| 致谢 | 第4-5页 |
| 主要缩略词 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第1章 绪论 | 第14-23页 |
| 1.1. 环鸟苷酸的研究进展 | 第14-21页 |
| 1.1.1 CGMP的结构 | 第14-15页 |
| 1.1.2 CGMP的产生与分解 | 第15-17页 |
| 1.1.3 CGMP信号通路的作用机制 | 第17-19页 |
| 1.1.3.1 激活蛋白激酶G(PKG) | 第18页 |
| 1.1.3.2 调控CNG离子通道 | 第18-19页 |
| 1.1.3.3 调节磷酸二酯酶(PDEs)活性 | 第19页 |
| 1.1.4 CGMP调节的生理功能 | 第19-21页 |
| 1.1.4.1 CGMP在视觉信号转导中的作用 | 第19-20页 |
| 1.1.4.2 NO/CGMP/PKG信号通路调节血管平滑肌舒张 | 第20页 |
| 1.1.4.3 CGMP对神经系统功能的调节 | 第20页 |
| 1.1.4.4 CGMP信号调节的生理过程——肠分泌、肾素释放与骨生长 | 第20-21页 |
| 1.1.4.5 生殖作用 | 第21页 |
| 1.1.4.6 癌症 | 第21页 |
| 1.1.4.7 NO-CGMP与细胞分化 | 第21页 |
| 1.2. CGMP检测方法的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3. 本课题的研究内容 | 第22-23页 |
| 第2章 CGMP免疫抗原的制备与鉴定 | 第23-30页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-28页 |
| 2.1.1 材料与设备 | 第23-24页 |
| 2.1.1.1 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.1.1.2 主要试剂及配制 | 第24页 |
| 2.1.2 方法 | 第24-28页 |
| 2.1.2.1 EDC方法制备CGMP-KLH | 第24页 |
| 2.1.2.2 SMCC法制备CGMP-KLH | 第24-25页 |
| 2.1.2.3 SPDP法制备CGMP-KLH | 第25-26页 |
| 2.1.2.4 CGMP-KLH浓度的测定 | 第26-27页 |
| 2.1.2.5 CGMP-KLH免疫抗原的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2 结果 | 第28页 |
| 2.3 本章小结 | 第28-30页 |
| 第3章 抗CGMP单克隆抗体的制备及鉴定 | 第30-43页 |
| 3.1 材料和方法 | 第30-36页 |
| 3.1.1 实验材料与设备 | 第30页 |
| 3.1.2 设备 | 第30-31页 |
| 3.1.3 方法 | 第31-36页 |
| 3.1.3.1 免疫兔子 | 第31-32页 |
| 3.1.3.1.1 抗血清效价测定 | 第31-32页 |
| 3.1.3.2 抗CGMP兔单抗的制备及鉴定 | 第32-36页 |
| 3.1.3.2.1 抗CGMP兔单抗杂交瘤细胞的制备 | 第32-33页 |
| 3.1.3.2.2 抗CGMP兔单抗大转生产以及纯化 | 第33-34页 |
| 3.1.3.2.3 CGMP兔单抗的IGG含量测定 | 第34页 |
| 3.1.3.2.4 CGMP兔单抗效价测定 | 第34-35页 |
| 3.1.3.2.5 CGMP兔单抗与载体蛋白的交叉测定 | 第35-36页 |
| 3.2 结果 | 第36-41页 |
| 3.2.1 抗血清效价测定结果 | 第36页 |
| 3.2.2 间接ELISA在融合阶段的筛选结果 | 第36-37页 |
| 3.2.3 间接竞争ELISA测定克隆对CGMP的竞争抑制率 | 第37-38页 |
| 3.2.4 间接竞争ELISA测定克隆的特异性 | 第38页 |
| 3.2.5 CGMP兔单抗的IGG含量测定结果 | 第38-39页 |
| 3.2.6 CGMP兔单抗抗体效价 | 第39-40页 |
| 3.2.7 针对载体蛋白的交叉反应 | 第40页 |
| 3.2.8 CGMP兔单抗抗体特异性检测 | 第40-41页 |
| 3.3 本章小结 | 第41-43页 |
| 第4章 CGMP竞争ELISA方法的建立及初步应用 | 第43-50页 |
| 4.1 材料和方法 | 第43-45页 |
| 4.1.1 实验材料与设备 | 第43-44页 |
| 4.1.1.1 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.1.2 设备 | 第43-44页 |
| 4.1.2 方法 | 第44-45页 |
| 4.1.2.1 竞争ELISA条件的优化 | 第44页 |
| 4.1.2.2 标准曲线的建立以及灵敏度的确定 | 第44-45页 |
| 4.1.2.3 检测回收率 | 第45页 |
| 4.1.2.4 验证精密度 | 第45页 |
| 4.1.2.5 CGMP兔单抗竞争ELISA检测方法用于样本分析 | 第45页 |
| 4.2 结果 | 第45-49页 |
| 4.2.1 竞争ELISA优化结果 | 第45-46页 |
| 4.2.2 检测标准曲线 | 第46-47页 |
| 4.2.3 回收率 | 第47-48页 |
| 4.2.4 方法的精密度 | 第48页 |
| 4.2.5 CGMP兔单抗竞争ELISA检测方法用于样本分析 | 第48-49页 |
| 4.3 本章小结 | 第49-50页 |
| 第5章 结论和讨论 | 第50-54页 |
| 5.1 抗原制备 | 第50-51页 |
| 5.2 兔单抗的优点 | 第51页 |
| 5.3 兔单抗的特异性和效价 | 第51-52页 |
| 5.4 该方法的验证 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 个人简历 | 第61页 |
