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黄鳝性逆转相关基因的克隆及其调控机制的研究

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
缩略语表第12-13页
第一章 文献综述第13-38页
    1 遗传决定模式(Genetic sex determination,GSD)第13-21页
        1.1 鱼类的染色体性别决定类型第13-14页
        1.2 鱼类性别决定与分化相关基因第14-21页
    2 环境决定模式(Environmental sex determination,ESD)第21-25页
        2.1 温度和pH第21-22页
        2.2 外源性干扰物第22-24页
        2.3 社会地位及行为第24-25页
    3 控制性别分化内源激素的研究进展第25-32页
        3.1 下丘脑—垂体—性腺轴(HPG)与性腺发育第25-29页
        3.2 下丘脑—垂体—甲状腺轴(HPT)与性腺发育第29-30页
        3.3 下丘脑—垂体—肾间组织轴(HPI)与性腺发育第30-31页
        3.4 三轴之间的相互调控作用第31-32页
    4 卵黄蛋白原与性腺发育第32-35页
        4.1 卵黄蛋白原的合成第32-33页
        4.2 激素与卵黄蛋白原合成第33-35页
    5 鱼类性逆转的研究进展第35-37页
    6 本研究的目的和意义第37-38页
第二章 黄鳝性腺发育不同时期内参基因稳定性研究第38-54页
    1 前言第38-39页
    2 材料及方法第39-48页
        2.1 实验鱼第39页
        2.2 黄鳝组织样品采集第39-41页
        2.3 总RNA提取第41-42页
        2.4 反转录第42-43页
        2.5 引物设计第43-44页
        2.6 ef1α 和rpl17 基因的克隆、测序及各基因标准品的构建第44-47页
        2.7 实时荧光定量PCR第47页
        2.8 数据分析第47-48页
    3 结果第48-51页
        3.1 Tukey’s HSD检验第48-49页
        3.2 Δ~(–Ct)比较法第49-50页
        3.3 BestKeeper第50页
        3.4 GeNorm第50-51页
        3.5 NormFind第51页
    4 讨论第51-53页
    5 小结第53-54页
第三章 黄鳝性逆转过程中foxl2 和wt1 基因的克隆、表达差异以及蛋白定位研究第54-74页
    1 前言第54-55页
    2 材料及方法第55-59页
        2.1 实验鱼第55页
        2.2 黄鳝组织样品采集第55页
        2.3 总RNA提取第55页
        2.4 反转录第55页
        2.5 引物设计第55-56页
        2.6 wt1 和foxl2 基因的克隆、测序及各基因标准品的构建第56-57页
        2.7 序列分析及系统进化树构建第57页
        2.8 半定量PCR第57-58页
        2.9 实时荧光定量PCR第58页
        2.10 免疫组织化学第58-59页
    3 结果第59-70页
        3.1 Wt1 和Foxl2 cDNA序列的克隆结果及序列分析第59-63页
        3.2 wt1 和foxl2 核苷酸序列进化树分析第63-64页
        3.3 wt1 基因和foxl2 基因在各组织间的分布第64-65页
        3.4 wt1 基因和foxl2 基因在黄鳝性腺不同发育时期的表达差异第65-67页
        3.5 免疫组织化学法对Wt1 蛋白和Foxl2 在性腺中的表达进行定位第67-70页
    4 讨论第70-73页
    5 小结第73-74页
第四章 黄鳝性逆转过程中amh和dax1 基因的克隆、序列分析及其表达差异研究第74-90页
    1 前言第74-75页
    2 材料方法第75-78页
        2.1 实验鱼第75页
        2.2 黄鳝组织样品采集第75页
        2.3 总RNA提取第75页
        2.4 反转录第75页
        2.5 引物设计第75-76页
        2.6 amh和dax1 基因的克隆、测序及各基因标准品的构建第76-77页
        2.7 序列分析及系统进化树构建第77页
        2.8 半定量PCR第77页
        2.9 实时荧光定量PCR第77-78页
    3 结果第78-86页
        3.1 Amh和Dax1 cDNA序列的克隆结果及序列分析第78-82页
        3.2 amh和dax1 核苷酸序列进化树分析第82-83页
        3.3 amh基因和dax1 基因在各组织间的分布第83-84页
        3.4 amh基因和dax1 基因在黄鳝性腺不同发育时期的表达差异第84-86页
    4 讨论第86-88页
    5 小结第88-90页
第五章 黄鳝性逆转过程中fshr、lhr和star基因表达差异以及性腺发育相关激素的测定第90-105页
    1 前言第90-91页
    2 材料及方法第91-95页
        2.1 实验鱼第91页
        2.2 黄鳝组织样品及血液的采集第91-92页
        2.3 总RNA提取第92页
        2.4 反转录第92页
        2.5 引物设计第92-94页
        2.6 fshr、lhr和srat基因的克隆、测序及各基因标准品的构建第94页
        2.7 实时荧光定量PCR第94-95页
        2.8 血清激素测定第95页
    3 结果第95-100页
        3.1 fshr、lhr和srat基因在黄鳝性腺不同发育时期的表达差异第95-97页
        3.2 E2、皮质醇、T3和FT3在黄鳝性腺不同发育时期的变化第97-100页
    4 讨论第100-103页
    5 小结第103-105页
第六章 黄鳝性逆转过程中er、ar和gr基因表达差异与vtg基因表达相关性研究第105-117页
    1 前言第105-106页
    2 材料及方法第106-109页
        2.1 实验鱼第106页
        2.2 黄鳝组织样品采集第106-107页
        2.3 总RNA提取第107页
        2.4 反转录第107页
        2.5 引物设计第107页
        2.6 er、ar、gr和vtg基因的克隆、测序及各基因标准品的构建第107-108页
        2.7 实时荧光定量PCR第108-109页
    3 结果第109-113页
        3.1 erα 和erβ 基因在黄鳝性腺不同发育时期肝脏和性腺组织中表达差异第109-111页
        3.2 ar和gr基因在黄鳝性腺不同发育时期肝脏和性腺组织中表达差异第111-112页
        3.3 vtg基因在黄鳝性腺不同发育时期肝脏和性腺组织中的表达差异第112-113页
    4 讨论第113-116页
    5 小结第116-117页
参考文献第117-148页
附录第148-149页
致谢第149-151页

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