| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-16页 |
| 1.1 研究背景 | 第12页 |
| 1.2 泛素蛋白酶系统与缺血性心脏病 | 第12-13页 |
| 1.3 FBXO25简述 | 第13-16页 |
| 第2章 实验方法 | 第16-37页 |
| 2.1 主要方法 | 第16-31页 |
| 2.1.1 细胞培养以及缺氧复氧（H/R）损伤模型的建立 | 第16-17页 |
| 2.1.2 pEGFP-C1-FBXO25过表达质粒的构建 | 第17-19页 |
| 2.1.3 PCR产物回收（OMEGA试剂盒- Cycle Pure Kit） | 第19页 |
| 2.1.4 酶切产物回收（OMEGA试剂盒-Gel Extraction kit） | 第19-20页 |
| 2.1.5 转化 | 第20页 |
| 2.1.6 反转录（TAKARA试剂盒） | 第20-21页 |
| 2.1.7 Q-PCR | 第21-22页 |
| 2.1.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
| 2.1.9 凝胶成像系统分析 | 第22页 |
| 2.1.10 小量质粒提取（OMEGA 小提试剂盒） | 第22-23页 |
| 2.1.11 大量质粒提取（TIANGEN 大提试剂盒） | 第23-24页 |
| 2.1.12 RNA提取（Trizol 提取法） | 第24页 |
| 2.1.13 Superfectin Transfection（普飞生物） | 第24-25页 |
| 2.1.14 磷酸钙转染 | 第25页 |
| 2.1.15 PEI Transfection | 第25-26页 |
| 2.1.16 Lipofectamine2000 Transfection | 第26页 |
| 2.1.17 Western blot | 第26-28页 |
| 2.1.18 BCA蛋白定量 | 第28-29页 |
| 2.1.19 MTT细胞增殖实验 | 第29页 |
| 2.1.20 乳酸脱氢酶（LDH）活性检测 | 第29页 |
| 2.1.21 shRNA -FBXO25质粒的构建 | 第29-31页 |
| 2.2 试剂及设备 | 第31-37页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第31-32页 |
| 2.2.2 试剂配制 | 第32-36页 |
| 2.2.3 实验仪器设备 | 第36-37页 |
| 第3章 实验结果 | 第37-54页 |
| 3.1 FBXO25在小鼠中的组织分布 | 第37-39页 |
| 3.1.1 FBXO25基因在小鼠组织中的相对表达量 | 第37-38页 |
| 3.1.2 FBXO25蛋白在小鼠组织中的相对表达量 | 第38-39页 |
| 3.2 构建FBXO25过表达质粒和干扰质粒 | 第39-42页 |
| 3.2.1 FBXO25过表达质粒pEGFP-C1-FBXO25的构建 | 第39-40页 |
| 3.2.2 重组质粒pEGFP-C1-FBXO25蛋白表达的鉴定 | 第40页 |
| 3.2.3 FBXO25干扰质粒shRNA-FBXO25的构建与鉴定 | 第40-42页 |
| 3.3 缺氧/复氧损伤对H9C2细胞的影响 | 第42-45页 |
| 3.3.1 缺氧处理对FBXO25蛋白表达的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.2 缺氧/复氧对H9C2细胞形态的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.3 缺氧/复氧损伤对H9C2心肌细胞存活率和功能的影响 | 第44页 |
| 3.3.4 缺氧/复氧损伤对H9C2心肌细胞FBXO25蛋白表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.4 过表达FBXO25蛋白对H/R诱导H9C2细胞损伤的影响 | 第45-49页 |
| 3.4.1 H9C2细胞转染方法的筛选 | 第45-46页 |
| 3.4.2 pEGFP-C1-FBXO25质粒在H9C2细胞中的表达情况 | 第46-47页 |
| 3.4.3 过表达FBXO25蛋白对H/R诱导H9C2细胞损伤的保护作用 | 第47-49页 |
| 3.5 干扰FBXO25蛋白表达对H/R诱导H9C2细胞损伤的影响 | 第49-51页 |
| 3.5.1 shRNA-FBXO25对H9C2细胞内源性FBXO25蛋白的干扰效果 | 第49-50页 |
| 3.5.2 干扰FBXO25蛋白加重H/R诱导H9C2细胞的损伤和死亡 | 第50-51页 |
| 3.6 FBXO25是通过减少氧自由基的生成来对抗心肌缺氧/复氧损伤 | 第51-52页 |
| 3.7 结论 | 第52-54页 |
| 第4章 讨论 | 第54-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 综述 FBXO25基因的研究进展 | 第62-69页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
