| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-27页 |
| 1.1 酸性土壤存在的问题 | 第16页 |
| 1.1.1 铝毒害 | 第16页 |
| 1.1.2 低磷胁迫 | 第16页 |
| 1.2 铝毒的主要作用位点与机理 | 第16-19页 |
| 1.2.1 铝对细胞壁的毒害作用 | 第17页 |
| 1.2.2 铝对细胞膜的毒害作用 | 第17-18页 |
| 1.2.3 铝对细胞骨架的毒害作用 | 第18页 |
| 1.2.4 铝对细胞核的毒害作用 | 第18-19页 |
| 1.3 植物主要的耐铝机制 | 第19-23页 |
| 1.3.1 外部排毒机制 | 第19-22页 |
| 1.3.2 内部解铝毒机制 | 第22-23页 |
| 1.4 植物适应低磷胁迫的机制 | 第23页 |
| 1.5 柱花草对酸性土壤的适应性 | 第23-24页 |
| 1.6 研究目的 | 第24页 |
| 1.7 研究意义 | 第24页 |
| 1.8 研究思路 | 第24页 |
| 1.9 研究内容 | 第24-25页 |
| 1.9.1 柱花草适应酸铝胁迫的生理和分子机制 | 第24页 |
| 1.9.2 柱花草适应低磷胁迫的分子机制 | 第24-25页 |
| 1.10 拟解决的科学问题 | 第25-26页 |
| 1.11 技术路线 | 第26-27页 |
| 第二章 柱花草耐铝毒的生理机制 | 第27-37页 |
| 2.1 引言 | 第27-28页 |
| 2.2 材料与方法 | 第28-30页 |
| 2.2.1 供试材料 | 第28页 |
| 2.2.2 试验设计 | 第28-29页 |
| 2.2.3 相对根长的测定 | 第29页 |
| 2.2.4 植株铝含量的测定 | 第29页 |
| 2.2.5 柱花草有机酸测定方法 | 第29页 |
| 2.2.6 数据统计 | 第29-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-34页 |
| 2.3.1 不同铝浓度处理对柱花草和水稻相对根长的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.2 铝处理对柱花草根部铝含量的影响 | 第31页 |
| 2.3.3 铝处理对柱花草根系有机酸合成与分泌的影响 | 第31-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 2.4.1 柱花草TPRC2001-1具有较强的耐铝性 | 第34-35页 |
| 2.4.2 柱花草TPRC2001-1主要通过增加苹果酸的分泌和内源浓度缓解铝毒害 | 第35-36页 |
| 2.5 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 抑制缩减杂交文库筛选TPRC2001-1耐铝基因 | 第37-50页 |
| 3.1 引言 | 第37-38页 |
| 3.2 材料与方法 | 第38-42页 |
| 3.2.1 供试材料 | 第38页 |
| 3.2.2 试验设计 | 第38页 |
| 3.2.3 总RNA的提取 | 第38-39页 |
| 3.2.4 mRNA的分离 | 第39页 |
| 3.2.5 抑制缩减文库(SSH)的构建 | 第39-42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-46页 |
| 3.3.1 抑制缩减杂交文库的构建和克隆检测 | 第42-43页 |
| 3.3.2 EST序列功能分类与分析 | 第43-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-49页 |
| 3.5 小结 | 第49-50页 |
| 第四章 铝胁迫下柱花草根系的蛋白组学研究 | 第50-65页 |
| 4.1 引言 | 第50-51页 |
| 4.2 材料与方法 | 第51-53页 |
| 4.2.1 供试材料 | 第51页 |
| 4.2.2 试验设计 | 第51页 |
| 4.2.3 蛋白质双向电泳 | 第51-52页 |
| 4.2.4 总RNA提取与反转录 | 第52页 |
| 4.2.5 EST序列的获得 | 第52-53页 |
| 4.2.6 定量PCR分析 | 第53页 |
| 4.2.7 数据统计 | 第53页 |
| 4.3 结果与分析 | 第53-61页 |
