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水稻NAC转录因子ONAC131、MNAC1和ONAC095在抗病抗逆中的功能研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述第16-31页
    1.1 NAC转录因子的结构特征第16-17页
    1.2 NAC转录因子分类第17-18页
    1.3 NAC转录因子的亚细胞定位第18-19页
    1.4 NAC转录因子的生物学功能第19-28页
        1.4.1 NAC转录因子在生长发育中的作用第19页
        1.4.2 NAC转录因子在非生物逆境胁迫中的作用第19-21页
        1.4.3 NAC转录因子在植物抗病反应中的作用第21-28页
    1.5 NAC转录因子的调控机制第28页
        1.5.1 NAC转录因子在转录水平的调控第28页
        1.5.2 NAC转录因子在蛋白水平的调控第28页
    1.6 展望第28-29页
    1.7 本研究的目的意义第29-30页
    1.8 主要研究内容第30-31页
第二章 材料方法第31-42页
    2.1 水稻材料第31页
    2.2 水稻遗传转化第31-34页
        2.2.1 水稻愈伤组织的诱导第31页
        2.2.2 水稻愈伤组织的侵染第31-32页
        2.2.3 愈伤组织的筛选第32页
        2.2.4 抗性愈伤的预分化及再分化第32页
        2.2.5 生根培养及炼苗第32页
        2.2.6 纯合品系的筛选第32-34页
    2.3 激素处理第34页
    2.4 水稻生物逆境处理第34-35页
        2.4.1 水稻接种稻瘟菌处理第34-35页
        2.4.2 水稻接种白叶枯菌处理第35页
    2.5 水稻非生物逆境处理第35-36页
        2.5.1 转基因幼苗耐干旱测定第35页
        2.5.2 转基因幼苗抗寒性测定第35-36页
    2.6 水稻非生物逆境中相关生理指标的测定第36-38页
        2.6.1 水稻叶片组织脯氨酸含量测定第36页
        2.6.2 水稻叶片组织可溶性糖含量测定第36页
        2.6.3 植物组织中丙二醛(MDA)含量测定第36页
        2.6.4 植物叶片相对电导率的测定第36-37页
        2.6.5 水稻叶片失水率测定第37页
        2.6.6 水稻叶片活性氧的检测第37页
        2.6.7 水稻叶绿素含量测定第37页
        2.6.8 水稻H202含量测定第37页
        2.6.9 水稻SOD活力测定第37-38页
        2.6.10 水稻CAT活性测定第38页
    2.7 水稻总RNA的提取第38-39页
    2.8 cDNA的合成第39页
    2.9 水稻基因的克隆第39-40页
    2.10 实时定量PCR第40页
    2.11 蛋白亚细胞定位分析第40页
    2.12 转录活性分析第40-41页
    2.13 酵母双杂交第41页
    2.14 植物激素测定第41-42页
第三章 水稻ONAC131功能分析第42-60页
    3.1 结果分析第42-56页
        3.1.1 ONAC131在各种逆境处理之后的表达模式分析第42-44页
        3.1.2 ONAC131组织特异性表达及其启动子分析第44-45页
        3.1.3 ONAC131转录活性区域的鉴定第45-46页
        3.1.4 ONAC131同源或异源二聚体形成鉴定第46-47页
        3.1.5 ONAC131在嵌合抑制子中表达水平的检测第47-48页
        3.1.6 嵌合抑制ONAC131对水稻生长发育及农艺性状的影响第48-49页
        3.1.7 ONAC131嵌合抑制子对白叶枯病菌抗性研究第49-51页
            3.1.7.1 ONAC131嵌合抑制子增强对白叶枯病菌的抗病性第49-51页
            3.1.7.2 ONAC131嵌合抑制子接种白叶枯病菌前后抗病相关基因表达量检测第51页
        3.1.8 ONAC131嵌合抑制子增强对盐害的敏感性第51-53页
        3.1.9 ONAC131嵌合抑制子增强对干旱的敏感性第53-54页
