| 个人简历 | 第4-8页 |
| 缩略词中英文对照表 | 第8-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 第一章 稳定过表达KLK7的22RV1细胞系的建立与鉴定 | 第18-33页 |
| 1 材料与方法 | 第18-28页 |
| 1.1 材料 | 第18-22页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第18-19页 |
| 1.1.2 主要试剂与耗材 | 第19-21页 |
| 1.1.3 主要溶液配制 | 第21-22页 |
| 1.1.4 样本 | 第22页 |
| 1.2 方法 | 第22-28页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 1.2.2 转染与筛选 | 第23页 |
| 1.2.3 mRNA水平鉴定KLK7基因的表达 | 第23-25页 |
| 1.2.4 蛋白水平鉴定KLK7基因的表达 | 第25-27页 |
| 1.2.5 统计分析 | 第27-28页 |
| 2 结果 | 第28-30页 |
| 2.1 22RV1-KLK7细胞系中KLK7的mRNA水平 | 第28-30页 |
| 2.2 22RV1-KLK7细胞系中KLK7的蛋白水平 | 第30页 |
| 3 讨论 | 第30-33页 |
| 第二章 SILAC技术解析KLK7对前列腺癌细胞22RV1的调控作用 | 第33-53页 |
| 1 材料和方法 | 第33-42页 |
| 1.1 材料 | 第33-35页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第33-34页 |
| 1.1.2 主要试剂与耗材 | 第34-35页 |
| 1.2.3 主要溶液配制 | 第35页 |
| 1.2 方法 | 第35-42页 |
| 1.2.1 SILAC标记 | 第35-36页 |
| 1.2.3 蛋白提取、电泳、染色 | 第36-37页 |
| 1.2.4 脱水、酶解、提肽 | 第37-38页 |
| 1.2.5 肽段的高效液相色谱分离 | 第38-39页 |
| 1.2.6 质谱鉴定 | 第39页 |
| 1.2.7 结果搜库和统计分析 | 第39-40页 |
| 1.2.8 差异蛋白的生物信息学分析 | 第40-42页 |
| 2 结果 | 第42-49页 |
| 2.1 SILAC标记效率鉴定 | 第42页 |
| 2.2 SDS-PAGE考马斯亮蓝染色结果 | 第42-43页 |
| 2.3 HPLC分离结果 | 第43-44页 |
| 2.4 质谱鉴定和搜库结果 | 第44-45页 |
| 2.5 差异蛋白的生物信息学分析 | 第45-49页 |
| 3 讨论 | 第49-53页 |
| 第三章 KLK7所调控的部分差异蛋白的验证 | 第53-65页 |
| 1 材料和方法 | 第53-57页 |
| 1.1 材料 | 第53-54页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第53页 |
| 1.1.2 主要试剂与耗材 | 第53-54页 |
| 1.1.3 主要溶液配制 | 第54页 |
| 1.1.4 样本 | 第54页 |
| 1.2 方法 | 第54-57页 |
| 1.2.1 RT q-PCR测定候选蛋白的mRNA水平 | 第54-55页 |
| 1.2.2 蛋白免疫印迹测定候选蛋白的表达水平 | 第55页 |
| 1.2.3 免疫组化测定候选蛋白的表达水平 | 第55-57页 |
| 1.2.4 统计学分析 | 第57页 |
| 2 结果 | 第57-62页 |
| 2.1 AGR2、TST基因的mRNA水平验证 | 第57-58页 |
| 2.2 AGR2、TST的蛋白水平验证 | 第58-59页 |
| 2.3 AGR2、TST在组织芯片的表达水平 | 第59-62页 |
| 2.3.1 组织微阵列芯片样品信息 | 第59-60页 |
| 2.3.2 组织芯片IHC结果 | 第60-62页 |
| 3 讨论 | 第62-65页 |
| 全文小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 综述 | 第70-82页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第83页 |
