摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-9页 |
材料与方法 | 第9-19页 |
1 材料 | 第9-10页 |
1.1 主要试剂 | 第9页 |
1.2 主要仪器及分析软件 | 第9-10页 |
1.3 肝细胞肝癌标本收集与处理 | 第10页 |
1.4 细胞培养 | 第10页 |
2 方法 | 第10-19页 |
2.1 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第10-12页 |
2.1.1 组织总RNA提取 | 第10-11页 |
2.1.2 mRNA逆转录 | 第11页 |
2.1.3 qRT-PCR | 第11-12页 |
2.2 蛋白质免疫印迹 (western blot) | 第12-14页 |
2.2.1 组织总蛋白提取 | 第12页 |
2.2.2 BCA法检测总蛋白浓度 | 第12-13页 |
2.2.3 western blot | 第13-14页 |
2.3 组织芯片及免疫组化 | 第14-15页 |
2.3.1 组织芯片构建 | 第14页 |
2.3.2 免疫组织化学染色 | 第14-15页 |
2.3.3 免疫组化结果分析 | 第15页 |
2.4 肝癌细胞系SMMC-7721 细胞转染 | 第15-16页 |
2.4.1 小干扰RNA(siRNA)转染 | 第15页 |
2.4.2 过表达质粒转染 | 第15-16页 |
2.5 MTT实验 | 第16页 |
2.6 平板克隆形成实验 | 第16页 |
2.7 Transwell小室检测细胞迁移及侵袭能力 | 第16-17页 |
2.8 流式细胞仪检测细胞周期 | 第17页 |
2.9 统计学分析 | 第17页 |
2.10 引物及siRNA序列表 | 第17-19页 |
结果 | 第19-22页 |
1 CBX8 mRNA在肝细胞肝癌新鲜组织中表达上调 | 第19页 |
2 CBX8蛋白质在肝细胞肝癌新鲜组织中表达上调 | 第19页 |
3 CBX8蛋白质在组织芯片中的表达情况 | 第19页 |
4 CBX8在肝细胞肝癌中的表达与临床病理特征之间的关系 | 第19-21页 |
5 肝癌细胞系SMMC-7721 转染结果 | 第21页 |
6 CBX8对肝癌细胞系SMMC-7721 细胞增殖和克隆形成能力的影响 | 第21页 |
7 CBX8对SMMC-7721 细胞迁移侵袭能力的影响 | 第21页 |
8 CBX8对SMMC-7721 细胞周期进程的影响 | 第21-22页 |
讨论 | 第22-27页 |
结论 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-32页 |
附图 | 第32-38页 |
综述 | 第38-50页 |
综述参考文献 | 第44-50页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |