| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 引言 | 第11-26页 |
| ·大肠杆菌不耐热肠毒素 | 第11-17页 |
| ·LT 的基因与分子结构 | 第11-14页 |
| ·LT 的性质 | 第14页 |
| ·LT 的功能 | 第14-17页 |
| ·妊娠免疫调控 | 第17-21页 |
| ·妊娠期间母体免疫系统特点 | 第17-18页 |
| ·母胎界面免疫活性细胞的免疫调节作用 | 第18-19页 |
| ·母胎界面的Th1 和Th2 型细胞因子免疫调节作用 | 第19-20页 |
| ·母胎界面的IL-1β免疫调节作用 | 第20-21页 |
| ·炎性体 | 第21-26页 |
| ·炎性体的结构与功能 | 第21-23页 |
| ·炎性体的活化信号机制 | 第23-26页 |
| 2 实验一 重组大肠杆菌不耐热肠毒素的制备及活性鉴定 | 第26-45页 |
| ·材料 | 第26-29页 |
| ·菌株、载体和细胞 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·培养基及溶液的配制 | 第27-29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-38页 |
| ·LTA、LTA63 和LTB 基因的PCR 扩增 | 第29-31页 |
| ·LTA、LTAK63 和LTB 基因原核表达载体的构建 | 第31-33页 |
| ·LTA、LTAK63 和LTB 在原核细胞中的表达 | 第33-36页 |
| ·重组 LT 蛋白的活性鉴定 | 第36-38页 |
| ·结果 | 第38-42页 |
| ·LTA、LTAK63 和LTB 基因的扩增与克隆 | 第38页 |
| ·LTA、LTAK63 和LTB 原核表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·LTA、LTAK63 和LTB 基因的序列测定与分析 | 第39页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 检测 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白的Western-blot 鉴定 | 第40页 |
| ·重组蛋白的纯化鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白LTB 与 GM1 结合实验分析 | 第41页 |
| ·细胞毒性试验分析 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 3 实验二 大肠杆菌不耐热肠毒素对小鼠胚胎稳定性的影响 | 第45-58页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·实验动物 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·培养基和试剂的配制 | 第45-46页 |
| ·主要设备 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-49页 |
| ·ICR 小鼠的超排处理 | 第46页 |
| ·LT 处理妊娠小鼠 | 第46-47页 |
| ·胚胎存活率的计算 | 第47页 |
| ·试验采样 | 第47页 |
| ·细胞因子含量的测定 | 第47-48页 |
| ·巨噬细胞，CD4~+T，CD8~+T 淋巴细胞的检测 | 第48页 |
| ·小鼠2-细胞胚胎的采集和培养 | 第48-49页 |
| ·统计处理 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-52页 |
| ·LT 对小鼠胚胎存活率的影响 | 第49页 |
| ·LT 对妊娠小鼠子宫匀浆液中 Th1/Th2 型细胞因子的影响 | 第49-50页 |
| ·LT 对妊娠小鼠子宫匀浆液中 IL-1β影响 | 第50页 |
| ·LT 对妊娠小鼠子宫胎盘组织 CD4~+T，CD8~+T 淋巴细胞的影响 | 第50-51页 |
| ·LT 对妊娠小鼠巨噬细胞的影响 | 第51页 |
| ·LT、LTK63 对体外培养的小鼠早期胚胎发育的影响 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-57页 |
| ·LT 对小鼠胚胎存活率的影响 | 第52-53页 |
| ·LT 对妊娠小鼠 Thl /Th2 型反应的动态平衡的影响 | 第53-54页 |
| ·LT 对妊娠小鼠 IL-1β的影响 | 第54-55页 |
| ·LT 对妊娠小鼠免疫活性细胞的影响 | 第55页 |
| ·LT 对小鼠早期胚胎体外发育的影响 | 第55-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 4 实验三 大肠杆菌不耐热肠毒素激活巨噬细胞炎性体的研究 | 第58-64页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·重组蛋白和试剂 | 第58页 |
| ·细胞 | 第58页 |
| ·培养基及溶液的配置 | 第58-59页 |
| ·方法 | 第59页 |
| ·LT 对野生型小鼠巨噬细胞(86 细胞)的刺激 | 第59页 |
| ·LT 对N3/KO 细胞和Casp1/KO 细胞的刺激 | 第59页 |
| ·结果 | 第59-61页 |
| ·LT 对炎性体的激活作用 | 第59-60页 |
| ·LTA、LTB 对炎性体的激活作用 | 第60-61页 |
| ·LT 通过激活炎性体NLRP3 和caspase-1 促使 IL-1β的成熟和释放 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 附录 | 第73-77页 |
| 作者简介 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