        3.1.10 ONAC131嵌合抑制子冷害胁迫的抗性测定第54-56页
            3.1.10.1 ONAC131嵌合抑制子增强对冷害胁迫的敏感性第54-56页
            3.1.10.2 ONAC131嵌合抑制子冷害处理前后冷害相关基因表达量检测第56页
    3.2 讨论第56-60页
        3.2.1 ONAC131启动子为组织特异性启动子第57页
        3.2.2 ONAC131嵌合抑制子增强对白叶枯病菌抗性,降低了对盐害、干旱及冷害的耐受力第57-60页
第四章 水稻MNAC1功能分析第60-80页
    4.1 结果分析第60-78页
        4.1.1 受稻瘟菌诱导NAC基因的鉴定第60-62页
        4.1.2 MNACs在激素处理之后表达模式分析第62-63页
        4.1.3 MNAC1序列同源比对及系统进化树分析第63-67页
        4.1.4 MNACs转录活性分析第67-69页
        4.1.5 MNACs亚细胞定位分析第69-71页
        4.1.6 MNAC1过量表达转基因株系的获得第71-72页
        4.1.7 MNAC1对水稻抗稻瘟菌和白叶枯菌抗性的研究第72-77页
            4.1.7.1 过量表达MNAC1降低水稻对稻瘟病菌的抗性第72-74页
            4.1.7.2 过量表达MNAC1不影响水稻对白叶枯菌的抗性第74-75页
            4.1.7.3 MNAC1过表达株系在接种稻瘟病菌前后抗病相关基因表达量检测第75-77页
        4.1.8 MNAC1过表达株系在接种稻瘟菌前后水杨酸和茉莉酸含量的变化第77-78页
    4.2 讨论第78-80页
第五章 水稻ONAC095功能分析第80-102页
    5.1 结果分析第80-99页
        5.1.1 ONAC095序列和进化树分析第80-82页
        5.1.2 ONAC095表达模式分析第82-84页
            5.1.2.1 ONAC095在逆境胁迫下及ABA处理下的表达模式分析第82-83页
            5.1.2.2 ONAC095在不同组织中的表达模式第83-84页
        5.1.3 ONAC095转录活性分析第84-87页
        5.1.4 ONAC095亚细胞定位分析第87-88页
        5.1.5 ONAC095转基因水稻基因表达量检测第88-89页
        5.1.6 ONAC095对水稻生长发育及农艺性状的影响第89页
        5.1.7 ONAC095转基因株系在干旱胁迫中的表型鉴定第89-92页
            5.1.7.1 ONAC095嵌合抑制子增强对干旱胁迫的抗性第89-91页
            5.1.7.2 ONAC095嵌合抑制子在干旱胁迫下脯氨酸及可溶性糖含量的变化第91页
            5.1.7.3 ONAC095嵌合抑制子抗旱相关基因在干旱处理前后表达量的变化第91-92页
        5.1.8 ONAC095转基因株系在冷害胁迫中的表型鉴定第92-97页
            5.1.8.1 ONAC095嵌合抑制子降低了对冷害胁迫的抗性第92页
            5.1.8.2 ONAC095嵌合抑制子冷害处理后电导率、MDA含量和叶绿素含量测定第92-93页
            5.1.8.3 ONAC095嵌合抑制子在冷害处理前后冷害相关基因表达量检测第93-94页
            5.1.8.4 ONAC095嵌合抑制子冷害处理后叶片组织活性氧检测第94-96页
            5.1.8.5 ONAC095嵌合抑制子冷害处理前后NADPH氧化酶基因表达量检测第96-97页
        5.1.9 ONAC095嵌合抑制子增强对ABA的敏感性第97-98页
        5.1.10 ONAC095嵌合抑制子内源ABA含量的测定及ABA合成代谢相关基因的表达检测第98-99页
    5.2 讨论第99-102页
第六章 全文小结第102-104页
附件1 水稻Metacaspase家族表达模式,亚细胞定位及互作分析第104-115页
附件2 水稻Glutamator受体家族基因生物信息学及表达模式分析第115-127页
参考文献第127-145页
附录第145-153页

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