摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
本文所用主要缩略词 | 第16-17页 |
第一部分 文献综述 | 第17-45页 |
第一章 棉纤维发育相关研究进展 | 第17-29页 |
1 棉花纤维发育不同时期研究进展 | 第18-21页 |
1.1 起始分化期 | 第18-19页 |
1.2 伸长期/初生壁合成期 | 第19-20页 |
1.3 次生壁合成期 | 第20-21页 |
1.4 成熟期 | 第21页 |
2 棉纤维发育不同时期相关基因研究进展 | 第21-29页 |
第二章 基因芯片技术研究进展 | 第29-35页 |
1 基因芯片技术的概念 | 第29页 |
2 基因芯片的技术特点 | 第29-30页 |
3 基因芯片的分类 | 第30页 |
4 基因芯片技术在作物研究中的应用 | 第30-33页 |
4.1 研究植株对逆境的反应 | 第30-31页 |
4.2 基因组DNA序列分析 | 第31页 |
4.3 基因转录水平检测 | 第31页 |
4.4 植物基因突变和多态性状的检测 | 第31-32页 |
4.5 转基因作物相关检测 | 第32页 |
4.6 其他方面 | 第32-33页 |
5 基因芯片技术在棉纤维发育相关基因研究中的应用 | 第33-35页 |
第三章 膜联蛋白基因研究进展 | 第35-43页 |
1 植物annexins基因功能 | 第35-39页 |
1.1 细胞分泌 | 第35-36页 |
1.2 胼胝质酶活性和GTPase/ATPase活性 | 第36-37页 |
1.3 蛋白质磷酸化底物 | 第37页 |
1.4 植物膜联蛋白的过氧化物酶活性 | 第37-38页 |
1.5 植物膜联蛋白与非生物逆境联系 | 第38-39页 |
2 Annexins在植物细胞中的定位 | 第39-40页 |
3 植物annexins基因的功能总结和展望 | 第40-43页 |
本研究的目的和意义 | 第43-45页 |
第二部分 研究报告 | 第45-161页 |
第四章 棉纤维伸长发育早期优势表达ESTs分析 | 第45-81页 |
1 材料与方法 | 第45-54页 |
1.1 试验材料 | 第45-46页 |
1.2 cDNA文库的构建 | 第46页 |
1.3 cDNA芯片的制备与杂交 | 第46-47页 |
1.4 ESTs的序列分析和功能分类 | 第47-48页 |
1.5 RT-PCR验证 | 第48-54页 |
1.6 利用[(TM-1×Hai7124)×TM-1]群体的基因定位 | 第54页 |
2 结果与分析 | 第54-79页 |
2.1 ESTs序列信息 | 第54页 |
2.2 杂交表达谱与差异表达基因的功能预测 | 第54-72页 |
2.3 基因芯片结果的RT-PCR验证 | 第72-75页 |
2.4 差异表达ESTs的染色体定位 | 第75-79页 |
3 讨论 | 第79-81页 |
3.1 基因芯片结果与RT-PCR结果的一致性 | 第79页 |
3.2 差异表达ESTs的功能分类 | 第79页 |
3.3 基因芯片材料与研究的目标材料之间的差异 | 第79-80页 |
3.4 差异表达ESTs的染色体定位 | 第80-81页 |
第五章 棉纤维膜联蛋白基因的克隆、鉴定和转基因功能初步分析 | 第81-161页 |
1 材料与方法 | 第81-109页 |
1.1 植物材料 | 第81-82页 |
1.2 菌种和质粒 | 第82页 |
1.3 试剂 | 第82页 |
1.4 基因全长克隆引物和RT-PCR引物 | 第82-83页 |
1.5 棉花RNA的提取 | 第83-84页 |
1.6 TAIL-PCR步骤 | 第84-87页 |
1.7 扩增产物的电泳,回收,克隆及测序 | 第87-88页 |
1.8 生物信息学分析 | 第88-89页 |
1.9 多重序列比对和遗传进化分析 | 第89页 |
1.10 特异基因基因组序列的分离和比对 | 第89页 |
1.11 RT-PCR分析 | 第89-90页 |
1.12 Southern杂交分析 | 第90-92页 |
1.13 Northern杂交分析 | 第92-94页 |
1.14 利用[(TM-1×Hai7124)×TM-1]群体的基因定位 | 第94页 |
1.15 载体构建及PCR检测引物 | 第94-95页 |
1.16 植物表达载体的构建 | 第95-99页 |
1.17 感受态细胞的制备和大肠杆菌的转化 | 第99-100页 |
1.18 阳性单克隆的检测 | 第100-101页 |
1.19 基因枪介导的瞬时表达载体在植物细胞的转化 | 第101-102页 |
1.20 培养基 | 第102-105页 |
1.21 农杆菌感受态的制备、转化、质粒的提取以及PCR检测 | 第105-106页 |
1.22 农杆菌介导的棉花遗传转化 | 第106-108页 |
1.23 再生植株的PCR检测 | 第108页 |
1.24 GUS染色分析 | 第108-109页 |
2 结果与分析 | 第109-153页 |
2.1 总RNA的完整性 | 第109-110页 |
2.2 ESTs序列的获得 | 第110页 |
2.3 GhFAnnl基因全长的克隆和表达分析 | 第110-121页 |
2.4 GhFAnnx基因全长的克隆和表达分析 | 第121-134页 |
2.5 GhFAnnl与GhFAnnx基因瞬时表达载体的构建 | 第134-136页 |
2.6 GhFAnnl与GhFAnnx基因pBI121表达载体的构建 | 第136-142页 |
2.7 GhFAnnl与GhFAnnx基因瞬时表达载体转化植物细胞 | 第142-146页 |
2.8 GhFAnnl与GhFAnnx基因的棉花遗传转化 | 第146-148页 |
2.9 GhFAnnl与GhFAnnx基因棉花转基因植株检测 | 第148-153页 |
3 讨论 | 第153-161页 |
3.1 棉花各组织器官RNA的提取 | 第153-154页 |
3.2 全长基因的概念 | 第154页 |
3.3 特异基因染色体定位的意义 | 第154-155页 |
3.4 相同基因在不同基因组的序列分析 | 第155-156页 |
3.5 融合表达载体的构建 | 第156页 |
3.6 Annexins基因在棉纤维中的可能功能 | 第156-157页 |
3.7 Annexins基因在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位分析 | 第157-158页 |
3.8 Annexins基因对于棉纤维极性伸长起重要作用 | 第158-159页 |
3.9 Annexins基因在转基因棉花各组织器官的GUS染色分析 | 第159-161页 |
全文结论 | 第161-163页 |
参考文献 | 第163-177页 |
发表论文 | 第177-179页 |
致谢 | 第179页 |