| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1.1 PTHrP基因的研究进展 | 第12-16页 |
| 1.1.1 PTHrP基因概况 | 第12-13页 |
| 1.1.2 PTHrP蛋白和受体 | 第13-14页 |
| 1.1.3 PTHrP的生物学作用 | 第14-16页 |
| 1.2 PTHrP等几个基因在钙代谢方面的研究进展 | 第16-23页 |
| 1.2.1 PTHrP基因在骨骼钙代谢中的作用 | 第16-18页 |
| 1.2.2 PTHrP基因在乳腺钙代谢中的作用 | 第18-20页 |
| 1.2.3 △FosB、S100A4、S100A13、Smad4、Runx2和Stat5a基因在钙代谢中的作用 | 第20-23页 |
| 1.3 腺病毒载体的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.3.1 腺病毒的基本结构 | 第23页 |
| 1.3.2 腺病毒载体的发展简介 | 第23-24页 |
| 1.3.3 腺病毒载体的构建及优点 | 第24页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 靶向山羊PTHrP基因的超表达重组腺病毒载体的构建与鉴定 | 第26-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.1.2 试验材料 | 第26页 |
| 2.1.3 主要试剂配方 | 第26-27页 |
| 2.2 试验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 克隆载体pMD19-T-PTHrP的构建 | 第27-32页 |
| 2.2.2 腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-PTHrP的构建与鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.3 重组质粒pAdEasy-CMV-PTHrP和pAdEasy-CMV的构建、鉴定及扩增 | 第33-34页 |
| 2.3 结果与分析 | 第34-35页 |
| 2.3.1 克隆载体pMD19-T-PTHrP的构建 | 第34页 |
| 2.3.2 腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-PTHrP的构建与鉴定 | 第34-35页 |
| 2.3.3 重组质粒pAdEasy-CMV-PTHrP的构建及鉴定 | 第35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.4.1 山羊PTHrP基因的克隆 | 第35-36页 |
| 2.4.2 重组腺病毒载体的构建 | 第36页 |
| 2.5 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 山羊PTHrP基因超表达腺病毒的制备与效率检测 | 第37-48页 |
| 3.1 试验材料 | 第37-39页 |
| 3.1.1 主要仪器设备 | 第37页 |
| 3.1.2 试验材料 | 第37-38页 |
| 3.1.3 主要试剂配方 | 第38-39页 |
| 3.2 试验方法 | 第39-44页 |
| 3.2.1 PTHrP超表达重组腺病毒的包装与扩增 | 第39-41页 |
| 3.2.2 PTHrP超表达重组腺病毒的滴度测定 | 第41页 |
| 3.2.3 PTHrP超表达重组腺病毒感染山羊乳腺上皮细胞 | 第41页 |
| 3.2.4 PTHrP重组腺病毒超表达效率的检测 | 第41-44页 |
| 3.3 试验结果与分析 | 第44-46页 |
| 3.3.1 PTHrP超表达重组腺病毒的包装、扩增及滴度测定 | 第44页 |
| 3.3.2 PTHrP超表达病毒液的PCR鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3.3 PTHrP超表达重组腺病毒最佳感染剂量的测定 | 第45页 |
| 3.3.4 PTHrP超表达重组腺病毒效率的检测 | 第45-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 3.4.1 PTHrP超表达重组腺病毒的包装、扩增及滴度测定 | 第46-47页 |
| 3.4.2 PTHrP超表达重组腺病毒效率的检测 | 第47页 |
| 3.5 小结 | 第47-48页 |
| 第四章 山羊PTHrP基因对钙代谢相关基因表达的影响 | 第48-54页 |
| 4.1 试验材料 | 第48页 |
| 4.1.1 主要仪器设备 | 第48页 |
| 4.1.2 试验材料 | 第48页 |
| 4.2 试验方法 | 第48-50页 |
| 4.2.1 PTHrP超表达重组腺病毒和干扰重组腺病毒感染山羊乳腺上皮细胞 | 第48-49页 |
| 4.2.2 RT-qPCR检测PTHrP超表达和低表达对钙代谢相关基因的影响 | 第49-50页 |
| 4.3 结果与分析 | 第50-52页 |
| 4.3.1 乳腺上皮细胞中总RNA提取 | 第50页 |
| 4.3.2 RT-qPCR检测PTHrP对钙代谢相关基因表达的影响 | 第50-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-53页 |
| 4.5 小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-65页 |
| 缩略词 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