| 4.3.1 柱花草根系蛋白表达图谱与质谱分析结果 | 第53-58页 |
| 4.3.2 铝处理对编码柱花草根系蛋白基因表达的影响 | 第58-61页 |
| 4.4 讨论 | 第61-64页 |
| 4.5 小结 | 第64-65页 |
| 第五章 柱花草苹果酸酶SgME1缓解铝毒害的功能研究 | 第65-83页 |
| 5.1 引言 | 第65-66页 |
| 5.2 材料与方法 | 第66-73页 |
| 5.2.1 供试材料 | 第66-67页 |
| 5.2.2 试验设计 | 第67页 |
| 5.2.3 培养基及配方 | 第67-68页 |
| 5.2.4 感受态细胞的制备与转化 | 第68-69页 |
| 5.2.5 SgME1 cDNA全长序列克隆 | 第69页 |
| 5.2.6 SgME1瞬时表达载体的构建及亚细胞定位 | 第69-71页 |
| 5.2.7 SgME1酵母表达载体的构建及铝处理对酵母生长的影响 | 第71-72页 |
| 5.2.8 SgME1过量表达载体的构建及菜豆毛状根转化试验 | 第72-73页 |
| 5.2.9 数据统计 | 第73页 |
| 5.3 结果与分析 | 第73-80页 |
| 5.3.1 铝处理对苹果酸酶蛋白与其编码基因SgME1表达的影响 | 第73-74页 |
| 5.3.2 苹果酸酶cDNA全长序列的克隆、进化树分析和亚细胞定位 | 第74-77页 |
| 5.3.3 铝处理对过量表达SgME1酵母菌株生长的影响 | 第77-78页 |
| 5.3.4 铝处理对过量表达SgME1转基因菜豆毛根生长的影响 | 第78-80页 |
| 5.4 讨论 | 第80-81页 |
| 5.5 小结 | 第81-83页 |
| 第六章 根尖剥落物的形成及其参与缓解铝毒害的研究 | 第83-93页 |
| 6.1 引言 | 第83-84页 |
| 6.2 材料与方法 | 第84-86页 |
| 6.2.1 供试材料 | 第84页 |
| 6.2.2 试验设计 | 第84-85页 |
| 6.2.3 相对根长测定 | 第85页 |
| 6.2.4 苏木精染色 | 第85页 |
| 6.2.5 根部透明化 | 第85页 |
| 6.2.6 数据统计 | 第85-86页 |
| 6.3 结果与分析 | 第86-91页 |
| 6.3.1 铝处理对TPRC2001-1剥落物形成的影响 | 第86-87页 |
| 6.3.2 根尖剥落物对柱花草耐铝性的影响 | 第87-90页 |
| 6.3.3 铝处理对TPRC2001-1根尖剥落物形成位置的影响 | 第90-91页 |
| 6.4 讨论 | 第91-92页 |
| 6.5 小结 | 第92-93页 |
| 第七章 低磷响应关键基因的克隆及表达模式分析 | 第93-107页 |
| 7.1 引言 | 第93-94页 |
| 7.2 材料与方法 | 第94-96页 |
| 7.2.1 供试材料 | 第94-95页 |
| 7.2.2 试验设计 | 第95页 |
| 7.2.3 全磷浓度的测定 | 第95页 |
| 7.2.4 cDNA文库的建立 | 第95页 |
| 7.2.5 SgSPX1与SgPT1全长克隆和序列分析 | 第95页 |
| 7.2.6 实时荧光定量PCR分析基因表达量 | 第95-96页 |
| 7.2.7 数据统计分析 | 第96页 |
| 7.3 结果与分析 | 第96-104页 |
| 7.3.1 不同磷处理对柱花草磷浓度的影响 | 第96-97页 |
| 7.3.2 柱花草SgPT1和SgSPX1的同源克隆 | 第97-98页 |
| 7.3.3 SgPT1和SgSPX1的生物信息学分析 | 第98-104页 |
| 7.3.4 不同磷水平对SgPT1和SgSPX1表达量的影响 | 第104页 |
| 7.4 讨论 | 第104-106页 |
| 7.5 小结 | 第106-107页 |
| 第八章 创新点、综合结论与研究展望 | 第107-112页 |
| 8.1 创新点 | 第107页 |
| 8.2 综合结论 | 第107-108页 |
| 8.3 研究展望 | 第108-112页 |
| 致谢 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-139页 |
| 附录 | 第139-143页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第143-144页 |
