| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-26页 |
| 1 干预龋齿的天然产物活性成分的研究进展 | 第15-17页 |
| 2 变形链球菌表面毒力因子的相关研究 | 第17-20页 |
| 2.1 葡萄糖基转移酶（GTFs） | 第17-19页 |
| 2.2 葡聚糖结合蛋白（GBPs） | 第19-20页 |
| 3 天然产物活性成分与蛋白相互作用的表征方法 | 第20-23页 |
| 3.1 紫外-可见吸收光谱法 | 第20-21页 |
| 3.2 荧光光谱法 | 第21-22页 |
| 3.3 圆二色谱法 | 第22页 |
| 3.4 傅里叶变换红外光谱法 | 第22-23页 |
| 3.5 其他研究方法 | 第23页 |
| 4 论文研究内容 | 第23-24页 |
| 5 创新点 | 第24-26页 |
| 第二章 SPC四聚体的分离和鉴定 | 第26-32页 |
| 引言 | 第26页 |
| 1 材料与方法 | 第26-28页 |
| 1.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 1.1.1 实验原料与试剂 | 第26-27页 |
| 1.1.2 仪器设备 | 第27页 |
| 1.2 实验方法 | 第27-28页 |
| 1.2.1 SPC-Ⅵ级分的HPLC-MS/MS分析 | 第27-28页 |
| 2 结果与讨论 | 第28-31页 |
| 2.1 SPC-Ⅵ级分的HPLC-MS/MS分析 | 第28-31页 |
| 3 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 葡萄糖基转移酶B催化活性区的基因克隆与表达 | 第32-47页 |
| 引言 | 第32-33页 |
| 1 材料与方法 | 第33-38页 |
| 1.1 实验材料 | 第33-35页 |
| 1.1.1 实验原料与试剂 | 第33-34页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 1.2 实验方法 | 第35-38页 |
| 1.2.1 S.mutans UA159（Ingbritt c）的培养 | 第35页 |
| 1.2.2 PCR引物的设计 | 第35-36页 |
| 1.2.3 gtfB/CAT的克隆 | 第36页 |
| 1.2.4 PCR产物与载体pET-28b（+）连接 | 第36页 |
| 1.2.5 重组质粒的转化 | 第36页 |
| 1.2.6 阳性克隆的筛选与测序 | 第36-37页 |
| 1.2.7 重组蛋白的诱导表达 | 第37页 |
| 1.2.8 GTFB/CAT包涵体蛋白的纯化及复性 | 第37页 |
| 1.2.9 GTFB/CAT蛋白酶活的测定 | 第37页 |
| 1.2.10 Nano LC-MS/MS鉴定 | 第37-38页 |
| 2 结果与讨论 | 第38-45页 |
| 2.1 gtfB/CAT的克隆 | 第38-39页 |
| 2.2 pET-28b（+）-gtfB/CAT重组质粒双酶切鉴定 | 第39页 |
| 2.3 PCR产物测序结果 | 第39-40页 |
| 2.4 重组质粒pET28b（+）-gtfB/CAT在E.coli BL21 中的诱导表达 | 第40-42页 |
| 2.5 GTFB/CAT包涵体蛋白的纯化及复性 | 第42页 |
| 2.6 GTFB/CAT蛋白酶活的测定 | 第42-43页 |
| 2.7 Nano LC-MS/MS鉴定 | 第43-45页 |
| 3 小结 | 第45-47页 |
| 第四章 葡萄糖结合蛋白B的基因克隆与表达 | 第47-63页 |
| 引言 | 第47-48页 |
| 1 材料与方法 | 第48-54页 |
| 1.1 实验材料 | 第48-50页 |
| 1.1.1 实验原料与试剂 | 第48-49页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第49-50页 |
| 1.2 实验方法 | 第50-54页 |
| 1.2.1 gbpB的全基因合成及引物设计 | 第50-51页 |
| 1.2.2 gbpB的基因克隆 | 第51页 |
| 1.2.3 pET-28a-sumo-gbpB表达载体的构建 | 第51-52页 |
| 1.2.4 重组质粒的转化 | 第52页 |
| 1.2.5 阳性克隆的筛选与测序 | 第52页 |
| 1.2.6 GBPB-sumo蛋白的小量表达 | 第52-53页 |
| 1.2.7 GBPB-sumo蛋白的大量表达 | 第53页 |
| 1.2.8 GBPB-sumo蛋白的纯化 | 第53页 |
| 1.2.9 Nano LC-MS/MS鉴定 | 第53-54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-62页 |
| 2.1 gbpB的克隆 | 第54-55页 |
| 2.2 双酶切产物的回收检测 | 第55-56页 |
| 2.3 PCR产物测序结果 | 第56-58页 |
| 2.4 重组质粒pET-28a-sumo-gbpB在Rosetta（DE3）中的小量表达 | 第58-59页 |
| 2.5 GBPB-sumo蛋白的大量表达 | 第59页 |
| 2.6 GBPB-sumo蛋白的纯化 | 第59-60页 |
| 2.7 Nano LC-MS/MS鉴定 | 第60-62页 |
| 3 小结 | 第62-63页 |
| 第五章 SPC四聚体与GTFB/CAT和GBPB-sumo蛋白相互作用机理的研究 | 第63-83页 |
| 引言 | 第63-64页 |
| 1 材料与方法 | 第64-67页 |
| 1.1 实验材料 | 第64-65页 |
| 1.1.1 实验原料与试剂 | 第64-65页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第65页 |
| 1.2 实验方法 | 第65-67页 |
| 1.2.1 SPC四聚体对GTFB/CAT蛋白酶活的抑制作用 | 第65页 |
| 1.2.2 SPC四聚体与GTFB/CAT蛋白和GBPB-sumo蛋白相互作用的的荧光猝灭法研究 | 第65-66页 |
| 1.2.3 SPC四聚体与GTFB/CAT蛋白和GBPB-sumo蛋白相互作用的紫外-可见吸收光谱法研究 | 第66页 |
| 1.2.4 SPC四聚体与GTFB/CAT蛋白和GBPB-sumo蛋白相互作用的圆二色光谱法研究 | 第66-67页 |
| 1.2.5 统计分析 | 第67页 |
| 2 结果与讨论 | 第67-81页 |
| 2.1 SPC四聚体对GTFB/CAT蛋白酶活的抑制作用 | 第67-69页 |
| 2.2 SPC四聚体与GTFB/CAT和GBPB-sumo蛋白相互作用的的荧光猝灭法研究 | 第69-76页 |
| 2.3 SPC四聚体与GTFB/CAT蛋白和GBPB-sumo蛋白相互作用的紫外-可见吸收光谱法研究 | 第76-78页 |
| 2.4 SPC四聚体与GTFB/CAT蛋白和GBPB-sumo蛋白相互作用的的圆二色光谱法研究 | 第78-81页 |
| 3 小结 | 第81-83页 |
| 第六章 结论与展望 | 第83-86页 |
| 1 结论 | 第83-84页 |
| 2 展望 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-97页 |
| 研究生期间发表文章 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
