符号说明 | 第4-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 前言 | 第13-24页 |
1.1 黄瓜连作障碍 | 第13-19页 |
1.1.1 黄瓜连作障碍产生的原因 | 第13-16页 |
1.1.1.1 土壤养分不均衡 | 第13-14页 |
1.1.1.2 土壤微生态环境变化 | 第14-15页 |
1.1.1.3 土壤盐渍化 | 第15页 |
1.1.1.4 化感作用 | 第15-16页 |
1.1.2 黄瓜连作障碍解决的方法 | 第16-19页 |
1.1.2.1 合理轮作、间作 | 第16-17页 |
1.1.2.2 土壤消毒灭菌 | 第17页 |
1.1.2.2 选育良种 | 第17-18页 |
1.1.2.3 测土配方施肥 | 第18页 |
1.1.2.4 土壤菌肥的使用 | 第18-19页 |
1.2 植物化感作用的研究进展 | 第19-21页 |
1.2.1 化感物质的来源 | 第19-21页 |
1.2.1.1 雨雾表面淋溶 | 第19页 |
1.2.1.2 植物挥发性物质的释放 | 第19-20页 |
1.2.1.3 植物根系分泌 | 第20页 |
1.2.1.4 植株残株或凋落物分解 | 第20-21页 |
1.2.2 土壤连作障碍中酚酸研究现状 | 第21页 |
1.3 酚酸降解菌的研究进展 | 第21-22页 |
1.4 本实验的研究内容、目的及意义 | 第22-24页 |
1.4.1 实验内容 | 第22页 |
1.4.2 实验目的 | 第22页 |
1.4.3 实验意义 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-33页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第24-25页 |
2.1.1 黄瓜品种 | 第24页 |
2.1.2 土壤样品 | 第24页 |
2.1.3 培养基 | 第24页 |
2.1.3.1 LB培养基 | 第24页 |
2.1.3.2 阿魏酸选择性培养基 | 第24页 |
2.1.3.3 葡萄糖培养基 | 第24页 |
2.1.4 实验试剂 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-33页 |
2.2.1 高效降解菌的筛选 | 第25页 |
2.2.1.1 降解菌的初筛、分离、纯化 | 第25页 |
2.2.1.2 降解菌的复筛 | 第25页 |
2.2.2 细菌的DNA提取和分子鉴定 | 第25-26页 |
2.2.2.1 细菌DNA提取 | 第25页 |
2.2.2.2 菌株的分子鉴定 | 第25-26页 |
2.2.2.3 16S rDNA序列测定及分析 | 第26页 |
2.2.3 CSY-F2最适降解温度 | 第26页 |
2.2.4 CSY-F2在 28 ℃条件下降解阿魏酸趋势 | 第26-27页 |
2.2.5 发酵液中代谢产物种类及含量检测 | 第27页 |
2.2.5.1 样品处理 | 第27页 |
2.2.5.2 高效液相色谱检测 | 第27页 |
2.2.6 CSY-F13生长条件的优化 | 第27-28页 |
2.2.6.1 单因素试验 | 第27-28页 |
2.2.6.2 Box-Behnken中心组合设计 | 第28页 |
2.2.7 菌体抗氧化酶的提取 | 第28页 |
2.2.7.1 CSY-F2与CSY-F13菌体培养 | 第28页 |
2.2.7.2 降解菌抗氧化酶的提取 | 第28页 |
2.2.8 黄瓜苗的培育 | 第28-29页 |
2.2.9 黄瓜叶片抗氧化酶的提取 | 第29页 |
2.2.10 抗氧化酶活性测定 | 第29页 |
2.2.11 蛋白质含量的测定 | 第29页 |
2.2.12 丙二醛(MDA)含量测定 | 第29页 |
2.2.13 O2~(.-)和H_2O_2含量测定 | 第29-30页 |
2.2.13.1 O2~(.-)含量测定 | 第29-30页 |
2.2.13.2 H_2O_2含量测定 | 第30页 |
2.2.14 土壤酶活性的测定 | 第30-32页 |
2.2.14.1 蔗糖酶含量测定 | 第30页 |
2.2.14.2 脲酶含量测定 | 第30-31页 |
2.2.14.3 碱性磷酸酶含量测定 | 第31页 |
2.2.14.4 过氧化氢酶含量测定 | 第31-32页 |
2.2.15 土壤中酚酸含量的测定 | 第32页 |
2.2.16 实验数据分析 | 第32-33页 |
3 结果分析 | 第33-51页 |
3.1 菌株筛选结果 | 第33页 |
3.1.1 初筛结果 | 第33页 |
3.1.2 复筛结果 | 第33页 |
3.2 细菌DNA提取及 16S rDNA扩增结果 | 第33-35页 |
3.2.1 细菌DNA提取结果 | 第33-34页 |
3.2.2 16S rDNA扩增结果 | 第34-35页 |
3.3 系统发育树的构建 | 第35-36页 |
3.4 CSY-F2最适降解温度 | 第36页 |
3.5 CSY-F2在 28 ℃条件下降解阿魏酸趋势 | 第36-37页 |
3.6 HPLC检测CSY-F2代谢产物 | 第37页 |
3.7 CSY-F2菌体抗氧化酶活性测定 | 第37-38页 |
3.8 CSY-F2土壤中阿魏酸的降解情况 | 第38-39页 |
3.9 CSY-F2对黄瓜生长的影响 | 第39-42页 |
3.9.1 四种处理下黄瓜叶片抗氧化酶活性变化 | 第39-40页 |
3.9.2 四种处理下黄瓜叶片中MDA、H_2O_2及O2~(.-)的含量变化 | 第40-41页 |
3.9.3 四中处理下黄瓜根际土壤酶活性变化 | 第41-42页 |
3.10 CSY-F13培养条件优化 | 第42-46页 |
3.10.1 单因素实验 | 第42-43页 |
3.10.2 响应面分析试验 | 第43-46页 |
3.11 CSY-F13菌体抗氧化酶活性测定 | 第46-47页 |
3.12 CSY-F13对黄瓜生长的影响 | 第47-51页 |
3.12.1 四种处理下黄瓜植株生长情况 | 第47页 |
3.12.2 四种处理下黄瓜叶片抗氧化酶活性变化 | 第47-48页 |
3.12.3 四种处理下黄瓜叶片中MDA及H_2O_2的含量变化 | 第48-49页 |
3.12.4 四种处理下黄瓜根际土土壤酶活性变化 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-55页 |
4.1 Gordonia terrae. CSY-F2缓解黄瓜连作的研究 | 第51-52页 |
4.2 Pseudomonas sp. CSY-F13缓解黄瓜连作的研究 | 第52-54页 |
4.3 菌肥的应用前景 | 第54-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第63页 |