| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 1 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 植物Hsp蛋白研究进展 | 第13-17页 |
| 1.1.1 热激蛋白类型及分布特点 | 第14页 |
| 1.1.2 热激蛋白不同家族的特征和作用 | 第14-17页 |
| 1.1.2.1 HSP100 | 第14-15页 |
| 1.1.2.2 HSP90 | 第15-16页 |
| 1.1.2.3 HSP70 | 第16-17页 |
| 1.1.2.4 HSP60 | 第17页 |
| 1.1.2.5 sHSP | 第17页 |
| 1.2 冷激蛋白CSP研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3 大豆遗传转化方法研究 | 第18-22页 |
| 1.3.1 基因枪转化法 | 第19页 |
| 1.3.2 花粉管通道介导法 | 第19-20页 |
| 1.3.3 电击法和聚乙二醇法 | 第20页 |
| 1.3.4 显微注射法(microinjection) | 第20页 |
| 1.3.5 农杆菌介导法及其影响因素 | 第20-22页 |
| 2 三个大豆品种的萌发期和苗期耐盐性比较 | 第22-32页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-24页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.2 种子萌发期盐胁迫处理 | 第23页 |
| 2.1.3 大豆苗期盐胁迫处理 | 第23页 |
| 2.1.4 生理指标测定方法 | 第23-24页 |
| 2.2 结果与分析 | 第24-28页 |
| 2.2.1 不同浓度NaCl处理对种子萌发的影响 | 第24页 |
| 2.2.2 苗期大豆对盐胁迫的响应 | 第24-28页 |
| 2.2.2.1 叶绿素含量 | 第25页 |
| 2.2.2.2 丙二醛(MDA)含量 | 第25页 |
| 2.2.2.3 脯氨酸含量 | 第25页 |
| 2.2.2.4 过氧化物酶(POD)活性 | 第25页 |
| 2.2.2.5 超氧化物歧化酶(SOD)活性 | 第25-26页 |
| 2.2.2.6 根活力 | 第26页 |
| 2.2.2.7 干重 | 第26-28页 |
| 2.3 讨论 | 第28-32页 |
| 3 农杆菌介导的大豆遗传转化 | 第32-44页 |
| 3.1 材料与方法 | 第32-39页 |
| 3.1.1 材料 | 第32-35页 |
| 3.1.1.1 植物材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1.2 主要化学试剂及药品溶液配制 | 第33-34页 |
| 3.1.1.3 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 3.1.1.4 培养基配方 | 第35页 |
| 3.1.2 方法 | 第35-39页 |
| 3.1.2.1 种子消毒 | 第35-36页 |
| 3.1.2.2 种子萌发 | 第36页 |
| 3.1.2.3 共生菌制备 | 第36页 |
| 3.1.2.4 外植体的制备和共培养 | 第36-37页 |
| 3.1.2.5 抗性芽的诱导 | 第37页 |
| 3.1.2.6 丛生芽的伸长 | 第37-38页 |
| 3.1.2.7 生根培养 | 第38页 |
| 3.1.2.8 植株的驯化与移栽 | 第38页 |
| 3.1.2.9 转基因大豆小量DNA的提取 | 第38-39页 |
| 3.2 结果与分析 | 第39-42页 |
| 3.2.1 大豆的遗传转化 | 第39-40页 |
| 3.2.2 转基因大豆幼苗的草丁膦抗性筛选 | 第40页 |
| 3.2.3 转基因大豆的分子检测 | 第40-42页 |
| 3.3 讨论 | 第42-44页 |
| 4 基于反向PCR技术的T-DNA整合位点分析 | 第44-52页 |
| 4.1 材料与方法 | 第44-48页 |
| 4.1.1 材料与试剂 | 第44页 |
| 4.1.2 大豆总DNA的提取 | 第44-45页 |
| 4.1.3 反向PCR引物设计与酶切位点选择 | 第45页 |
| 4.1.4 DNA的酶切和酶切片段的环化 | 第45-47页 |
| 4.1.5 两轮巢式反向PCR扩增与产物克隆测序 | 第47页 |
| 4.1.6 序列比对分析 | 第47页 |
| 4.1.7 侧翼序列的PCR验证 | 第47-48页 |
| 4.2 结果与分析 | 第48-51页 |
| 4.2.1 反向PCR扩增侧翼序列 | 第48页 |
| 4.2.2 侧翼序列分析 | 第48-50页 |
| 4.2.3 侧翼序列PCR再验证 | 第50-51页 |
| 4.3 讨论 | 第51-52页 |
| 5 过表达OsHsp90/BsCspB基因可显著提高大豆的耐盐性 | 第52-62页 |
| 5.1 实验材料与方法 | 第52-54页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 5.1.2 盐胁迫处理 | 第53页 |
| 5.1.3 盐胁迫后目的基因Hsp90和CspB相对表达量检测 | 第53-54页 |
| 5.1.4 生理性状的测定方法 | 第54页 |
| 5.2 结果与分析 | 第54-58页 |
| 5.2.1 基因相对表达量 | 第54-55页 |
| 5.2.2 大豆植株对盐胁迫的响应 | 第55-57页 |
| 5.2.3 盐胁迫对大豆生长状况的影响 | 第57-58页 |
| 5.3 讨论分析 | 第58-62页 |
| 6 结论与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-80页 |
| 附录 A 缩写词 | 第80-82页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84-88页 |
