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多孔矿化水凝胶材料诱导人胚胎干细胞成骨分化的研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
中英文缩略词表第10-11页
第一章 绪论第11-32页
    1.1 骨与骨组织工程第11-16页
        1.1.1 骨的组成第11-13页
        1.1.2 骨的生长第13-15页
        1.1.3 骨组织工程概述第15-16页
    1.2 干细胞成骨定向分化的研究第16-22页
        1.2.1 间充质干细胞的成骨定向分化第17-18页
        1.2.2 胚胎干细胞的成骨定向分化第18-20页
        1.2.3 诱导性多能干细胞及其它干细胞的成骨定向分化第20-22页
    1.3 材料调控干细胞成骨分化的研究第22-25页
        1.3.1 细胞外基质对细胞的意义第22-23页
        1.3.2 细胞-材料间相互作用对干细胞的影响第23-24页
        1.3.3 水凝胶材料在干细胞成骨诱导分化中的应用第24-25页
    1.4 本论文研究的意义和主要内容第25-26页
    参考文献第26-32页
第二章 仿生多孔矿化水凝胶支架的制备及表征第32-48页
    2.1 引言第32-33页
    2.2 实验部分第33-37页
        2.2.1 材料与仪器第33-34页
        2.2.2 聚乙二醇二丙烯酸酯(PEGDA)单体的制备及表征第34页
        2.2.3 6-丙烯酰氨基己酸(A6ACA)单体的制备及表征第34页
        2.2.4 PEG-co-A6ACA多孔水凝胶的制备及表征第34-36页
        2.2.5 PEG-co-A6ACA多孔水凝胶的仿生矿化及表征第36-37页
    2.3 结果与讨论第37-45页
        2.3.1 PEGDA单体的表征第37-38页
        2.3.2 A6ACA单体的表征第38-39页
        2.3.3 PEG-co-A6ACA多孔水凝胶的制备及表征第39-43页
        2.3.4 PEG-co-A6ACA多孔水凝胶的仿生矿化及表征第43-45页
    2.4 本章小结第45-46页
    参考文献第46-48页
第三章 仿生多孔矿化水凝胶诱导人胚胎干细胞成骨分化的体外实验研究第48-69页
    3.1 引言第48-49页
    3.2 实验部分第49-60页
        3.2.1 材料与仪器第49-51页
        3.2.2 人胚胎干细胞(hESCs)的培养第51-53页
        3.2.3 hESCs在多孔水凝胶支架上的接种第53-54页
        3.2.4 细胞存活率测定第54页
        3.2.5 细胞DNA含量测定第54-55页
        3.2.6 实时荧光定量PCR检测第55-58页
        3.2.7 免疫组织化学染色分析第58-60页
    3.3 结果与讨论第60-65页
        3.3.1 hESCs在多孔水凝胶支架内的细胞活性第60-61页
        3.3.2 hESCs在多孔水凝胶支架内的细胞增殖第61-62页
        3.3.3 hESCs在多孔水凝胶支架内的成骨基因表达第62-64页
        3.3.4 hESCs-多孔水凝胶复合物的骨钙素染色分析第64-65页
    3.4 本章小结第65-66页
    参考文献第66-69页
第四章 仿生多孔矿化水凝胶诱导人胚胎干细胞成骨分化的体内实验研究第69-88页
    4.1 引言第69页
    4.2 实验部分第69-77页
        4.2.1 材料与仪器第69-71页
        4.2.2 hESCs在多孔水凝胶支架上的接种第71-72页
        4.2.3 hESCs-多孔水凝胶复合物的体内(皮下)埋植实验第72-73页
        4.2.4 影像学观察第73页
        4.2.5 组织化学染色分析第73-77页
    4.3 结果与讨论第77-86页
        4.3.1 成骨分化体内实验条件的选择第77-78页
        4.3.2 体内(皮下)埋植实验结果的形貌观察第78-79页
        4.3.3 hESCs-多孔水凝胶复合物的体内钙化情况第79-81页
        4.3.4 H&E染色分析第81-83页
        4.3.5 成骨分化鉴定(骨钙素染色分析)第83-84页
        4.3.6 成脂分化鉴定(油红-O染色分析)第84-85页
        4.3.7 新生组织的细胞来源鉴定(Lamin B染色分析)第85-86页
    4.4 本章小结第86-87页
    参考文献第87-88页
第五章 人胚胎干细胞和间充质干细胞异位诱导成骨过程的对比研究第88-106页
    5.1 引言第88-89页
    5.2 实验部分第89-94页
        5.2.1 材料与仪器第89-90页
        5.2.2 hESCs和hMSCs的培养第90-91页
        5.2.3 细胞在多孔矿化水凝胶支架上的接种第91页
        5.2.4 细胞活性测定第91页
        5.2.5 体内(皮下)埋植实验第91-92页
        5.2.6 组织化学染色分析第92-94页
    5.3 结果与讨论第94-104页
        5.3.1 细胞-多孔矿化水凝胶复合物的细胞活性第94-95页
        5.3.2 体内(皮下)埋植实验观察第95-96页
        5.3.3 H&E染色分析第96-97页
        5.3.4 骨组织鉴定(OCN、Col I免疫组化染色分析)第97-100页
        5.3.5 软骨组织鉴定(Safranin-O和Col X染色分析)第100-103页
        5.3.6 骨组织的细胞来源鉴定(lamin B染色分析)第103-104页
    5.4 本章小结第104页
    参考文献第104-106页
第六章 全文总结第106-109页
    6.1 全文总结第106-107页
    6.2 创新工作点第107页
    6.3 展望第107-109页
附录A 攻读博士学位期间所发表的学术成果目录第109-110页
致谢第110页

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