| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 研究背景 | 第13-31页 |
| 1 食管癌和协同刺激分子概述 | 第14-16页 |
| 2 协同刺激分子B7-H1和肿瘤免疫 | 第16-18页 |
| 2.1 B7-H1/PD-1 的定位、表达及其在肿瘤免疫应答中的作用 | 第16-17页 |
| 2.2 肿瘤细胞表达B7-H1与EMT的关系及潜在作用机制 | 第17-18页 |
| 2.3 PD-1/B7-H1逆向信号在肿瘤细胞抗凋亡及肿瘤细胞EMT中的作用 | 第18页 |
| 3 协同刺激分子B7-H3和肿瘤免疫 | 第18-23页 |
| 3.1 B7-H3的定位、结构、表达及其生物学功能 | 第18-20页 |
| 3.2 B7-H3 在肿瘤中表达的临床意义及其对肿瘤微环境中免疫细胞亚群的影响 | 第20-21页 |
| 3.3 干预肿瘤细胞 B7-H3 信号对肿瘤细胞生物学行为的影响 | 第21-23页 |
| 参考文献 | 第23-31页 |
| 第一部分 协同刺激分子B7-H1在食管癌组织中表达的 临床意义及作用研究 | 第31-46页 |
| 1 主要试剂、材料与仪器设备 | 第31-32页 |
| 1.1 试剂 | 第31-32页 |
| 1.2 病例 | 第32页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第32页 |
| 2 实验方法 | 第32-34页 |
| 2.1 细胞培养 | 第32页 |
| 2.2 流式细胞术检测及分析 | 第32-33页 |
| 2.3 组织芯片制备 | 第33页 |
| 2.4 Bench Marker全自动免疫组化仪检测B7-H1的表达 | 第33页 |
| 2.5 E-cadherin及Vimentin免疫组织化学染色 | 第33页 |
| 2.6 B7-H1、E-cadherin及Vimentin免疫组织化学染色结果评估 | 第33-34页 |
| 2.7 统计学处理 | 第34页 |
| 3 结果 | 第34-40页 |
| 3.1 B7-H1在食管癌组织、食管正常组织中的表达 | 第34页 |
| 3.2 B7-H1在食管癌组织中的表达水平和患者临床参数的关系 | 第34-35页 |
| 3.3 B7-H1在食管癌组织中的表达水平与患者预后的关系 | 第35-36页 |
| 3.4 B7-H1在食管癌细胞核内的表达与患者临床参数及预后的关系 | 第36-37页 |
| 3.5 E-cadherin 和 Vimentin 在食管癌组织中表达水平和患者临床参数的关系 | 第37页 |
| 3.6 EMT 在食管癌组织中的发生情况与患者临床参数的关系 | 第37-38页 |
| 3.7 EMT在食管癌组织中的发生情况与患者预后的关系 | 第38-39页 |
| 3.8 食管癌组中EMT发生对B7-H1表达水平的影响 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 第二部分 协同刺激分子B7-H3在食管癌组织中表达的临床意义及作用研究 | 第46-66页 |
| 1 主要试剂、材料与仪器设备 | 第47-48页 |
| 1.1 试剂 | 第47页 |
| 1.2 病例 | 第47-48页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第48页 |
| 2 实验方法 | 第48-56页 |
| 2.1 流式细胞术检测及分析 | 第48页 |
| 2.2 B7-H3及CD3免疫组织化学染色 | 第48-49页 |
| 2.3 B7-H3及CD3免疫组织化学染色结果评估 | 第49页 |
| 2.4 B7-H3-si RNA慢病毒载体构建及相关试剂 | 第49-50页 |
| 2.5 目的细胞慢病毒感染 | 第50页 |
| 2.6 流式分选 | 第50页 |
| 2.7 总RNA抽提 | 第50-51页 |
| 2.8 cDNA合成 | 第51页 |
| 2.9 cDNA目的片段克隆 | 第51页 |
| 2.10 荧光定量PCR检测细胞株中B7-H3表达水平 | 第51-52页 |
| 2.11 Western blot检测 | 第52-54页 |
| 2.12 CCK-8 检测细胞增殖 | 第54-55页 |
| 2.13 克隆形成实验 | 第55页 |
| 2.14 划痕实验 | 第55页 |
| 2.15 Transwell侵袭实验 | 第55-56页 |
| 2.16 统计学处理 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-62页 |
| 3.1 B7-H3在人食管癌细胞株中的表达 | 第56-57页 |
| 3.2 B7-H3在食管癌组织、食管正常组织中的表达 | 第57页 |
| 3.3 B7-H3在食管癌组织中表达水平的临床相关性 | 第57-58页 |
| 3.4 B7-H3在食管癌组织中的表达水平与患者预后的关系 | 第58-59页 |
| 3.5 稳定转染慢病毒载体的人食管癌细胞株Eca-109的鉴定 | 第59页 |
| 3.6 m RNA及蛋白水平检测稳定转染细胞株中B7-H3的表达 | 第59-60页 |
| 3.7 CCK-8 实验比较各稳定转染细胞株的增殖能力 | 第60页 |
| 3.8 克隆形成试验比较各组稳定转染株克隆形成能力 | 第60-61页 |
| 3.9 划痕法测定B7-H3对食管癌细胞迁移能力的影响 | 第61-62页 |
| 3.10 Transwell法测定B7-H3对食管癌细胞侵袭转移能力的影响 | 第62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-66页 |
| 第三部分 转录因子T-BET在胃癌组织中的表达及其与预后的关系 | 第66-85页 |
| 1 材料 | 第68-69页 |
| 1.1 标本收集及临床资料 | 第68页 |
| 1.2 实验试剂 | 第68-69页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第69页 |
| 2 实验方法 | 第69-71页 |
| 2.1 免疫组织化学染色步骤 | 第69页 |
| 2.2 免疫组化染色结果判断标准 | 第69-70页 |
| 2.3 胃癌浸润TILs的分离 | 第70页 |
| 2.4 抗体标记及流式检测 | 第70页 |
| 2.5 统计学处理 | 第70-71页 |
| 3 结果 | 第71-75页 |
| 3.1 T-bet阳性淋巴细胞在胃炎、胃息肉、胃癌及癌旁正常组织中的浸润 | 第71-72页 |
| 3.2 胃癌组织中T-bet阳性淋巴细胞的浸润与患者临床病理参数的关系 | 第72-73页 |
| 3.3 T-bet表达与生存期的关系 | 第73页 |
| 3.4 胃癌生存期的COX多因素分析 | 第73-74页 |
| 3.5 T-bet+淋巴细胞在外周血中的亚群分析 | 第74页 |
| 3.6 胃癌及癌旁正常组织中T-bet+浸润淋巴细胞的亚群分析 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 总结和展望 | 第85-87页 |
| 1 总结 | 第85-86页 |
| 2 展望 | 第86-87页 |
| 综述 | 第87-101页 |
| 参考文献 | 第95-101页 |
| 本研究所获的基金资助 | 第101-102页 |
| 攻读博士学位期间公开发表的论文 | 第102-104页 |
| 缩写词表 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
