摘要 | 第9-14页 |
ABSTRACT | 第14页 |
1 前言 | 第20-44页 |
1.1 赤潮及其危害性 | 第20-23页 |
1.2 赤潮发生原因及研究进展 | 第23-26页 |
1.2.1 生物因素 | 第23-24页 |
1.2.2 化学因素 | 第24-26页 |
1.2.3 物理因素 | 第26页 |
1.3 赤潮防治技术及研究进展 | 第26-33页 |
1.3.1 物理方法 | 第27-28页 |
1.3.2 化学方法 | 第28-29页 |
1.3.3 生物方法 | 第29页 |
1.3.4 赤潮防治技术的研究进展 | 第29-33页 |
1.4 亚历山大藻赤潮的危害性 | 第33-36页 |
1.4.1 产毒亚历山大藻的毒害机理 | 第34-36页 |
1.4.2 亚历山大藻的防治 | 第36页 |
1.5 差异蛋白质组学研究及其在海洋生物中的应用 | 第36-44页 |
1.5.1 蛋白质组学研究的背景及意义 | 第36-37页 |
1.5.2 差异蛋白质组学研究 | 第37-39页 |
1.5.3 常用的差异蛋白质组学研究方法 | 第39-42页 |
1.5.4 差异蛋白质组学在海洋生物中的应用 | 第42-44页 |
2 氮、磷、铁、锰对亚历山大藻LC3生长的影响 | 第44-52页 |
2.1 材料和方法 | 第44-47页 |
2.1.1 实验材料 | 第44-45页 |
2.1.2 培养基 | 第45-46页 |
2.1.3 培养条件 | 第46页 |
2.1.4 正交表设计 | 第46页 |
2.1.5 生长测定 | 第46-47页 |
2.2 结果与讨论 | 第47-51页 |
2.2.1 氮、磷、铁、锰对亚历山大藻LC3生长速率的影响 | 第47-49页 |
2.2.2 讨论 | 第49-51页 |
2.3 结语 | 第51-52页 |
3 不同杀灭剂对亚历山大藻LC3灭除的初步研究 | 第52-61页 |
3.1 材料和方法 | 第53-54页 |
3.1.1 实验材料 | 第53页 |
3.1.2 藻细胞计数方法 | 第53页 |
3.1.3 不同浓度辣椒素灭杀亚历山大藻LC3的测定 | 第53页 |
3.1.4 不同浓度过碳酸钠灭杀亚历山大藻LC3的测定 | 第53-54页 |
3.1.5 硫酸铜、谷氨酸铜对亚历山大藻LC3灭杀对比 | 第54页 |
3.1.6 谷氨酸铜浓度对亚历山大藻LC3存活率的影响 | 第54页 |
3.1.7 复合作用下HDTMAB浓度对亚历山大藻LC3存活率的影响 | 第54页 |
3.2 结果 | 第54-58页 |
3.2.1 不同浓度辣椒素对亚历山大藻LC3的杀灭结果 | 第55页 |
3.2.2 不同浓度过碳酸钠对亚历山大藻LC3的杀灭结果 | 第55-56页 |
3.2.3 硫酸铜、谷氨酸铜杀灭亚历山大藻LC3对比试验结果 | 第56页 |
3.2.4 不同浓度谷氨酸铜对亚历山大藻LC3的杀灭结果 | 第56-57页 |
3.2.5 复合作用下HDTMAB浓度对谷氨酸铜杀灭亚历山大藻LC3的影响 | 第57-58页 |
3.3 讨论 | 第58-60页 |
3.3.1 辣椒素及过碳酸钠对亚历山大藻LC3的灭除 | 第58-59页 |
3.3.2 谷氨酸铜对亚历山大藻LC3的灭除 | 第59-60页 |
3.3.3 HDTMAB对谷氨酸铜杀灭亚历山大藻LC3的促进 | 第60页 |
3.4 结语 | 第60-61页 |
4 硫酸铜、谷氨酸铜以及表面活性剂对亚历山大藻LC3形态和超微结构的影响 | 第61-73页 |
4.1 材料和方法 | 第62-63页 |
4.1.1 实验材料 | 第62页 |
4.1.2 不同处理下亚历山大藻LC3的培养 | 第62-63页 |
