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两株阿魏酸降解菌的分离及特性的研究

符号说明第4-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
1 前言第13-24页
    1.1 黄瓜连作障碍第13-19页
        1.1.1 黄瓜连作障碍产生的原因第13-16页
            1.1.1.1 土壤养分不均衡第13-14页
            1.1.1.2 土壤微生态环境变化第14-15页
            1.1.1.3 土壤盐渍化第15页
            1.1.1.4 化感作用第15-16页
        1.1.2 黄瓜连作障碍解决的方法第16-19页
            1.1.2.1 合理轮作、间作第16-17页
            1.1.2.2 土壤消毒灭菌第17页
            1.1.2.2 选育良种第17-18页
            1.1.2.3 测土配方施肥第18页
            1.1.2.4 土壤菌肥的使用第18-19页
    1.2 植物化感作用的研究进展第19-21页
        1.2.1 化感物质的来源第19-21页
            1.2.1.1 雨雾表面淋溶第19页
            1.2.1.2 植物挥发性物质的释放第19-20页
            1.2.1.3 植物根系分泌第20页
            1.2.1.4 植株残株或凋落物分解第20-21页
        1.2.2 土壤连作障碍中酚酸研究现状第21页
    1.3 酚酸降解菌的研究进展第21-22页
    1.4 本实验的研究内容、目的及意义第22-24页
        1.4.1 实验内容第22页
        1.4.2 实验目的第22页
        1.4.3 实验意义第22-24页
2 材料与方法第24-33页
    2.1 实验材料与试剂第24-25页
        2.1.1 黄瓜品种第24页
        2.1.2 土壤样品第24页
        2.1.3 培养基第24页
            2.1.3.1 LB培养基第24页
            2.1.3.2 阿魏酸选择性培养基第24页
            2.1.3.3 葡萄糖培养基第24页
        2.1.4 实验试剂第24-25页
    2.2 实验方法第25-33页
        2.2.1 高效降解菌的筛选第25页
            2.2.1.1 降解菌的初筛、分离、纯化第25页
            2.2.1.2 降解菌的复筛第25页
        2.2.2 细菌的DNA提取和分子鉴定第25-26页
            2.2.2.1 细菌DNA提取第25页
            2.2.2.2 菌株的分子鉴定第25-26页
            2.2.2.3 16S rDNA序列测定及分析第26页
        2.2.3 CSY-F2最适降解温度第26页
        2.2.4 CSY-F2在 28 ℃条件下降解阿魏酸趋势第26-27页
        2.2.5 发酵液中代谢产物种类及含量检测第27页
            2.2.5.1 样品处理第27页
            2.2.5.2 高效液相色谱检测第27页
        2.2.6 CSY-F13生长条件的优化第27-28页
            2.2.6.1 单因素试验第27-28页
            2.2.6.2 Box-Behnken中心组合设计第28页
        2.2.7 菌体抗氧化酶的提取第28页
            2.2.7.1 CSY-F2与CSY-F13菌体培养第28页
            2.2.7.2 降解菌抗氧化酶的提取第28页
        2.2.8 黄瓜苗的培育第28-29页
        2.2.9 黄瓜叶片抗氧化酶的提取第29页
        2.2.10 抗氧化酶活性测定第29页
        2.2.11 蛋白质含量的测定第29页
        2.2.12 丙二醛(MDA)含量测定第29页
        2.2.13 O2~(.-)和H_2O_2含量测定第29-30页
            2.2.13.1 O2~(.-)含量测定第29-30页
            2.2.13.2 H_2O_2含量测定第30页
        2.2.14 土壤酶活性的测定第30-32页
            2.2.14.1 蔗糖酶含量测定第30页
            2.2.14.2 脲酶含量测定第30-31页
            2.2.14.3 碱性磷酸酶含量测定第31页
            2.2.14.4 过氧化氢酶含量测定第31-32页
        2.2.15 土壤中酚酸含量的测定第32页
        2.2.16 实验数据分析第32-33页
3 结果分析第33-51页
    3.1 菌株筛选结果第33页
        3.1.1 初筛结果第33页
        3.1.2 复筛结果第33页
    3.2 细菌DNA提取及 16S rDNA扩增结果第33-35页
        3.2.1 细菌DNA提取结果第33-34页
        3.2.2 16S rDNA扩增结果第34-35页
    3.3 系统发育树的构建第35-36页
    3.4 CSY-F2最适降解温度第36页
    3.5 CSY-F2在 28 ℃条件下降解阿魏酸趋势第36-37页
    3.6 HPLC检测CSY-F2代谢产物第37页
    3.7 CSY-F2菌体抗氧化酶活性测定第37-38页
    3.8 CSY-F2土壤中阿魏酸的降解情况第38-39页
    3.9 CSY-F2对黄瓜生长的影响第39-42页
        3.9.1 四种处理下黄瓜叶片抗氧化酶活性变化第39-40页
        3.9.2 四种处理下黄瓜叶片中MDA、H_2O_2及O2~(.-)的含量变化第40-41页
        3.9.3 四中处理下黄瓜根际土壤酶活性变化第41-42页
    3.10 CSY-F13培养条件优化第42-46页
        3.10.1 单因素实验第42-43页
        3.10.2 响应面分析试验第43-46页
    3.11 CSY-F13菌体抗氧化酶活性测定第46-47页
    3.12 CSY-F13对黄瓜生长的影响第47-51页
        3.12.1 四种处理下黄瓜植株生长情况第47页
        3.12.2 四种处理下黄瓜叶片抗氧化酶活性变化第47-48页
        3.12.3 四种处理下黄瓜叶片中MDA及H_2O_2的含量变化第48-49页
        3.12.4 四种处理下黄瓜根际土土壤酶活性变化第49-51页
4 讨论第51-55页
    4.1 Gordonia terrae. CSY-F2缓解黄瓜连作的研究第51-52页
    4.2 Pseudomonas sp. CSY-F13缓解黄瓜连作的研究第52-54页
    4.3 菌肥的应用前景第54-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-62页
致谢第62-63页
攻读学位期间发表论文情况第63页

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