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多疣壁虎Dmrt1基因的克隆与表达分析及其在TSD中的作用

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 绪论第12-21页
    1 爬行动物温度依赖型性别决定第12-14页
        1.1 爬行动物的性别决定模式第12页
        1.2 温度依赖型性别决定模式第12-14页
        1.3 TSD爬行动物的性别决定与性别分化第14页
    2 TSD爬行动物性别决定相关基因第14-19页
        2.1 Dmrt1(Double-sex and Mab-3 related transcription factor 1)第14-16页
        2.2 Sox9(SRY related HMG-box gene 9)第16-17页
        2.3 AMH(Anti-Mullererian Hormone)第17-18页
        2.4 Lhx9(LIM-homeodomain transcription factor 9)第18页
        2.5 Sf1(Steroidogenic factor-1)第18-19页
        2.6 WT1(Wilms'Tumor suppressor 1)第19页
    3 论文选题意义第19-21页
第二章 激素操纵对多疣壁虎性别的影响第21-30页
    1 实验动物第21-22页
    2 实验方法第22-26页
        2.1 实验准备第22页
        2.2 壁虎饲养第22页
        2.3 卵收集与测量第22-23页
        2.4 卵孵化与激素操纵第23-24页
        2.5 幼体测量与饲养第24页
        2.6 幼体性别鉴定第24页
        2.7 数据分析第24-26页
    3 实验结果第26-28页
        3.1 卵孵化期和孵化成功率第26页
        3.2 不同处理组后代存活率和性比第26-28页
            3.2.1 不同处理组后代存活率第26-27页
            3.2.2 不同处理组后代性比第27-28页
    4 讨论第28-29页
    5 结论第29-30页
第三章 多疣壁虎Dmrt1基因的克隆及序列分析第30-47页
    1 实验动物第30页
    2 实验试剂与仪器第30-31页
        2.1 试剂第30-31页
        2.2 仪器第31页
    3 实验方法第31-38页
        3.1 多疣壁虎Dmrt1基因克隆第31-38页
            3.1.1 引物设计第31-32页
            3.1.2 精巢组织总RNA提取第32-33页
            3.1.3 Dmrt1基因中间片段的克隆第33页
            3.1.4 Dmrt1基因3'RACE克隆第33-35页
            3.1.5 Dmrt1基因5'RACE克隆第35-36页
            3.1.6 PCR产物的回收与纯化第36页
            3.1.7 克隆及测序第36-37页
            3.1.8 序列分析第37-38页
    4 实验结果第38-44页
        4.1 精巢中总RNA的提取第38页
        4.2 Dmrt1中间序列第38-39页
        4.3 3'-RACE结果第39页
        4.4 5'-RACE结果第39-40页
        4.5 测序结果第40-44页
    5 讨论第44-46页
        5.1 Dmrt1基因的功能分析第44-45页
        5.2 多疣壁虎Dmrt1基因保守性分析第45-46页
    6 结论第46-47页
第四章 Dmrt1基因在多疣壁虎TSD中的作用分析第47-57页
    1 实验动物及材料仪器第47-48页
        1.1 实验动物第47页
        1.2 试剂第47页
        1.3 仪器第47-48页
    2 实验方法第48-51页
        2.1 实验材料收集第48-49页
            2.1.1 获取多疣壁虎成体性腺第48页
            2.1.2 获取多疣壁虎雄性精巢第48页
            2.1.3 卵收集与孵化第48页
            2.1.4 卵解剖第48-49页
        2.2 RNA提取第49页
        2.3 cDNA合成第49-50页
        2.4 实时荧光定量PCR第50页
        2.5 数据分析第50-51页
    3 实验结果第51-54页
        3.1 qPCR特异性引物筛选结果第51页
        3.2 多疣壁虎雌雄不同组织荧光定量检测结果第51-52页
        3.3 多疣壁虎繁殖期精巢中Dmrt1基因表达情况第52-53页
        3.4 Dmrt1基因在胚胎AKG中的表达情况第53-54页
            3.4.1 胚胎发育时期第53页
            3.4.2 AKG中Dmrt1基因的表达量第53-54页
    4 讨论第54-55页
        4.1 性别相关基因不同组织表达情况第54-55页
        4.2 Dmrt1基因在多疣壁虎性别决定中的作用第55页
    5 结论第55-57页
参考文献第57-66页
附录A第66-67页
附录B第67-69页
附录C第69-70页
致谢第70-71页
攻读硕士学位期间发表论文第71页

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