摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第1章 文献综述 | 第13-23页 |
1.1 细胞周期的研究 | 第13-17页 |
1.1.1 细胞有丝分裂 | 第13-14页 |
1.1.2 细胞核内周期 | 第14-16页 |
1.1.3 家蚕细胞周期的研究进展 | 第16-17页 |
1.2 Aurora激酶家族 | 第17-20页 |
1.2.1 Aurora A激酶 | 第18页 |
1.2.2 Aurora B激酶 | 第18-19页 |
1.2.3 Aurora C激酶 | 第19-20页 |
1.3 Aurora B激酶在细胞周期中的作用机制研究 | 第20-23页 |
第2章 引言 | 第23-25页 |
2.1 研究背景及目的意义 | 第23页 |
2.2 研究内容 | 第23-24页 |
2.2.1 家蚕Aurora B基因的全长cDNA序列克隆与时空表达谱分析 | 第23页 |
2.2.2 Aurora B激酶在家蚕细胞周期进程中的调控作用 | 第23-24页 |
2.2.3 Aurora B激酶潜在磷酸化作用靶标的筛选 | 第24页 |
2.3 技术路线 | 第24-25页 |
第3章 家蚕Aurora B激酶基因的全长cDNA序列克隆与时空表达谱分析 | 第25-37页 |
3.1 材料与方法 | 第25-30页 |
3.1.1 实验材料、试剂与仪器 | 第25-26页 |
3.1.2 相关溶液及配制 | 第26页 |
3.1.3 RACE扩增方法 | 第26-27页 |
3.1.4 表达谱分析 | 第27-30页 |
3.1.5 生物信息学分析所用软件及在线数据库 | 第30页 |
3.2 结果与分析 | 第30-36页 |
3.2.1 家蚕Aurora B基因的全长cDNA序列克隆 | 第30-31页 |
3.2.2 家蚕Aurora B基因的系统发生关系分析 | 第31-34页 |
3.2.3 家蚕Aurora B基因的时空表达特征分析 | 第34-36页 |
3.3 讨论 | 第36-37页 |
第4章 Aurora B激酶在家蚕细胞周期进程中的调控作用 | 第37-55页 |
4.1 材料与方法 | 第37-46页 |
4.1.1 实验材料、试剂与仪器 | 第37页 |
4.1.2 主要溶液及配制 | 第37-39页 |
4.1.3 家蚕Aurora B基因的过表达载体构建 | 第39-42页 |
4.1.4 细胞培养 | 第42-43页 |
4.1.5 细胞RNA提取 | 第43页 |
4.1.6 家蚕BmAurB基因的dsRNA合成 | 第43-44页 |
4.1.7 细胞周期检测 | 第44-45页 |
4.1.8 免疫荧光标记 | 第45页 |
4.1.9 Western blot | 第45-46页 |
4.1.10 生物信息分析所用软件 | 第46页 |
4.2 实验结果与分析 | 第46-53页 |
4.2.1 BmAurB基因RNAi对家蚕BmN4-SID1细胞周期的影响 | 第46-48页 |
4.2.2 Aurora B特异抑制剂处理对家蚕BmN4-SID1细胞周期的改变 | 第48-50页 |
4.2.3 BmAurB基因过表达对家蚕细胞周期进程的影响 | 第50-53页 |
4.3 讨论 | 第53-55页 |
第5章 Aurora B激酶新的潜在作用靶标鉴定 | 第55-63页 |
5.1 材料与方法 | 第55-56页 |
5.1.0 实验材料、试剂及仪器 | 第55页 |
5.1.1 实验试剂 | 第55页 |
5.1.2 主要溶液及配制 | 第55-56页 |
5.1.3 细胞培养 | 第56页 |
5.1.4 HEK293-FT细胞的细胞周期确定 | 第56页 |
5.1.5 蛋白样品制备 | 第56页 |
5.1.6 磷酸化蛋白质组学数据分析软件 | 第56页 |
5.2 实验结果与分析 | 第56-62页 |
5.2.1 HEK293-FT细胞同步化及细胞周期进程确定 | 第56-57页 |
5.2.2 Aurora B激酶的磷酸化靶蛋白及肽段收集 | 第57-58页 |
5.2.3 Aurora B激酶的磷酸化靶蛋白的质谱鉴定分析 | 第58-61页 |
5.2.4 潜在磷酸化靶标CBX5基因RNAi对胞质分裂的抑制 | 第61-62页 |
5.3 讨论 | 第62-63页 |
第6章 综合与讨论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
致谢 | 第73-75页 |
硕士期间发表论文及参研课题 | 第75页 |