摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第12-21页 |
1 爬行动物温度依赖型性别决定 | 第12-14页 |
1.1 爬行动物的性别决定模式 | 第12页 |
1.2 温度依赖型性别决定模式 | 第12-14页 |
1.3 TSD爬行动物的性别决定与性别分化 | 第14页 |
2 TSD爬行动物性别决定相关基因 | 第14-19页 |
2.1 Dmrt1(Double-sex and Mab-3 related transcription factor 1) | 第14-16页 |
2.2 Sox9(SRY related HMG-box gene 9) | 第16-17页 |
2.3 AMH(Anti-Mullererian Hormone) | 第17-18页 |
2.4 Lhx9(LIM-homeodomain transcription factor 9) | 第18页 |
2.5 Sf1(Steroidogenic factor-1) | 第18-19页 |
2.6 WT1(Wilms'Tumor suppressor 1) | 第19页 |
3 论文选题意义 | 第19-21页 |
第二章 激素操纵对多疣壁虎性别的影响 | 第21-30页 |
1 实验动物 | 第21-22页 |
2 实验方法 | 第22-26页 |
2.1 实验准备 | 第22页 |
2.2 壁虎饲养 | 第22页 |
2.3 卵收集与测量 | 第22-23页 |
2.4 卵孵化与激素操纵 | 第23-24页 |
2.5 幼体测量与饲养 | 第24页 |
2.6 幼体性别鉴定 | 第24页 |
2.7 数据分析 | 第24-26页 |
3 实验结果 | 第26-28页 |
3.1 卵孵化期和孵化成功率 | 第26页 |
3.2 不同处理组后代存活率和性比 | 第26-28页 |
3.2.1 不同处理组后代存活率 | 第26-27页 |
3.2.2 不同处理组后代性比 | 第27-28页 |
4 讨论 | 第28-29页 |
5 结论 | 第29-30页 |
第三章 多疣壁虎Dmrt1基因的克隆及序列分析 | 第30-47页 |
1 实验动物 | 第30页 |
2 实验试剂与仪器 | 第30-31页 |
2.1 试剂 | 第30-31页 |
2.2 仪器 | 第31页 |
3 实验方法 | 第31-38页 |
3.1 多疣壁虎Dmrt1基因克隆 | 第31-38页 |
3.1.1 引物设计 | 第31-32页 |
3.1.2 精巢组织总RNA提取 | 第32-33页 |
3.1.3 Dmrt1基因中间片段的克隆 | 第33页 |
3.1.4 Dmrt1基因3'RACE克隆 | 第33-35页 |
3.1.5 Dmrt1基因5'RACE克隆 | 第35-36页 |
3.1.6 PCR产物的回收与纯化 | 第36页 |
3.1.7 克隆及测序 | 第36-37页 |
3.1.8 序列分析 | 第37-38页 |
4 实验结果 | 第38-44页 |
4.1 精巢中总RNA的提取 | 第38页 |
4.2 Dmrt1中间序列 | 第38-39页 |
4.3 3'-RACE结果 | 第39页 |
4.4 5'-RACE结果 | 第39-40页 |
4.5 测序结果 | 第40-44页 |
5 讨论 | 第44-46页 |
5.1 Dmrt1基因的功能分析 | 第44-45页 |
5.2 多疣壁虎Dmrt1基因保守性分析 | 第45-46页 |
6 结论 | 第46-47页 |
第四章 Dmrt1基因在多疣壁虎TSD中的作用分析 | 第47-57页 |
1 实验动物及材料仪器 | 第47-48页 |
1.1 实验动物 | 第47页 |
1.2 试剂 | 第47页 |
1.3 仪器 | 第47-48页 |
2 实验方法 | 第48-51页 |
2.1 实验材料收集 | 第48-49页 |
2.1.1 获取多疣壁虎成体性腺 | 第48页 |
2.1.2 获取多疣壁虎雄性精巢 | 第48页 |
2.1.3 卵收集与孵化 | 第48页 |
2.1.4 卵解剖 | 第48-49页 |
2.2 RNA提取 | 第49页 |
2.3 cDNA合成 | 第49-50页 |
2.4 实时荧光定量PCR | 第50页 |
2.5 数据分析 | 第50-51页 |
3 实验结果 | 第51-54页 |
3.1 qPCR特异性引物筛选结果 | 第51页 |
3.2 多疣壁虎雌雄不同组织荧光定量检测结果 | 第51-52页 |
3.3 多疣壁虎繁殖期精巢中Dmrt1基因表达情况 | 第52-53页 |
3.4 Dmrt1基因在胚胎AKG中的表达情况 | 第53-54页 |
3.4.1 胚胎发育时期 | 第53页 |
3.4.2 AKG中Dmrt1基因的表达量 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-55页 |
4.1 性别相关基因不同组织表达情况 | 第54-55页 |
4.2 Dmrt1基因在多疣壁虎性别决定中的作用 | 第55页 |
5 结论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
附录A | 第66-67页 |
附录B | 第67-69页 |
附录C | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第71页 |