| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-15页 |
| 第一章 肿瘤靶向基因—病毒治疗概述 | 第15-27页 |
| ·前言 | 第15-16页 |
| ·肿瘤的基因治疗 | 第16-17页 |
| ·肿瘤的病毒治疗 | 第17-20页 |
| ·靶向基因-病毒治疗 | 第20-22页 |
| ·肝癌的靶向基因－病毒个性化治疗策略 | 第22-26页 |
| ·病毒基因组改造实现靶向性——E18 19kDa | 第22-23页 |
| ·治疗基因的选择实现靶向性——mda-7/IL-24 | 第23-25页 |
| ·肝癌特异性启动子实现肝癌的个性化治疗——AFP | 第25-26页 |
| ·结束语 | 第26-27页 |
| 第二章 删除E18 的双靶向溶瘤腺病毒携带IL-24 基因治疗肝癌的研究 | 第27-48页 |
| ·实验材料 | 第27-32页 |
| ·实验试剂 | 第27页 |
| ·主要溶液的配制 | 第27-29页 |
| ·实验仪器 | 第29-30页 |
| ·细胞株 | 第30页 |
| ·实验病毒 | 第30-31页 |
| ·引物设计 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-48页 |
| ·病毒的小量扩增及鉴定 | 第32-34页 |
| ·病毒的小量制备 | 第32页 |
| ·病毒DNA 的抽提 | 第32-33页 |
| ·PCR 法鉴定病毒 | 第33-34页 |
| ·病毒的大量扩增及纯化 | 第34-37页 |
| ·病毒的大量制备 | 第34-36页 |
| ·细胞的计数及传代 | 第34-36页 |
| ·病毒的感染及收集 | 第36页 |
| ·病毒的纯化 | 第36-37页 |
| ·重组病毒的滴度测定 | 第37-38页 |
| ·目的病毒在不同细胞中复制能力的测定 | 第38-39页 |
| ·结晶紫染色观察腺病毒细胞毒性 | 第39页 |
| ·MTT 检测细胞存活率 | 第39页 |
| ·Hoechst 33342 染色观察细胞凋亡 | 第39-40页 |
| ·Western blot 检测蛋白表达 | 第40-43页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第43-44页 |
| ·裸鼠成瘤实验 | 第44页 |
| ·肿瘤抑制曲线和荷瘤裸鼠生存率曲线的绘制 | 第44页 |
| ·给药肿瘤组织及肝脏的免疫组化实验检测 | 第44-45页 |
| ·石蜡组织切片的HE 染色检测 | 第45-46页 |
| ·TUNEL 法检测细胞凋亡 | 第46页 |
| ·给药肿瘤组织的透射电镜形态学检测 | 第46-47页 |
| ·统计学分析 | 第47-48页 |
| 第三章 删除E18 的双靶向溶瘤腺病毒携带IL-24 基因治疗肝癌的实验结果和分析 | 第48-70页 |
| ·病毒的鉴定 | 第48-51页 |
| ·细胞形态学的变化 | 第51-52页 |
| ·Hoechst33342 染色检测细胞凋亡 | 第52-53页 |
| ·目的病毒具有选择性复制能力 | 第53页 |
| ·体外实验检测目的病毒的安全性、高效性 | 第53-56页 |
| ·蛋白水平检测病毒的复制和目的基因的表达 | 第56-58页 |
| ·目的病毒通过死亡受体途径和线粒体途径诱导细胞凋亡 | 第58-60页 |
| ·流式细胞术检测目的病毒诱导细胞凋亡 | 第60-61页 |
| ·目的病毒抑制荷瘤小鼠肿瘤生长 | 第61-63页 |
| ·两侧成瘤模型中探讨目的病毒的传播性 | 第63-64页 |
| ·目的病毒提高荷瘤小鼠的生存率 | 第64-65页 |
| ·外源携带基因IL-24 在肿瘤组织中阳性表达 | 第65-66页 |
| ·目的病毒促瘤内组织坏死并抑制血管生成 | 第66页 |
| ·体内实验目的病毒诱导肿瘤细胞凋亡 | 第66-67页 |
| ·电镜观察细胞凋亡、病毒颗粒以及血管生成 | 第67-70页 |
| 第四章：讨论与展望 | 第70-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 硕士研究生期间的研究成果 | 第82-83页 |
| 硕士研究生期间参与项目与奖励 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
