| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-36页 |
| 1.1 microRNA研究概况 | 第12页 |
| 1.2 miRNA在生物体内的合成 | 第12-14页 |
| 1.2.1 miRNA前体的转录 | 第12-13页 |
| 1.2.2 miRNA前体的加工与RSIC复合体的形成 | 第13-14页 |
| 1.3 miRNA对靶基因的调控机制 | 第14-18页 |
| 1.4 植物miRNA的生物学功能 | 第18-24页 |
| 1.4.1 miRNA对根发育的影响 | 第18页 |
| 1.4.2 miRNA对茎发育的影响 | 第18页 |
| 1.4.3 miRNA对叶发育的影响 | 第18-19页 |
| 1.4.4 miRNA对花器官发育的影响 | 第19-20页 |
| 1.4.5 miRNA对种子发育及种子萌发的影响 | 第20-23页 |
| 1.4.6 miRNA与逆境胁迫 | 第23-24页 |
| 1.5 长片段非编码RNA研究进展 | 第24-29页 |
| 1.5.1 lncRNA的来源、转录与分类 | 第25页 |
| 1.5.2 lncRNA的作用机制 | 第25-28页 |
| 1.5.3 lncRNA与植物的生长发育 | 第28-29页 |
| 1.6 小麦种子的休眠与萌发 | 第29-32页 |
| 1.6.1 影响小麦种子休眠与萌发的QTL与基因 | 第30页 |
| 1.6.2 植物激素GA和ABA对小麦种子休眠与萌发的影响 | 第30-31页 |
| 1.6.3 环境因素对小麦种子休眠与萌发的影响 | 第31-32页 |
| 1.7 miR021b研究进展 | 第32-34页 |
| 1.8 立论依据、研究目标及研究内容 | 第34-36页 |
| 第二章 miR021b表达模式及其上游调控因子研究 | 第36-61页 |
| 2.1 材料与方法 | 第36-51页 |
| 2.1.1 供试材料与取材 | 第36页 |
| 2.1.2 DNA提取 | 第36页 |
| 2.1.3 RNA提取与反转录qPCR | 第36-38页 |
| 2.1.4 pri-miR021b-7D启动子的克隆、载体构建与小麦转化 | 第38-44页 |
| 2.1.5 TaVP1、TaABF、TaABI5蛋白与pri-miR021b-7D启动子区顺式作用元件体外结合实验 | 第44-49页 |
| 2.1.6 TaVP1、TaABF、TaABI5与pri-miR021b-7D:GFP-GUS小麦幼胚瞬时表达 | 第49-51页 |
| 2.2 结果与分析 | 第51-59页 |
| 2.2.1 miR021b的前体与成熟miR021b在种子发育和萌发过程中的表达模式 | 第51-53页 |
| 2.2.2 pri-miR021b- 7D启动子的克隆与表达分析 | 第53-54页 |
| 2.2.3 ABA响应转录因子促进miR021b的表达 | 第54-58页 |
| 2.2.4 ABA能够诱导Ta VP1、TaABF、TaABI5和miR021b的表达 | 第58-59页 |
| 2.3 讨论 | 第59-61页 |
| 第三章 miR021b靶基因的表达模式及miR021b对其调控作用 | 第61-70页 |
| 3.1 材料与方法 | 第61-64页 |
| 3.1.1 供试材料与取材 | 第61页 |
| 3.1.2 5'RACE和3'RACE | 第61-63页 |
| 3.1.3 DNA、RNA提取与反转录qPCR | 第63-64页 |
| 3.1.4 染色体定位引物、qPCR引物序列 | 第64页 |
| 3.1.5 pre-miR021b RNA折叠结构分析 | 第64页 |
| 3.1.6 小RNA数据分析 | 第64页 |
| 3.2 结果与分析 | 第64-69页 |
| 3.2.1 RNA连接酶介导的5'RACE证明miR021b对Contig35990的切割作用 | 第64-65页 |
| 3.2.2 Contig35990 cDNA全长的获得及序列分析 | 第65-66页 |
| 3.2.3 LNCR表达模式分析 | 第66-67页 |
| 3.2.4 miR021b切割LNCR介导产生次级小RNA | 第67-69页 |
| 3.3 讨论 | 第69-70页 |
| 第四章 miR021b生物学功能及调控网络解析 | 第70-90页 |
| 4.1 材料与方法 | 第70-74页 |
| 4.1.1 供试材料与取材 | 第70页 |
| 4.1.2 小麦幼胚瞬时表达 | 第70-72页 |
| 4.1.3 小麦种子萌发率与穗发芽检测 | 第72页 |
| 4.1.4 切片制备与显微观察 | 第72页 |
| 4.1.5 DNA提取、RNA提取与反转录qPCR | 第72-74页 |
| 4.1.6 转录组测序与分析 | 第74页 |
| 4.1.7 小RNA靶基因的预测 | 第74页 |
| 4.2 结果与分析 | 第74-88页 |
| 4.2.1 miR021b与ta-siRNA负向调控小麦幼胚的萌发 | 第74-78页 |
| 4.2.2 miR021b、LNCR、ta-siRNA表达水平与不同小麦品系种子萌发率的关系 | 第78-79页 |
| 4.2.3 超表达miR021b转基因小麦的获得与表型鉴定 | 第79-81页 |
| 4.2.4 ta-siRNA调控下游目标基因的预测与分析 | 第81-82页 |
| 4.2.5 miR021b影响了种子中GA的合成 | 第82-85页 |
| 4.2.6 转基因与野生型种子吸水1小时、6小时转录组差异表达谱分析 | 第85-88页 |
| 4.3 讨论 | 第88-90页 |
| 第五章 结论 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 附录 | 第108-147页 |
| 作者简介 | 第147页 |
