亡的调控基因及主要信号转导途径 | 第24-25页 |
| 1.5.3 NO对细胞凋亡的双重作用机制 | 第25-26页 |
| 2 研究目的与意义 | 第26-27页 |
| 3 材料与方法 | 第27-36页 |
| 3.1 材料 | 第27-29页 |
| 3.1.1 培养基及主要试剂 | 第27-28页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第28页 |
| 3.1.3 实验菌种及实验动物 | 第28页 |
| 3.1.4 荧光定量PCR引物 | 第28-29页 |
| 3.1.5 数据统计分析 | 第29页 |
| 3.2 方法 | 第29-36页 |
| 3.2.1 标准菌株的培养与计数 | 第29页 |
| 3.2.2 小鼠树突状细胞(DCs)的培养与鉴定 | 第29-30页 |
| 3.2.3 不同毒力牛分枝杆菌感染小鼠树突状细胞 | 第30页 |
| 3.2.4 样品收集及RNA提取 | 第30-31页 |
| 3.2.5 反转录cDNA第一链的合成 | 第31-32页 |
| 3.2.6 荧光定量PCR | 第32页 |
| 3.2.7 NO的检测 | 第32-33页 |
| 3.2.8 尿素含量的检测 | 第33页 |
| 3.2.9 小鼠树突状细胞线粒体的提取及细胞色素C的检测 | 第33-35页 |
| 3.2.10 树突状细胞电镜样品的制备 | 第35页 |
| 3.2.11 小鼠树突状细胞凋亡的检测(PI单染法—亚‘G1’峰检测法) | 第35页 |
| 3.2.12 胞内菌计数 | 第35-36页 |
| 4 结果 | 第36-48页 |
| 4.1 小鼠树突状细胞分化与纯度检测 | 第36-37页 |
| 4.2 定量PCR的引物验证 | 第37-38页 |
| 4.3 精氨酸代谢通路相关基因的转录水平检测 | 第38-42页 |
| 4.3.1 Slc7A1基因的相对转录水平 | 第38-39页 |
| 4.3.2 Slc7A2基因的相对转录水平 | 第39-40页 |
| 4.3.3 iNOS基因的相对转录水平 | 第40-41页 |
| 4.3.4 精氨酸酶的相对转录水平 | 第41-42页 |
| 4.4 NO浓度检测 | 第42-43页 |
| 4.5 尿素浓度检测 | 第43-44页 |
| 4.6 细胞色素C的释放实验及树突状细胞电镜的观察 | 第44-45页 |
| 4.7 细胞凋亡检测 | 第45-47页 |
| 4.8 细菌胞内存活检测 | 第47-48页 |
| 5 讨论 | 第48-54页 |
| 5.1 不同毒力分枝杆菌感染树突状细胞后L-精氨酸主要代谢酶转录水平的差异分析 | 第48-49页 |
| 5.2 小鼠树突状细胞中精氨酸的表达 | 第49-50页 |
| 5.3 NO在树突状细胞凋亡通路中的作用 | 第50-52页 |
| 5.4 NO在牛分枝杆菌持续感染方面的作用 | 第52-54页 |
| 6 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
