| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-27页 |
| 1.1 tauopathy | 第12-13页 |
| 1.2 微管的简介 | 第13-15页 |
| 1.2.1 微管 | 第13-14页 |
| 1.2.2 微管的结构与特性 | 第14-15页 |
| 1.3 微管乙酰化 | 第15-20页 |
| 1.3.1 微管乙酰化的调节因子 | 第16-18页 |
| 1.3.2 微管乙酰化的功能 | 第18页 |
| 1.3.3 微管乙酰化在神经退行性病中的作用 | 第18-20页 |
| 1.4 用果蝇模型来研究AD | 第20-26页 |
| 1.4.1 果蝇模型介绍 | 第20-21页 |
| 1.4.2 主要利用的系统 | 第21-24页 |
| 1.4.2.1 GAL4/UAS系统 | 第21页 |
| 1.4.2.2 CRISPR/Cas9系统 | 第21-24页 |
| 1.4.2.3 果蝇的肌肉系统 | 第24页 |
| 1.4.3 利用果蝇AD模型所取得的进展 | 第24-26页 |
| 1.5 本课题开展的目的和意义 | 第26-27页 |
| 第2章 材料与方法 | 第27-36页 |
| 2.1 果蝇品系 | 第27-28页 |
| 2.2 免疫染色和western blotting所用到的抗体 | 第28-29页 |
| 2.3 果蝇幼虫肌肉系统免疫组织化学染色 | 第29-30页 |
| 2.4 Western blotting检测乙酰化的微管 | 第30页 |
| 2.5 定点突变体果蝇工具株的构建 | 第30-34页 |
| 2.5.1 利用CRISPR/Cas9系统构建α-tubulin点突变体 | 第30-32页 |
| 2.5.2 所使用的载体 | 第32-33页 |
| 2.5.3 用于定点突变载体的构建 | 第33-34页 |
| 2.5.3.1 所使用的引物列表 | 第33-34页 |
| 2.5.3.2 CRISPR系统中所构建的sgRNA载体 | 第34页 |
| 2.6 果蝇的显微注射 | 第34-35页 |
| 2.7 统计学方法 | 第35-36页 |
| 第3章 实验结果 | 第36-46页 |
| 3.1 利用CRISPR/Cas9技术获得模拟乙酰化微管的转基因果蝇 | 第36-38页 |
| 3.1.1 获得能引起突变效应的sgRNA | 第36-37页 |
| 3.1.2 获得内源性并能够稳定表达sgRNA的转基因果蝇 | 第37-38页 |
| 3.2 利用转基因的sgRNA及cas9果蝇进行点突变体筛选 | 第38页 |
| 3.3 鉴定得到的α-tubule K40Q突变体果蝇 | 第38-40页 |
| 3.4 MEC17在肌肉系统中微管乙酰化的调控 | 第40-41页 |
| 3.4.1 USA-mec17转基因果蝇的构建 | 第40页 |
| 3.4.2 MEC17在果蝇肌肉系统中对微管乙酰化状态的调节 | 第40-41页 |
| 3.5 用针对HDAC6去乙酰化活性的抑制剂Tubastatin A/ACY-1215能够很好地挽救人类Tau蛋白在果蝇肌肉中过表达造成微管破坏 | 第41-44页 |
| 3.5.1 Tau在果蝇肌肉系统中二龄幼虫的表型 | 第41-43页 |
| 3.5.2 用针对HDAC6去乙酰化活性的抑制剂Tubastatin A/ACY-1215挽救人类Tau蛋白在果蝇肌肉中过表达造成微管破坏 | 第43-44页 |
| 3.6 小结 | 第44-46页 |
| 第4章 讨论 | 第46-49页 |
| 4.1 外源氨基酸对于α微管蛋白第40位Lys乙酰化及去乙酰化修饰的模拟 | 第46-47页 |
| 4.2 MEC17和HDAC6在肌肉系统中对微管乙酰化修饰的调控 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
