摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-9页 |
第一章 前言 | 第14-36页 |
1.1 基因组定点编辑技术简介 | 第14-16页 |
1.2 ZFNs技术简介 | 第16页 |
1.3 TALENs技术概述 | 第16-24页 |
1.3.1 TALE的发现 | 第17页 |
1.3.2 TALE结构和分布 | 第17-19页 |
1.3.3 TALE识别密码的破解及应用 | 第19-21页 |
1.3.4 TALEN靶位点设计原则 | 第21页 |
1.3.5人工TALEN的组装方法 | 第21-22页 |
1.3.6 TALEN技术在植物中的应用 | 第22-24页 |
1.4 CRISPR/Cas9技术概述 | 第24-32页 |
1.4.1 CRISPR/Cas系统的研究历史 | 第26-27页 |
1.4.2 CRISPR/Cas系统的分类 | 第27-28页 |
1.4.3 CRISPR/Cas9系统的工作原理 | 第28-29页 |
1.4.4 CRISPR/Cas9对PAM区域的识别 | 第29-30页 |
1.4.5 CRISPR/Cas9靶位点设计原则 | 第30页 |
1.4.6 CRISPR/Cas9系统在植物中的应用 | 第30-31页 |
1.4.7 CRISPR/Cas9系统的脱靶问题 | 第31-32页 |
1.5 水稻OsERF922基因简介 | 第32-33页 |
1.6 本研究的立题依据和技术路线 | 第33-36页 |
1.6.1 本研究的立题依据 | 第33-34页 |
1.6.2 技术路线 | 第34-36页 |
第二章 利用基于AvrXa23的TALENs系统创制水稻OsERF922基因突变体 | 第36-79页 |
2.1 材料和方法 | 第36-60页 |
2.1.1 试验材料 | 第36-44页 |
2.1.2 试验方法 | 第44-60页 |
2.2 结果与分析 | 第60-76页 |
2.2.1 OsERF922基因在三个水稻材料中的表达分析 | 第60-63页 |
2.2.2 TALENs设计及活性检测结果 | 第63-69页 |
2.2.3 水稻遗传转化结果 | 第69-72页 |
2.2.4 水稻愈伤中TALENs(T-KJ9/KJ10)诱导的靶点突变分析 | 第72-74页 |
2.2.5 水稻转基因阳性T_0植株靶点突变检测结果 | 第74-76页 |
2.3 小结与讨论 | 第76-79页 |
第三章 利用CRISPR/Cas9技术靶向修饰OsERF922基因改良水稻稻瘟病抗性 | 第79-115页 |
3.1 材料和方法 | 第79-89页 |
3.1.1 试验材料 | 第79-82页 |
3.1.2 试验方法 | 第82-89页 |
3.2 结果与分析 | 第89-112页 |
3.2.1 CRISPR/Cas9打靶设计及活性检测结果 | 第89-91页 |
3.2.2 水稻遗传转化结果 | 第91-94页 |
3.2.3 CRISPR/Cas9诱导的突变率分析 | 第94-95页 |
3.2.4 CRISPR/Cas9诱导的突变特征分析 | 第95-100页 |
3.2.5 CRISPR/Cas9诱导的突变从T_0向T_1和T_2代的传递规律分析 | 第100-105页 |
3.2.6 T-DNA-free突变植株的检测结果 | 第105-107页 |
3.2.7 突变材料稻瘟病菌接种结果分析 | 第107-110页 |
3.2.8 突变材料的主要农艺性状考察结果 | 第110-112页 |
3.3 小结与讨论 | 第112-115页 |
第四章 全文结论 | 第115-117页 |
4.1 主要结论 | 第115页 |
4.2 本论文的创新点 | 第115-116页 |
4.3 问题与展望 | 第116-117页 |
致谢 | 第117-119页 |
参考文献 | 第119-132页 |
附录 | 第132-149页 |
研究生期间参与科研、论文发表和专利发明情况 | 第149页 |