4.1.3 亚历山大藻LC3细胞形态的扫描电镜观察 | 第63页 |
4.1.4 亚历山大藻LC3细胞超微结构的透射电镜观察 | 第63页 |
4.2 结果 | 第63-69页 |
4.2.1 无胁迫时亚历山大藻LC3的细胞形态及超微结构 | 第63-64页 |
4.2.2 谷氨酸铜胁迫对亚历山大藻LC3细胞形态及超微结构的影响 | 第64-66页 |
4.2.3 谷氨酸铜和HDTMAB协同胁迫对亚历山大藻LC3细胞形态及超微结构的影响 | 第66-67页 |
4.2.4 HDTMAB胁迫对藻细胞形态及超微结构的影响 | 第67-68页 |
4.2.5 硫酸铜胁迫对藻细胞形态及超微结构的影响 | 第68-69页 |
4.3 讨论 | 第69-72页 |
4.3.1 胁迫对亚历山大藻LC3质膜的损伤 | 第69-70页 |
4.3.2 胁迫对亚历山大藻LC3叶绿体及线粒体的损伤 | 第70-71页 |
4.3.3 亚历山大藻LC3对胁迫毒性的响应 | 第71-72页 |
4.4 结语 | 第72-73页 |
5 谷氨酸铜和表面活性剂协同灭除亚历山大藻LC3机制的初步研究 | 第73-82页 |
5.1 材料和方法 | 第74-75页 |
5.1.1 实验材料 | 第74页 |
5.1.2 谷氨酸铜对亚历山大藻LC3细胞丙二醛、巯基含量及质膜透性影响的测定 | 第74页 |
5.1.3 复合作用下HDTMAB浓度对亚历山大藻LC3细胞丙二醛、巯基含量及质膜透性影响的测定 | 第74-75页 |
5.1.4 TBA法测定丙二醛(MDA)含量 | 第75页 |
5.1.5 DTNB显色法测定巯基含量 | 第75页 |
5.1.6 电导法测定细胞质膜透性 | 第75页 |
5.2 结果 | 第75-78页 |
5.2.1 谷氨酸铜胁迫对亚历山大藻LC3细胞中丙二醛、巯基含量及细胞膜透性的影响 | 第75-76页 |
5.2.2 复合作用下不同浓度HDTMAB对丙二醛、巯基含量及细胞膜透性的影响 | 第76-78页 |
5.3 讨论 | 第78-80页 |
5.3.1 谷氨酸铜对亚历山大藻LC3细胞生理活性的影响 | 第78-80页 |
5.3.2 复合作用下HDTMAB浓度对亚历山大藻LC3细胞生理活性的影响 | 第80页 |
5.4 结语 | 第80-82页 |
6 外源Ca~(2+)对HDTMAB杀灭亚历山大藻LC3效果的影响及其机制初步研究 | 第82-89页 |
6.1 材料和方法 | 第82-83页 |
6.1.1 实验材料 | 第82-83页 |
6.1.2 复合作用下Ca~(2+)浓度对亚历山大藻LC3存活率影响的测定 | 第83页 |
6.1.3 复合作用下Ca~(2+)浓度对亚历山大藻LC3细胞丙二醛、巯基含量及质膜透性影响的测定 | 第83页 |
6.2 结果 | 第83-86页 |
6.2.1 不同浓度Ca~(2+)对HDTMAB杀灭亚历山大藻LC3的影响 | 第83-84页 |
6.2.2 复合作用下浓度Ca~(2+)对亚历山大藻LC3细胞丙二醛含量的影响 | 第84页 |
6.2.3 复合作用下浓度Ca~(2+)对亚历山大藻LC3细胞巯基含量的影响 | 第84-86页 |
6.2.4 复合作用下浓度Ca~(2+)对亚历山大藻LC3细胞质膜透性的影响 | 第86页 |
6.3 讨论 | 第86-87页 |
6.4 结语 | 第87-89页 |
7 亚历山大藻LC3蛋白质组双向电泳图谱的构建 | 第89-97页 |
7.1 材料和方法 | 第89-92页 |
7.1.1 实验材料 | 第90页 |
7.1.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白样品制备 | 第90页 |
7.1.3 双向凝胶电泳蛋白样品的提取和定量 | 第90-91页 |
