摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
中英文缩略词表 | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第11-32页 |
1.1 骨与骨组织工程 | 第11-16页 |
1.1.1 骨的组成 | 第11-13页 |
1.1.2 骨的生长 | 第13-15页 |
1.1.3 骨组织工程概述 | 第15-16页 |
1.2 干细胞成骨定向分化的研究 | 第16-22页 |
1.2.1 间充质干细胞的成骨定向分化 | 第17-18页 |
1.2.2 胚胎干细胞的成骨定向分化 | 第18-20页 |
1.2.3 诱导性多能干细胞及其它干细胞的成骨定向分化 | 第20-22页 |
1.3 材料调控干细胞成骨分化的研究 | 第22-25页 |
1.3.1 细胞外基质对细胞的意义 | 第22-23页 |
1.3.2 细胞-材料间相互作用对干细胞的影响 | 第23-24页 |
1.3.3 水凝胶材料在干细胞成骨诱导分化中的应用 | 第24-25页 |
1.4 本论文研究的意义和主要内容 | 第25-26页 |
参考文献 | 第26-32页 |
第二章 仿生多孔矿化水凝胶支架的制备及表征 | 第32-48页 |
2.1 引言 | 第32-33页 |
2.2 实验部分 | 第33-37页 |
2.2.1 材料与仪器 | 第33-34页 |
2.2.2 聚乙二醇二丙烯酸酯(PEGDA)单体的制备及表征 | 第34页 |
2.2.3 6-丙烯酰氨基己酸(A6ACA)单体的制备及表征 | 第34页 |
2.2.4 PEG-co-A6ACA多孔水凝胶的制备及表征 | 第34-36页 |
2.2.5 PEG-co-A6ACA多孔水凝胶的仿生矿化及表征 | 第36-37页 |
2.3 结果与讨论 | 第37-45页 |
2.3.1 PEGDA单体的表征 | 第37-38页 |
2.3.2 A6ACA单体的表征 | 第38-39页 |
2.3.3 PEG-co-A6ACA多孔水凝胶的制备及表征 | 第39-43页 |
2.3.4 PEG-co-A6ACA多孔水凝胶的仿生矿化及表征 | 第43-45页 |
2.4 本章小结 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-48页 |
第三章 仿生多孔矿化水凝胶诱导人胚胎干细胞成骨分化的体外实验研究 | 第48-69页 |
3.1 引言 | 第48-49页 |
3.2 实验部分 | 第49-60页 |
3.2.1 材料与仪器 | 第49-51页 |
3.2.2 人胚胎干细胞(hESCs)的培养 | 第51-53页 |
3.2.3 hESCs在多孔水凝胶支架上的接种 | 第53-54页 |
3.2.4 细胞存活率测定 | 第54页 |
3.2.5 细胞DNA含量测定 | 第54-55页 |
3.2.6 实时荧光定量PCR检测 | 第55-58页 |
3.2.7 免疫组织化学染色分析 | 第58-60页 |
3.3 结果与讨论 | 第60-65页 |
3.3.1 hESCs在多孔水凝胶支架内的细胞活性 | 第60-61页 |
3.3.2 hESCs在多孔水凝胶支架内的细胞增殖 | 第61-62页 |
3.3.3 hESCs在多孔水凝胶支架内的成骨基因表达 | 第62-64页 |
3.3.4 hESCs-多孔水凝胶复合物的骨钙素染色分析 | 第64-65页 |
3.4 本章小结 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-69页 |
第四章 仿生多孔矿化水凝胶诱导人胚胎干细胞成骨分化的体内实验研究 | 第69-88页 |
4.1 引言 | 第69页 |
4.2 实验部分 | 第69-77页 |
4.2.1 材料与仪器 | 第69-71页 |
4.2.2 hESCs在多孔水凝胶支架上的接种 | 第71-72页 |
4.2.3 hESCs-多孔水凝胶复合物的体内(皮下)埋植实验 | 第72-73页 |
4.2.4 影像学观察 | 第73页 |
4.2.5 组织化学染色分析 | 第73-77页 |
4.3 结果与讨论 | 第77-86页 |
4.3.1 成骨分化体内实验条件的选择 | 第77-78页 |
4.3.2 体内(皮下)埋植实验结果的形貌观察 | 第78-79页 |
4.3.3 hESCs-多孔水凝胶复合物的体内钙化情况 | 第79-81页 |
4.3.4 H&E染色分析 | 第81-83页 |
4.3.5 成骨分化鉴定(骨钙素染色分析) | 第83-84页 |
4.3.6 成脂分化鉴定(油红-O染色分析) | 第84-85页 |
4.3.7 新生组织的细胞来源鉴定(Lamin B染色分析) | 第85-86页 |
4.4 本章小结 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-88页 |
第五章 人胚胎干细胞和间充质干细胞异位诱导成骨过程的对比研究 | 第88-106页 |
5.1 引言 | 第88-89页 |
5.2 实验部分 | 第89-94页 |
5.2.1 材料与仪器 | 第89-90页 |
5.2.2 hESCs和hMSCs的培养 | 第90-91页 |
5.2.3 细胞在多孔矿化水凝胶支架上的接种 | 第91页 |
5.2.4 细胞活性测定 | 第91页 |
5.2.5 体内(皮下)埋植实验 | 第91-92页 |
5.2.6 组织化学染色分析 | 第92-94页 |
5.3 结果与讨论 | 第94-104页 |
5.3.1 细胞-多孔矿化水凝胶复合物的细胞活性 | 第94-95页 |
5.3.2 体内(皮下)埋植实验观察 | 第95-96页 |
5.3.3 H&E染色分析 | 第96-97页 |
5.3.4 骨组织鉴定(OCN、Col I免疫组化染色分析) | 第97-100页 |
5.3.5 软骨组织鉴定(Safranin-O和Col X染色分析) | 第100-103页 |
5.3.6 骨组织的细胞来源鉴定(lamin B染色分析) | 第103-104页 |
5.4 本章小结 | 第104页 |
参考文献 | 第104-106页 |
第六章 全文总结 | 第106-109页 |
6.1 全文总结 | 第106-107页 |
6.2 创新工作点 | 第107页 |
6.3 展望 | 第107-109页 |
附录A 攻读博士学位期间所发表的学术成果目录 | 第109-110页 |
致谢 | 第110页 |