透明化大尺度生物组织快速免疫染色方法研究
| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-22页 |
| 1.1 引言 | 第10-11页 |
| 1.2 大尺度生物组织透明技术 | 第11-17页 |
| 1.2.1 Scale透明化技术 | 第12-13页 |
| 1.2.2 3DISCO透明化技术 | 第13-14页 |
| 1.2.3 SeeDB透明化技术 | 第14-15页 |
| 1.2.4 CUBIC组织透明化技术 | 第15-16页 |
| 1.2.5 CLARITY组织透明化技术 | 第16-17页 |
| 1.3 大尺度生物组织快速染色技术 | 第17-21页 |
| 1.3.1 基于冻融法的快速免疫染色 | 第18页 |
| 1.3.2 基于化学标签的快速染色 | 第18-20页 |
| 1.3.3 iDISCO染色法 | 第20-21页 |
| 1.4 本文主要内容及相关章节安排 | 第21-22页 |
| 第二章 CLARITY技术的实现 | 第22-37页 |
| 2.1 CLARITY技术的原理及关键步骤 | 第22-26页 |
| 2.1.1 水凝胶的交联保护 | 第22-23页 |
| 2.1.2 脂质的去除 | 第23-25页 |
| 2.1.3 折射率的匹配 | 第25-26页 |
| 2.2 小鼠脑的透明化处理及标记 | 第26-28页 |
| 2.2.1 小鼠脑的透明化处理 | 第26-28页 |
| 2.2.1.1 水凝胶单体溶液的制备 | 第26页 |
| 2.2.1.2 心脏灌流及水凝胶单体孵育 | 第26-27页 |
| 2.2.1.3 脱气与交联 | 第27页 |
| 2.2.1.4 切片与去脂 | 第27-28页 |
| 2.2.2 免疫染色 | 第28页 |
| 2.3 小鼠脑及其他组织的成像 | 第28-34页 |
| 2.3.1 组织成像前处理 | 第28页 |
| 2.3.2 小鼠脑组织成像流程 | 第28-29页 |
| 2.3.3 小鼠脑组织成像结果 | 第29-30页 |
| 2.3.4 其他组织成像结果 | 第30-34页 |
| 2.3.4.1 Thy1-YFP小鼠肝组织成像 | 第30-32页 |
| 2.3.4.2 Thy1-YFP小鼠胃组织成像 | 第32-34页 |
| 2.4 CLARITY技术中遇到的问题 | 第34-36页 |
| 2.4.1 成像的深度误差 | 第34-35页 |
| 2.4.2 抗体标记不均匀 | 第35-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 抗体分子组织凝胶复合物中的扩散过程研究 | 第37-49页 |
| 3.1 一维扩散系统的搭建 | 第37-41页 |
| 3.1.1 小鼠脑片的装载 | 第37-39页 |
| 3.1.2 抗体的准备 | 第39-41页 |
| 3.1.2.1 抗体的稀释 | 第39页 |
| 3.1.2.2 Fab的制作 | 第39-41页 |
| 3.2 扩散数据的获得 | 第41-46页 |
| 3.2.1 扩散过程实时成像 | 第41-42页 |
| 3.2.2 扩散信息的提取 | 第42-46页 |
| 3.3 扩散数据的拟合与分析 | 第46-48页 |
| 3.3.1 扩散数据拟合 | 第46-47页 |
| 3.3.2 扩散系数比较与分析 | 第47-48页 |
| 3.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 基于电场的快速标记 | 第49-56页 |
| 4.1 电场加速实验 | 第49-52页 |
| 4.1.1 电场的实现 | 第49-51页 |
| 4.1.2 电场加速抗体分子运动测试 | 第51-52页 |
| 4.1.2.1 实验流程 | 第51页 |
| 4.1.2.2 实验结果 | 第51-52页 |
| 4.2 基于电场的免疫染色 | 第52-55页 |
| 4.2.1 实验流程 | 第52-53页 |
| 4.2.2 实验结果及分析 | 第53-55页 |
| 4.3 本章小结 | 第55-56页 |
| 第五章 结论与展望 | 第56-57页 |
| 5.1 结论 | 第56页 |
| 5.2 展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 攻读学位期间学术成果 | 第60-63页 |
| 附件 | 第63页 |
