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稻瘟病菌泛素结合复合体基因MoPEX22L的功能研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第11-25页
    1 过氧化物酶体第11-20页
        1.1 过氧化物酶体的生活史第12-16页
            1.1.1 过氧化物酶体的形成(图1-2)第12-15页
            1.1.2 过氧化物酶体增殖第15页
            1.1.3 过氧化物酶体降解第15-16页
        1.2 过氧化物酶体参与的生化代谢第16-18页
            1.2.1 脂肪酸β-氧化第16页
            1.2.2 乙醛酸循环第16-17页
            1.2.3 黑色素合成第17页
            1.2.4 细胞壁形成第17页
            1.2.5 伏鲁宁体第17-18页
        1.3 过氧化物酶体与致病性第18-20页
            1.3.1 PEX基因与真菌致病性第18-19页
            1.3.2 脂肪酸β-氧化与致病机制第19-20页
            1.3.3 乙醛酸循环与致病机制第20页
            1.3.4 伏鲁宁体在致病过程中的作用第20页
    2 稻瘟病菌第20-23页
        2.1 稻瘟病菌的生活史第21-23页
            2.1.1 孢子萌发第21-22页
            2.1.2 附着胞的分化及成熟第22页
            2.1.3 附着胞的侵入及扩展第22页
            2.1.4 再侵染第22-23页
        2.2 稻瘟病菌致病相关的功能基因第23页
    3 本研究的目的及意义第23-25页
第二章 研究内容 稻瘟病菌泛素结合复合体基因MoPEX22L的功能研究第25-49页
    1 材料与方法第25-32页
        1.1 供试菌株第25-26页
        1.2 培养基第26-27页
        1.3 菌株培养及保存第27-28页
        1.4 大肠杆菌转化第28页
        1.5 农杆菌转化第28页
        1.6 敲除载体的构建第28页
        1.7 基因缺失突变体的获得第28-29页
        1.8 表型测定第29-32页
            1.8.1 生长速度测定第29页
            1.8.2 产孢量测定第29页
            1.8.3 黑色素产量第29-30页
            1.8.4 致病性测定第30页
            1.8.5 侵染第30-31页
            1.8.6 生化代谢测定第31页
            1.8.7 细胞壁完整性和活性氧耐受性测定第31页
            1.8.8 孢子萌发、附着胞形成及附着胞膨压测定第31-32页
            1.8.9 分生孢子的脂肪粒染色第32页
            1.8.10 有性生殖第32页
            1.8.11 PTS1和PTS2相关蛋白的定位第32页
    2 结果分析第32-47页
        2.1 MoPEX22L基因的生物信息学比对第32-33页
        2.2 MoPEX22L定位于过氧化物酶体上第33-34页
        2.3 MoPEX22L基因敲除突变体的获得第34页
            2.3.1 敲除载体的构建与目的基因的敲除第34页
            2.3.2 突变体的筛选与验证第34页
        2.4 MoPEX22L影响PTS1、PTS2在过氧化物酶体上的定位第34-35页
        2.5 MoPEX22L基因缺失导致脂肪酸的β-氧化功能障碍第35-36页
        2.6 MoPEX22L基因缺失突变体对维持细胞壁完整性有重要作用第36-37页
        2.7 MoPEX22L基因缺失突变体对活性氧、甲基紫精敏感第37-39页
        2.8 MoPEX22L参与正常的营养生长及产孢第39-41页
        2.9 MoPEX22L基因第41-43页
        2.10 MoPEX22L基因缺失导致稻瘟病菌致病性减弱第43-44页
        2.11 MoPEX22L基因参与寄主侵入及侵染菌丝扩展第44-46页
        2.12 MoPEX22L基因参与有性生殖过程第46-47页
    3 结论与讨论第47-49页
参考文献第49-54页
附录1 缩略词第54-55页
附录2 培养基配方第55-56页
附录3 缓冲液配方第56-57页
附录4 构建载体第57-58页
附录5 PCR反应程序第58-59页
附录6 胶回收第59-60页
附录7 农杆菌感受态的制备第60-61页
附录8 稻瘟病菌A tMT转化第61-62页
附录9 基因组DNA小量提取第62-63页
附录10 CTAB法提取基因组DNA第63-64页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第64-65页
致谢第65-67页

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