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柑橘大实蝇蛹期发育的基因表达谱分析及海藻糖代谢相关基因的研究

中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第13-21页
    1 柑橘大实蝇及其危害第13-14页
        1.1 柑橘大实蝇的形态学特征第13-14页
        1.2 柑橘大实蝇的生物学习性第14页
        1.3 柑橘大实蝇的防治第14页
    2 昆虫滞育第14-15页
    3 高通量测序技术在昆虫学研究中的应用第15-16页
        3.1 高通量测序技术第15-16页
        3.2 高通量测序技术在昆虫学研究中的应用第16页
    4 昆虫海藻糖代谢的研究概况第16-18页
        4.1 海藻糖概述第16-17页
        4.2 昆虫海藻糖的代谢途径第17-18页
        4.3 海藻糖代谢与昆虫滞育的关系第18页
    5 RNAi技术及其在昆虫学研究中的应用第18-21页
        5.1 RNAi技术第18页
        5.2 系统RNAi第18-19页
        5.3 RNAi的作用机制第19-20页
        5.4 RNAi技术在昆虫学研究中的应用第20-21页
引言第21-23页
    1 论文的研究背景及意义第21页
    2 论文的研究思路及框架第21-23页
第二章 柑橘大实蝇呼吸速率的测定第23-29页
    1 材料与方法第23-25页
        1.1 供试虫源第23页
        1.2 实验试剂与仪器第23页
        1.3 柑橘大实蝇自然蛹呼吸速率的测定第23-24页
        1.4 20E的注射第24页
        1.5 数据分析第24-25页
    2 结果与分析第25-26页
    3 讨论第26-29页
第三章 柑橘大实蝇不同滞育期基因表达谱分析第29-47页
    1 材料与方法第29-35页
        1.1 供试虫源第29页
        1.2 实验试剂(盒)与仪器第29-30页
        1.3 柑橘大实蝇总RNA的提取第30-31页
        1.4 柑橘大实蝇转录组和数字基因表达谱测序流程及信息分析第31-32页
        1.5 荧光定量PCR技术验证表达谱测序准确性第32-35页
    2 结果与分析第35-44页
        2.1 柑橘大实蝇总RNA质量检测第35页
        2.2 柑橘大实蝇转录组数据库建立第35-37页
        2.3 柑橘大实蝇表达谱测序数据整理、过滤及质量评估第37-39页
        2.4 荧光定量PCR验证表达谱测序准确性第39-40页
        2.5 柑橘大实蝇表达谱差异表达分析第40-44页
        2.6 柑橘大实蝇表达谱差异基因KEGG功能注释第44页
    3 讨论第44-47页
第四章 柑橘大实蝇海藻糖代谢相关基因克隆及序列分析第47-67页
    1 材料与方法第47-52页
        1.1 供试虫源第47页
        1.2 实验试剂(盒)与仪器第47-48页
        1.3 柑橘大实蝇总RNA的提取第48页
        1.4 第一链cDNA合成第48-49页
        1.5 引物设计第49-50页
        1.6 PCR扩增第50-52页
        1.7 柑橘大实蝇TPS、TPP和Tre基因序列及系统发育分析第52页
    2 结果与分析第52-65页
        2.1 柑橘大实蝇海藻糖代谢相关基因cDNA全长的获得第52页
        2.2 柑橘大实蝇海藻糖代谢相关基因cDNA的生物信息学分析第52-61页
        2.3 柑橘大实蝇海藻糖代谢相关基因系统发育分析第61-65页
    3 讨论第65-67页
第五章 柑橘大实蝇海藻糖代谢相关基因表达模式、酶活力及糖含量分析第67-79页
    1 材料与方法第67-71页
        1.1 供试虫源第67页
        1.2 实验试剂(盒)与仪器第67-68页
        1.3 20E的注射第68页
        1.4 柑橘大实蝇总RNA的提取第68页
        1.5 第一链cDNA合成第68页
        1.6 荧光定量PCR引物设计第68-69页
        1.7 定量PCR反应第69页
        1.8 酶活力测定第69-70页
        1.9 海藻糖含量测定第70页
        1.10 数据分析第70-71页
    2 结果与分析第71-76页
        2.1 引物扩增效率第71页
        2.2 柑橘大实蝇不同发育时期海藻糖代谢相关基因的表达分析第71-72页
        2.3 柑橘大实蝇不同发育时期海藻糖代谢相关酶活力分析第72-73页
        2.4 柑橘大实蝇不同发育时期海藻糖代谢相关糖含量分析第73-74页
        2.5 20E对柑橘大实蝇海藻糖代谢相关酶活力的影响第74-75页
        2.6 20E对柑橘大实蝇海藻糖和葡萄糖含量的影响第75-76页
    3 讨论第76-79页
第六章 柑橘大实蝇RNA干扰技术的初步探究第79-93页
    1 材料与方法第79-84页
        1.1 供试虫源第79页
        1.2 实验试剂(盒)与仪器第79页
        1.3 dsRNA引物的设计第79-80页
        1.4 dsRNA的体外合成第80-83页
        1.5 注射dsRNA第83页
        1.6 20E注射第83页
        1.7 几丁质合成通路基因的表达分析第83-84页
        1.8 数据分析第84页
    2 结果与分析第84-89页
        2.1 沉默效率检测第84-86页
        2.2 RNA干扰效果的观察第86页
        2.3 RNA干扰对海藻糖和葡萄糖含量的影响第86-87页
        2.4 RNA干扰对几丁质通路基因表达的影响第87-88页
        2.5 20E注射对化蛹率和关键基因表达量的影响第88-89页
    3 讨论第89-93页
第七章 主要结论与展望第93-97页
    1 主要结论第93-94页
        1.1 明确了柑橘大实蝇滞育发生和结束的时间点第93页
        1.2 完成了柑橘大实蝇不同滞育期基因表达谱的测序及分析第93页
        1.3 克隆获得了柑橘大实蝇5条海藻糖代谢相关基因第93-94页
        1.4 解析了柑橘大实蝇海藻糖代谢相关基因表达模式、酶活力及糖含量第94页
        1.5 初步构建了柑橘大实蝇RNA干扰体系第94页
    2 展望第94-97页
参考文献第97-105页
硕士在读期间发表的论文第105-107页
致谢第107-108页

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