金钗石斛菌根形成过程中的基因表达分析
| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 石斛的应用价值 | 第10-12页 |
| 1.1.1 石斛的观赏价值 | 第10-11页 |
| 1.1.2 石斛的药用价值 | 第11-12页 |
| 1.2 兰科植物菌根体系的研究 | 第12-17页 |
| 1.2.1 兰科植物菌根体系的形成 | 第12-14页 |
| 1.2.2 兰科植物菌根体系的作用 | 第14-17页 |
| 1.3 cDNA文库的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 金钗石斛根cDNA文库的构建 | 第19-29页 |
| 1.1 材料 | 第19页 |
| 1.1.1 植物材料及其处理 | 第19页 |
| 1.1.2 试剂 | 第19页 |
| 1.1.3 仪器设备 | 第19页 |
| 1.2 试验方法 | 第19-27页 |
| 1.2.1 金钗石斛根总RNA提取 | 第19-21页 |
| 1.2.2 反转录 | 第21页 |
| 1.2.3 第二链合成 | 第21-22页 |
| 1.2.4 降低特异条带丰度 | 第22-24页 |
| 1.2.5 蛋白酶K处理 | 第24页 |
| 1.2.6 Sif酶切处理 | 第24页 |
| 1.2.7 分级分离 | 第24页 |
| 1.2.8 连接 | 第24页 |
| 1.2.9 包装 | 第24页 |
| 1.2.10 滴度测定 | 第24-25页 |
| 1.2.11 文库转换 | 第25-26页 |
| 1.2.12 插入片段大小PCR检测 | 第26-27页 |
| 1.3 结果与分析 | 第27-29页 |
| 第三章 菌根共生体系的建立 | 第29-34页 |
| 1.1 材料 | 第29页 |
| 1.1.1 材料 | 第29页 |
| 1.1.2 试剂 | 第29页 |
| 1.1.3 设备 | 第29页 |
| 1.2 方法 | 第29-32页 |
| 1.2.1 共生培养基的确定 | 第29-30页 |
| 1.2.2 菌株接种方法的确立 | 第30-31页 |
| 1.2.3 菌根石蜡切片 | 第31-32页 |
| 1.3 结果与分析 | 第32-34页 |
| 第四章 有关基因表达分析 | 第34-54页 |
| 1.1 材料 | 第34页 |
| 1.1.1 材料处理 | 第34页 |
| 1.1.2 试剂 | 第34页 |
| 1.2 方法 | 第34-45页 |
| 1.2.1 金钗石斛根总DNA的提取 | 第34-35页 |
| 1.2.2 Trizol法提取金钗石斛根总RNA | 第35页 |
| 1.2.3 反转录成cDNA | 第35-36页 |
| 1.2.4 验证Actin基因序列 | 第36页 |
| 1.2.5 设计Real-timePCR引物 | 第36-44页 |
| 1.2.6 使用各种引物进行PCR扩增 | 第44页 |
| 1.2.7 荧光定量PCR | 第44-45页 |
| 1.3 结果与分析 | 第45-54页 |
| 1.3.1 表达受抑制的基因 | 第45-51页 |
| 1.3.2 表达被增强的基因 | 第51-54页 |
| 第五章 结论与展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 附录 | 第59-62页 |
| 硕士期间参与科研项目及发表的文章 | 第62页 |