7.1.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离 | 第91页 |
7.1.5 双向凝胶电泳分离 | 第91-92页 |
7.1.6 染色 | 第92页 |
7.1.7 图像分析及数据处理 | 第92页 |
7.2 结果 | 第92-93页 |
7.2.1 亚历山大藻LC3细胞可溶性蛋白质SDS-PAGE结果 | 第92页 |
7.2.2 亚历山大藻LC3细胞可溶性蛋白质双向电泳结果 | 第92-93页 |
7.3 讨论 | 第93-96页 |
7.3.1 亚历山大藻LC3细胞破碎 | 第93-95页 |
7.3.2 亚历山大藻LC3双向电泳样品溶解缓冲液 | 第95页 |
7.3.3 亚历山大藻LC3双向电泳样品浓缩及脱盐 | 第95-96页 |
7.4 结语 | 第96-97页 |
8 利用SDS-PAGE和双向电泳技术进行谷氨酸铜灭除亚历山大藻LC3的机制研究 | 第97-106页 |
8.1 材料和方法 | 第97-98页 |
8.1.1 实验材料 | 第97-98页 |
8.1.2 藻种处理及蛋白提取、电泳分离 | 第98页 |
8.2 结果 | 第98-101页 |
8.2.1 复合作用下HDTMAB浓度对亚历山大藻LC3蛋白表达影响的SDS-PAGE结果 | 第98-99页 |
8.2.2 谷氨酸铜对亚历山大藻LC3细胞蛋白表达影响的双向电泳结果 | 第99-101页 |
8.3 讨论 | 第101-105页 |
8.3.1 复合作用下HDTMAB对亚历山大藻LC3蛋白表达的影响 | 第101-103页 |
8.3.2 谷氨酸铜对亚历山大藻LC3蛋白表达的影响 | 第103-105页 |
8.4 结语 | 第105-106页 |
9 亚历山大藻LC3蛋白质双向电泳差异蛋白肽质量指纹图谱分析与鉴定 | 第106-116页 |
9.1 材料和方法 | 第107-108页 |
9.1.1 实验材料 | 第107页 |
9.1.2 质谱样品的制备 | 第107-108页 |
9.1.3 质谱样品分析 | 第108页 |
9.1.4 数据库查询 | 第108页 |
9.2 结果 | 第108-110页 |
9.3 讨论 | 第110-114页 |
9.3.1 谷氨酸铜胁迫下1,5-二磷酸核酮糖羧化酶表达的抑制 | 第110-113页 |
9.3.2 谷氨酸铜胁迫下RNA聚合酶表达的抑制 | 第113-114页 |
9.3.3 谷氨酸铜胁迫下新蛋白的表达 | 第114页 |
9.4 结语 | 第114-116页 |
10 结论 | 第116-121页 |
10.1 氮、磷、铁、锰对亚历山大藻LC3生长均有促进作用 | 第116页 |
10.2 谷氨酸铜和HDTMAB可有效杀灭亚历山大藻LC3 | 第116-117页 |
10.3 亚历山大藻LC3形态和超微结构在硫酸铜、谷氨酸铜以及表面活性剂等胁迫下发生变化 | 第117页 |
10.4 谷氨酸铜和表面活性剂作用下亚历山大藻LC3膜透性、丙二醛及巯基含量发生变化 | 第117-118页 |
10.5 外源Ca~(2+)对HDTMAB杀灭亚历山大藻LC3的抑制及其机制 | 第118页 |
10.6 通过利用pH 3.0~10.0及pH 3.0~5.6的IPG预制胶条构建亚历山大藻LC3蛋白质组双向电泳图谱 | 第118-119页 |
10.7 利用SDS-PAGE和双向电泳技术研究谷氨酸铜灭除亚历山大藻LC3的机制 | 第119页 |
10.8 谷氨酸铜胁迫下亚历山大藻LC3蛋白质双向电泳差异蛋白肽质量指纹图谱分析与鉴定 | 第119-121页 |
参考文献 | 第121-142页 |
致谢 | 第142-143页 |
附录 | 第143页 |