第一部分 检测肿瘤抑制基因DACH1在人舌鳞状细胞癌中的表达 | 第2-20页 |
摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3-5页 |
引言 | 第5-6页 |
第1章 材料与方法 | 第6-13页 |
1.1 实验材料 | 第6-7页 |
1.1.1 主要试剂 | 第6-7页 |
1.1.2 主要仪器及材料 | 第7页 |
1.1.3 组织标本来源 | 第7页 |
1.2 实验方法 | 第7-13页 |
1.2.1 免疫组织化学 | 第7-8页 |
1.2.2 结果判定标准 | 第8页 |
1.2.3 Real time RT-PCR | 第8-10页 |
1.2.4 Western blot | 第10-12页 |
1.2.5 统计学方法 | 第12-13页 |
第2章 结果 | 第13-16页 |
2.1 DACH1蛋白在舌鳞状细胞癌及对应癌周正常组织中的表达 | 第13页 |
2.2 DACH1蛋白表达与临床病理参数的关系 | 第13-14页 |
2.3 DACH1m RNA及蛋白质在新鲜舌鳞癌和癌周正常组织中的表达 | 第14-16页 |
第3章 讨论 | 第16-18页 |
结论 | 第18-19页 |
参考文献 | 第19-20页 |
第二部分 DACH1基因过表达对SCC-25细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭转移的影响 | 第20-44页 |
摘要 | 第20-21页 |
Abstract | 第21-23页 |
引言 | 第23-24页 |
第1章 材料与方法 | 第24-31页 |
1.1 实验材料 | 第24-26页 |
1.1.1 细胞系 | 第24页 |
1.1.2 载体 | 第24页 |
1.1.3 引物序列 | 第24页 |
1.1.4 主要试剂 | 第24-25页 |
1.1.5 主要仪器及设备 | 第25-26页 |
1.2 实验方法 | 第26-29页 |
1.2.1 舌鳞状细胞癌细胞培养 | 第26页 |
1.2.2 慢病毒载体的构建 | 第26页 |
1.2.3 慢病毒载体稳定转染舌鳞癌细胞系的选择 | 第26页 |
1.2.4 慢病毒载体转染效率的检测 | 第26-27页 |
1.2.5 RT-PCR检测转染后舌鳞癌细胞株DACH1m RNA的表达 | 第27页 |
1.2.6 Western blot检测转染后舌鳞癌细胞株DACH1蛋白质的表达 | 第27-28页 |
1.2.7 检测DACH1基因过表达对舌鳞癌细胞增殖的影响 | 第28-29页 |
1.2.8 流式细胞仪检测DACH1基因过表达对舌鳞癌细胞凋亡的影响 | 第29页 |
1.2.9 Transwell小室检测DACH1基因过表达对舌鳞癌细胞迁移能力的影响 | 第29页 |
1.3 黏附实验检测DACH1基因过表达对舌鳞癌细胞侵袭转移能力的影响 | 第29-31页 |
1.3.1 统计学分析 | 第30-31页 |
第2章 结果 | 第31-37页 |
2.1 慢病毒载体稳定转染舌鳞癌细胞系的选择 | 第31-32页 |
2.2 SCC-25 细胞中DACH1过表达效率的检测 | 第32-33页 |
2.3 DACH1基因过表达对SCC-25 细胞增殖活性的影响 | 第33-35页 |
2.3.1 DACH1基因过表达抑制SCC-25 细胞增殖活性 | 第33-34页 |
2.3.2 DACH1基因过表达SCC-25 细胞克隆形成能力 | 第34-35页 |
2.4 DACH1基因过表达诱导SCC-25 细胞凋亡 | 第35-36页 |
2.5 DACH1基因过表达抑制SCC-25 细胞迁移 | 第36页 |
2.6 DACH1基因过表达抑制SCC-25 细胞侵袭、转移 | 第36-37页 |
第3章 讨论 | 第37-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-44页 |
综述 | 第44-52页 |
综述参考文献 | 第49-52页 |
附录 | 第52-54页 |
攻读论文期间取得的研究成果 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |