| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 引用缩写符号说明 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 马腺疫概述 | 第9-10页 |
| 1.2 马链球菌马亚种的病原学 | 第10页 |
| 1.3 马链球菌马亚种致病因素 | 第10-12页 |
| 1.4 马链球菌马亚种的流行病学 | 第12页 |
| 1.5 临床症状 | 第12-13页 |
| 1.5.1 一过型腺疫 | 第12页 |
| 1.5.2 典型腺疫 | 第12-13页 |
| 1.5.3 恶性型腺疫 | 第13页 |
| 1.6 实验室诊断 | 第13-14页 |
| 1.6.1 血液生理生化指标检测 | 第13页 |
| 1.6.2 致病菌的分离与鉴定 | 第13-14页 |
| 1.6.3 PCR检测 | 第14页 |
| 1.6.4 血清学检测 | 第14页 |
| 1.7 马链球菌马亚种疫苗的研究 | 第14-16页 |
| 1.7.1 灭活疫苗 | 第15页 |
| 1.7.2 提取物疫苗 | 第15页 |
| 1.7.3 弱毒疫苗 | 第15-16页 |
| 1.7.4 亚单位疫苗 | 第16页 |
| 1.8 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 2 马链球菌马亚种SeM蛋白的原核表达和鉴定 | 第17-27页 |
| 2.1 材料 | 第17页 |
| 2.1.1 菌株、质粒和血清 | 第17页 |
| 2.1.2 酶和主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第17页 |
| 2.2 方法 | 第17-22页 |
| 2.2.1 引物的设计与合成 | 第17-18页 |
| 2.2.2 马链球菌马亚种DNA的提取 | 第18页 |
| 2.2.3 SeM基因的扩增 | 第18页 |
| 2.2.4 PCR产物的回收 | 第18页 |
| 2.2.5 重组质粒pGEX-6p1SeM的构建 | 第18-20页 |
| 2.2.6 目的蛋白的诱导表达 | 第20-21页 |
| 2.2.7 蛋白样品的超声破碎 | 第21页 |
| 2.2.8 SDS-PAGE电泳 | 第21页 |
| 2.2.9 重组蛋白的纯化 | 第21页 |
| 2.2.10 重组蛋白的Western blotting鉴定 | 第21-22页 |
| 2.3 结果 | 第22-25页 |
| 2.3.1 SeM基因PCR扩增结果 | 第22页 |
| 2.3.2 pGEX-6p1SeM重组质粒的构建及鉴定 | 第22-23页 |
| 2.3.3 重组蛋白SeM的表达 | 第23-24页 |
| 2.3.4 目的蛋白的纯化 | 第24-25页 |
| 2.3.5 重组蛋白的Western Blotting鉴定结果 | 第25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-27页 |
| 3 间接ELISA方法的建立与应用 | 第27-37页 |
| 3.1 材料 | 第27页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第27页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第27页 |
| 3.1.3 抗原 | 第27页 |
| 3.1.4 血清 | 第27页 |
| 3.2 方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 重组抗原间接ELISA方法的建立 | 第27-29页 |
| 3.2.2 临界值的确定 | 第29页 |
| 3.2.3 特异性试验 | 第29页 |
| 3.2.4 对比试验 | 第29页 |
| 3.3 结果 | 第29-32页 |
| 3.3.1 抗原包被的最适浓度和最佳的血清工作浓度的确定 | 第29-30页 |
| 3.3.2 最佳包被条件的确定 | 第30页 |
| 3.3.3 最佳封闭液的确定 | 第30页 |
| 3.3.4 最佳血清稀释液的确定 | 第30-31页 |
| 3.3.5 酶标抗体最适的工作浓度的确定 | 第31页 |
| 3.3.6 最佳显色条件的确定 | 第31-32页 |
| 3.4 临界值的确定 | 第32-33页 |
| 3.5 特异性试验 | 第33页 |
| 3.6 重复性试验 | 第33-34页 |
| 3.7 对比试验 | 第34-35页 |
| 3.8 讨论 | 第35-37页 |
| 4 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 致谢 | 第42-44页 |
| 个人简历 | 第44页 |
