| 符号说明 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一部分 研究论文 | 第12-74页 |
| 第一章 绵羊和绒山羊Pdia3 cDNA的克隆 | 第12-33页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 1 材料和方法 | 第14-19页 |
| ·材料 | 第14-15页 |
| ·实验方法 | 第15-19页 |
| 2 结果 | 第19-30页 |
| ·绵羊绒山羊睾丸组织总RNA的提取 | 第19页 |
| ·绵羊Pdia3 RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第19-20页 |
| ·绵羊Pdia3 cDNA重组克隆载体的酶切鉴定及测序结果与分析 | 第20页 |
| ·绒山羊Pdia3 cDNA RT-PCR及重组质粒的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第20-22页 |
| ·绵羊和绒山羊的PDIA3氨基酸序列的分析 | 第22页 |
| ·绵羊和绒山羊的PDIA3肽链的二级结构分析 | 第22-29页 |
| ·绵羊和绒山羊的PDIA3氨基酸序列与其它动物的PDIA3氨基酸比较 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-33页 |
| 第二章 GST-PDIA3融合蛋白的表达、分离与纯化 | 第33-44页 |
| 前言 | 第33-34页 |
| 1 材料和方法 | 第34-40页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-40页 |
| 2 结果 | 第40-43页 |
| ·pGEX-Pdia3重组载体的酶切及测序鉴定 | 第40页 |
| ·绵羊PDIA3在大肠杆菌中的表达 | 第40-41页 |
| ·GST-PDIA3融合蛋白的Western blot的鉴定 | 第41页 |
| ·GST-PDIA3融合蛋白的纯化 | 第41页 |
| ·纯化后的GST-PDIA3融合蛋白浓度的测定 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| 第三章 绵羊PDIA3腹水多克隆抗体的制备及纯化 | 第44-51页 |
| 前言 | 第44-45页 |
| 1 材料和方法 | 第45-47页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-47页 |
| 2 结果 | 第47-49页 |
| ·小鼠抗GST-PDIA3多克隆抗体的鉴定 | 第47-48页 |
| ·小鼠抗GST-PDIA3腹水多克隆抗体的纯化 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-51页 |
| 第四章 PDIA3在绵羊睾丸组织和精子中的定位检测 | 第51-63页 |
| 前言 | 第51-52页 |
| 1. 材料与方法 | 第52-58页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-58页 |
| 2 结果 | 第58-61页 |
| ·绵羊睾丸组织中PDIA3的定位 | 第58-59页 |
| ·绒山羊精子中PDIA3的定位 | 第59页 |
| ·绵羊Pdia3 RNA原位杂交 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| 第五章 绵羊PDIA3与IZUMO1相互作用的分析 | 第63-74页 |
| 前言 | 第63-64页 |
| 1 材料与方法 | 第64-69页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-69页 |
| 2 结果 | 第69-72页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第69页 |
| ·真核表达质粒的大量制备 | 第69-70页 |
| ·免疫共沉淀及Western blot结果 | 第70-72页 |
| 3 讨论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-74页 |
| 第二部分 文献综述PDIA3的结构与功能及其在精卵融合过程中的作用 | 第74-81页 |
| 1. PDIA3的结构及其在内质网中的功能 | 第75-77页 |
| 2 PDIA3在精卵融合中的作用 | 第77页 |
| 3 PDIA3具备不育症的潜在标志 | 第77-78页 |
| 4 展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文和参加的项目 | 第82页 |
