| 中文摘要 | 第10-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 符号说明 | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-28页 |
| 1 引言 | 第18页 |
| 2 氧甲基转移酶 | 第18-21页 |
| 2.1 定义和生理活性 | 第18-19页 |
| 2.2 植物OMT的分类和催化特点 | 第19-20页 |
| 2.3 进化与起源 | 第20页 |
| 2.4 CCoAOMT的基本结构 | 第20-21页 |
| 3 植物OMT参与修饰的天然产物 | 第21-26页 |
| 3.1 木质素 | 第21-22页 |
| 3.2 黄酮 | 第22-25页 |
| 3.3 香豆素 | 第25-26页 |
| 4 立题依据与研究内容 | 第26-28页 |
| 第二章 钝鳞紫背苔中Ⅰ型氧甲基转移酶的克隆与功能鉴定 | 第28-66页 |
| 1 前言 | 第28页 |
| 2 实验材料及仪器 | 第28-32页 |
| 2.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.2 菌种和质粒 | 第28-29页 |
| 2.3 主要试剂和试剂盒 | 第29页 |
| 2.4 实验仪器 | 第29页 |
| 2.5 主要溶液及培养基 | 第29-30页 |
| 2.6 PCR引物序列 | 第30-32页 |
| 3 实验方法 | 第32-43页 |
| 3.1 序列比对及蛋白模拟 | 第32页 |
| 3.2 钝鳞紫背苔RNA的提取及cDNA的合成 | 第32页 |
| 3.3 PaOMT2的克隆 | 第32-34页 |
| 3.4 PaOMTs蛋白表达载体的构建 | 第34-36页 |
| 3.5 PaOMTs点突变和结构域交换 | 第36-38页 |
| 3.6 PaOMT1内含子和外显子分析 | 第38页 |
| 3.7 蛋白表达 | 第38页 |
| 3.8 蛋白活性测定 | 第38-42页 |
| 3.9 PaOMTs/PaOMTs-Tr定位载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.10 亚细胞定位 | 第43页 |
| 4 实验结果 | 第43-63页 |
| 4.1 PaOMT1和PaOMT2的克隆和序列分析 | 第43-48页 |
| 4.2 PaOMT1和PaOMT2原核表达载体构建 | 第48页 |
| 4.3 PaOMTs蛋白表达及纯化 | 第48-49页 |
| 4.4 PaOMTs蛋白活性 | 第49-57页 |
| 4.5 酶学动力学参数测定 | 第57-58页 |
| 4.6 突变体和嵌和基因原核表达载体构建 | 第58页 |
| 4.7 PaOMTs突变体和嵌和基因蛋白表达及纯化 | 第58-59页 |
| 4.8 PaOMTs突变体和嵌和蛋白酶活 | 第59-62页 |
| 4.9 亚细胞定位 | 第62-63页 |
| 5 总结 | 第63-66页 |
| 第三章 粗裂地钱中Ⅰ型氧甲基转移酶的体内外功能分析 | 第66-79页 |
| 1 前言 | 第66页 |
| 2 实验材料及仪器 | 第66-68页 |
| 2.1 植物材料 | 第66页 |
| 2.2 主要溶液及培养基 | 第66页 |
| 2.3 引物序列 | 第66-68页 |
| 3 实验方法 | 第68-70页 |
| 3.1 序列比对及进化树分析 | 第68页 |
| 3.2 MPaOMTs的克隆 | 第68页 |
| 3.3 MPaOMTs蛋白表达载体的构建 | 第68-69页 |
| 3.4 蛋白表达 | 第69页 |
| 3.5 蛋白活性测定 | 第69页 |
| 3.6 MPaOMTs定位载体的构建及亚细胞定位 | 第69-70页 |
| 3.7 MPaOMTs过表达载体的构建 | 第70页 |
| 3.8 MPaOMTs在拟南芥中过表达 | 第70页 |
| 4 实验结果 | 第70-77页 |
| 4.1 MPaOMTs的克隆和序列分析 | 第70-73页 |
| 4.2 原核表达载体构建 | 第73-74页 |
| 4.3 蛋白表达及纯化 | 第74页 |
| 4.4 蛋白活性 | 第74-76页 |
| 4.5 亚细胞定位 | 第76-77页 |
| 4.6 过表达载体构建 | 第77页 |
| 5 总结 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第90-91页 |
| 附录 化合物图谱 | 第91-96页 |
| 附件 | 第96页 |
