| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第14-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-33页 |
| 1.1 白血病 | 第15-18页 |
| 1.1.1 白血病定义及分类 | 第15-16页 |
| 1.1.2 急性髓系白血病的诊断、治疗和预后情况 | 第16-18页 |
| 1.2 CHK1 与 WEE1 | 第18-25页 |
| 1.2.1 CHK14 | 第18-22页 |
| 1.2.2 WEE18 | 第22-25页 |
| 1.3 组蛋白去乙酰化酶（HDACS） | 第25-32页 |
| 1.3.1 组蛋白乙酰基转移酶（HATs）和组蛋白去乙酰化酶（HDACs）11 | 第25-28页 |
| 1.3.2 HDACs 与癌症 | 第28-29页 |
| 1.3.3 组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACIs） | 第29-32页 |
| 1.4 本论文的研究内容及意义 | 第32-33页 |
| 第二章 CHK1 对 WEE1选择性抑制剂 MK-1775 抗 AML活性的影响研究 | 第33-69页 |
| 2.1 背景 | 第33-34页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第34-37页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第34页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第34页 |
| 2.2.3 溶液配制 | 第34-36页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第36-37页 |
| 2.3 实验方法 | 第37-46页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第37-38页 |
| 2.3.2 Western blot 检测 AML 细胞中蛋白水平 | 第38-40页 |
| 2.3.3 在六株 AML 细胞株中检测 WEE1 相关蛋白的本底表达水平26 | 第40页 |
| 2.3.4 用 MTT 法测定 MK-1775 在六株 AML 细胞中的 IC50值 | 第40-41页 |
| 2.3.5 台盼蓝染色法测定不同浓度MK-1775 在六株AML 细胞株中引起的细胞死亡 | 第41页 |
| 2.3.6 流式细胞术检测 MK-1775 对六株 AML 细胞死亡的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.7 Western blot 检测不同浓度 MK-1775 处理对 CTS 和 U937 细胞中WEE1等相关蛋白表达的影响 | 第42页 |
| 2.3.8 MTT 法检测 MK-1775 在 AML 临床样本中的 IC50值 | 第42页 |
| 2.3.9 MK-1775 与 Ara-C 联用对 AML 细胞株和临床样本的活性检测 | 第42-43页 |
| 2.3.10 流式细胞术检测 MK-1775 对三例 AML 临床样本细胞死亡的影响 | 第43-44页 |
| 2.3.11 流式细胞术检测 500 nM MK-1775 在不同时间点对 CTS 和U937 细胞周期的影响 | 第44页 |
| 2.3.12 Western blot 检测 MK-1775 在不同时间点对CTS 和 U937 两株细胞蛋白水平的影响 | 第44页 |
| 2.3.13 Roscovitine 对 MK-1775 抗 AML 活性的的影响 | 第44-45页 |
| 2.3.14 MK-1775 与 LY2603618 联合用药对 AML 细胞的影响 | 第45-46页 |
| 2.4 实验结果 | 第46-65页 |
| 2.4.1 WEE1 等相关蛋白在六株 AML 细胞中的表达情况 | 第46-47页 |
| 2.4.2 AML 细胞株对 MK-1775 的敏感性研究 | 第47-48页 |
| 2.4.3 MK-1775 诱导细胞死亡的研究 | 第48-49页 |
| 2.4.4 AML 患者临床样本对 MK-1775 敏感性的研究 | 第49-51页 |
| 2.4.5 MK-1775 对 Ara-C 抗白血病活性的影响 | 第51-53页 |
| 2.4.6 Ara-C 耐药细胞株对 MK-1775 的敏感性研究 | 第53-54页 |
| 2.4.7 MK-1775 对 AML 细胞周期的影响 | 第54-57页 |
| 2.4.8 MK-1775 对 AML 细胞中相关蛋白表达水平的动态影响 | 第57-58页 |
| 2.4.9 CDK 抑制剂Roscovitine 对 AML 细胞增殖的影响 | 第58页 |
| 2.4.10 Roscovitine 对 MK-1775 引起的 DNA 损伤及CHK1 磷酸化的影响 | 第58-59页 |
| 2.4.11 Roscovitine 对 MK-1775 引起的 AML 细胞死亡的影响 | 第59-60页 |
| 2.4.12 Roscovitine 对 MK-1775 抑制 AML 细胞株和临床样本细胞增殖的影响 | 第60-61页 |
| 2.4.13 CHK1 抑制剂 LY2603618 对 AML 细胞增殖的影响 | 第61-62页 |
| 2.4.14 AML 细胞中LY2603618和MK-1775 对CDK1/2 的活化及DNA损伤的影响 | 第62-63页 |
| 2.4.15 LY2603618 对 MK-1775 引起的 AML 细胞死亡的影响 | 第63-64页 |
| 2.4.16 LY2603618 与 MK-1775 联合对 AML 细胞增殖的影响 | 第64-65页 |
| 2.5 讨论与小结 | 第65-69页 |
| 第三章 帕比司他和 MK-1775 协同杀伤 AML细胞的机制研究 | 第69-91页 |
| 3.1 研究背景 | 第69页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第69-70页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第69-70页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第70页 |
| 3.2.3 溶液配制 | 第70页 |
| 3.2.4 实验仪器 | 第70页 |
| 3.3 实验方法 | 第70-74页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第70-71页 |
| 3.3.2 MTT 法检测 MK-1775 和帕比司他对 AML 细胞株和临床样本细胞增殖的影响 | 第71页 |
| 3.3.3 帕比司他对 MK-1775 诱导的 AML 细胞株和临床样本细胞死亡的影响 | 第71页 |
| 3.3.4 流式细胞术检测 250 nM MK-1775 和10 nM 帕比司他在不同时间点对CTS 细胞周期和相关蛋白表达的影响 | 第71-72页 |
| 3.3.5 检测 20 nM 帕比司他与MK-1775 同时处理24 h 对CTS 和 U937 细胞周期和相关蛋白表达水平的影响 | 第72页 |
| 3.3.6 实时定量PCR 检测 AML 患者临床样本中相关RNA 的水平58 | 第72-73页 |
| 3.3.7 在 U937 细胞中应用慢病毒shRNA 沉默 WEE1 或 CHK1 | 第73-74页 |
| 3.4 实验结果 | 第74-87页 |
| 3.4.1 帕比司他与 MK-1775 在 AML 细胞中的协同抗 AML 作用 | 第74-77页 |
| 3.4.2 在 AML 细胞株和临床样本中 MK-1775 与帕比司他联用对细胞死亡的影响 | 第77-79页 |
| 3.4.3 250 nM MK-1775 联合 10 nM 帕比司他对 CTS 细胞周期进程以及相关蛋白表达水平的影响 | 第79-83页 |
| 3.4.4 250 nM MK-1775 和 20 nM 帕比司他对 CTS 和 U937 细胞周期的影响 | 第83-86页 |
| 3.4.5 在 U937 细胞中分别沉默 CHK1 和 WEE1 对 MK-1775 或帕比司他引起的细胞死亡的影响 | 第86-87页 |
| 3.5 讨论与小结 | 第87-91页 |
| 结论 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-107页 |
| 硕博连读期间发表的论文 | 第107-109页 |
| 致谢 | 第109页 |
