| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 水稻稻瘟病 | 第9页 |
| 1.2 稻瘟病菌的侵染循环 | 第9-15页 |
| 1.2.1 分生孢子形成的基因调控 | 第10-11页 |
| 1.2.2 附着胞形成的调控 | 第11-15页 |
| 1.3 丝氨酸蛋白酶家族 | 第15-18页 |
| 1.3.1 丝氨酸蛋白酶家族概况 | 第15页 |
| 1.3.2 丝氨酸蛋白酶在病原真菌中的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.4 本论文的研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 实验材料与方法 | 第19-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第19页 |
| 2.1.2 供试质粒 | 第19-20页 |
| 2.1.3 供试植物 | 第20页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第20页 |
| 2.1.5 实验所需培养基(1L体系) | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-30页 |
| 2.2.1 基因相关序列的获得与分析 | 第21页 |
| 2.2.2 稻瘟病菌DNA的粗提取 | 第21-22页 |
| 2.2.3 DNA琼脂糖电泳 | 第22页 |
| 2.2.4 PCR反应 | 第22-24页 |
| 2.2.5 PCR产物或酶切反应液中DNA的回收(天根公司通用型DNA纯化回收试剂盒方案) | 第24页 |
| 2.2.6 质粒DNA的提取(天根公司快速质粒小试剂盒方案) | 第24-25页 |
| 2.2.7 质粒的双酶切与连接 | 第25-26页 |
| 2.2.8 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备与转化 | 第26-27页 |
| 2.2.9 基因敲除载体的构建 | 第27页 |
| 2.2.10 稻瘟病菌Guy11原生质体的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.11 稻瘟病菌Guy11原生质体的转化与转化子的筛选验证 | 第28页 |
| 2.2.12 稻瘟病菌敲除转化子菌落生长速率的测定 | 第28页 |
| 2.2.13 稻瘟病菌敲除转化子产孢量的统计 | 第28页 |
| 2.2.14 稻瘟病菌分生孢子对水稻或大麦叶鞘的侵染 | 第28-29页 |
| 2.2.15 稻瘟病菌敲除转化子致病性的测定 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-42页 |
| 3.1 稻瘟病菌中MGG_03870.7、MGG_08415.7和MGG_09817.7的生物信息学分析 | 第30页 |
| 3.2 稻瘟病菌中MGG_08415.7和MGG_03870.7基因的敲除 | 第30-40页 |
| 3.2.1 MGG_03870.7基因的敲除 | 第30-37页 |
| 3.2.1.1 MGG_03870.7基因敲除载体的构建 | 第30-32页 |
| 3.2.1.2 MGG_03870.7基因的敲除突变体的获得与验证 | 第32-33页 |
| 3.2.1.3 MGG_03870.7基因的敲除突变体生长速率的测定 | 第33-34页 |
| 3.2.1.4 MGG_03870.7基因的敲除突变体产孢量的统计 | 第34页 |
| 3.2.1.5 MGG_03870.7基因敲除突变体的致病性分析 | 第34-37页 |
| 3.2.2 MGG_08415.7基因的敲除 | 第37-40页 |
| 3.2.2.1 MGG_08415.7基因敲除载体的构建 | 第37页 |
| 3.2.2.2 MGG_08415.7基因的敲除突变体的获得与验证 | 第37-38页 |
| 3.2.2.3 MGG_08415.7基因的敲除突变体生长速率的测定 | 第38-39页 |
| 3.2.2.4 MGG_08415.7基因的敲除突变体产孢量的统计 | 第39页 |
| 3.2.2.5 MGG_08415.7基因的敲除突变体的致病性分析 | 第39-40页 |
| 3.3 MGG_09178.7基因敲除载体的构建 | 第40-42页 |
| 4 总结与讨论 | 第42-43页 |
| 4.1 基因MGG_03870.7和MGG_08415.7的功能分析 | 第42页 |
| 4.2 基因MGG_09817.7的功能预测 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
