中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
引言 | 第12-14页 |
第一部分 Elp3重组表达质粒的构建及鉴定 | 第14-35页 |
1 材料与方法 | 第15-22页 |
1.1 材料 | 第15页 |
1.2 主要仪器设备 | 第15-16页 |
1.3 实验方法 | 第16-22页 |
2 实验结果 | 第22-33页 |
2.1 预测确定敲除序列序列并成功构建真核表达载体 | 第22-25页 |
2.2 重组质粒的酶切鉴定 | 第25-26页 |
2.3 重组质粒的基因测序鉴定 | 第26-30页 |
2.4 RT-PCR检测重组质粒相关基因表达 | 第30页 |
2.5 Western blot检测重组质粒蛋白表达 | 第30-33页 |
3 讨论 | 第33-35页 |
第二部分 Elp3促进HCC细胞迁移侵袭及DNA损伤修复 | 第35-58页 |
1 材料与方法 | 第36-44页 |
1.1 材料 | 第36-37页 |
1.2 主要仪器设备 | 第37页 |
1.3 实验方法 | 第37-44页 |
2 实验结果 | 第44-55页 |
2.1 Real time PCR检测瞬时转染后Elp3 mRNA表达情况 | 第44-45页 |
2.2 Western blot检测瞬时转染后Elp3蛋白表达情况 | 第45-46页 |
2.3 CCK-8 检测瞬时转染重组表达质粒后Hep G2细胞增殖情况 | 第46-47页 |
2.4 划痕实验检测HepG2细胞中转染重组质粒后细胞的迁移能力 | 第47-48页 |
2.5 transwell实验检测HepG2细胞中转染重组质粒后细胞的迁移侵袭能力 | 第48-49页 |
2.6 ~(60)Coγ射线辐照的最适剂量 | 第49-50页 |
2.7 彗星电泳分析转染重组质粒对基因组的影响 | 第50-52页 |
2.8 HepG2细胞中转染重组质粒后侵袭迁移相关蛋白表达水平 | 第52-55页 |
3 讨论 | 第55-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
综述:Elongator复合体的结构和功能 | 第62-73页 |
参考文献 | 第69-73页 |
展望 | 第73-74页 |
本文受以下基金资助 | 第74-75页 |
缩略词表 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |