中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第13-21页 |
1 柑橘大实蝇及其危害 | 第13-14页 |
1.1 柑橘大实蝇的形态学特征 | 第13-14页 |
1.2 柑橘大实蝇的生物学习性 | 第14页 |
1.3 柑橘大实蝇的防治 | 第14页 |
2 昆虫滞育 | 第14-15页 |
3 高通量测序技术在昆虫学研究中的应用 | 第15-16页 |
3.1 高通量测序技术 | 第15-16页 |
3.2 高通量测序技术在昆虫学研究中的应用 | 第16页 |
4 昆虫海藻糖代谢的研究概况 | 第16-18页 |
4.1 海藻糖概述 | 第16-17页 |
4.2 昆虫海藻糖的代谢途径 | 第17-18页 |
4.3 海藻糖代谢与昆虫滞育的关系 | 第18页 |
5 RNAi技术及其在昆虫学研究中的应用 | 第18-21页 |
5.1 RNAi技术 | 第18页 |
5.2 系统RNAi | 第18-19页 |
5.3 RNAi的作用机制 | 第19-20页 |
5.4 RNAi技术在昆虫学研究中的应用 | 第20-21页 |
引言 | 第21-23页 |
1 论文的研究背景及意义 | 第21页 |
2 论文的研究思路及框架 | 第21-23页 |
第二章 柑橘大实蝇呼吸速率的测定 | 第23-29页 |
1 材料与方法 | 第23-25页 |
1.1 供试虫源 | 第23页 |
1.2 实验试剂与仪器 | 第23页 |
1.3 柑橘大实蝇自然蛹呼吸速率的测定 | 第23-24页 |
1.4 20E的注射 | 第24页 |
1.5 数据分析 | 第24-25页 |
2 结果与分析 | 第25-26页 |
3 讨论 | 第26-29页 |
第三章 柑橘大实蝇不同滞育期基因表达谱分析 | 第29-47页 |
1 材料与方法 | 第29-35页 |
1.1 供试虫源 | 第29页 |
1.2 实验试剂(盒)与仪器 | 第29-30页 |
1.3 柑橘大实蝇总RNA的提取 | 第30-31页 |
1.4 柑橘大实蝇转录组和数字基因表达谱测序流程及信息分析 | 第31-32页 |
1.5 荧光定量PCR技术验证表达谱测序准确性 | 第32-35页 |
2 结果与分析 | 第35-44页 |
2.1 柑橘大实蝇总RNA质量检测 | 第35页 |
2.2 柑橘大实蝇转录组数据库建立 | 第35-37页 |
2.3 柑橘大实蝇表达谱测序数据整理、过滤及质量评估 | 第37-39页 |
2.4 荧光定量PCR验证表达谱测序准确性 | 第39-40页 |
2.5 柑橘大实蝇表达谱差异表达分析 | 第40-44页 |
2.6 柑橘大实蝇表达谱差异基因KEGG功能注释 | 第44页 |
3 讨论 | 第44-47页 |
第四章 柑橘大实蝇海藻糖代谢相关基因克隆及序列分析 | 第47-67页 |
1 材料与方法 | 第47-52页 |
1.1 供试虫源 | 第47页 |
1.2 实验试剂(盒)与仪器 | 第47-48页 |
1.3 柑橘大实蝇总RNA的提取 | 第48页 |
1.4 第一链cDNA合成 | 第48-49页 |
1.5 引物设计 | 第49-50页 |
1.6 PCR扩增 | 第50-52页 |
1.7 柑橘大实蝇TPS、TPP和Tre基因序列及系统发育分析 | 第52页 |
2 结果与分析 | 第52-65页 |
2.1 柑橘大实蝇海藻糖代谢相关基因cDNA全长的获得 | 第52页 |
2.2 柑橘大实蝇海藻糖代谢相关基因cDNA的生物信息学分析 | 第52-61页 |
2.3 柑橘大实蝇海藻糖代谢相关基因系统发育分析 | 第61-65页 |
3 讨论 | 第65-67页 |
第五章 柑橘大实蝇海藻糖代谢相关基因表达模式、酶活力及糖含量分析 | 第67-79页 |
1 材料与方法 | 第67-71页 |
1.1 供试虫源 | 第67页 |
1.2 实验试剂(盒)与仪器 | 第67-68页 |
1.3 20E的注射 | 第68页 |
1.4 柑橘大实蝇总RNA的提取 | 第68页 |
1.5 第一链cDNA合成 | 第68页 |
1.6 荧光定量PCR引物设计 | 第68-69页 |
1.7 定量PCR反应 | 第69页 |
1.8 酶活力测定 | 第69-70页 |
1.9 海藻糖含量测定 | 第70页 |
1.10 数据分析 | 第70-71页 |
2 结果与分析 | 第71-76页 |
2.1 引物扩增效率 | 第71页 |
2.2 柑橘大实蝇不同发育时期海藻糖代谢相关基因的表达分析 | 第71-72页 |
2.3 柑橘大实蝇不同发育时期海藻糖代谢相关酶活力分析 | 第72-73页 |
2.4 柑橘大实蝇不同发育时期海藻糖代谢相关糖含量分析 | 第73-74页 |
2.5 20E对柑橘大实蝇海藻糖代谢相关酶活力的影响 | 第74-75页 |
2.6 20E对柑橘大实蝇海藻糖和葡萄糖含量的影响 | 第75-76页 |
3 讨论 | 第76-79页 |
第六章 柑橘大实蝇RNA干扰技术的初步探究 | 第79-93页 |
1 材料与方法 | 第79-84页 |
1.1 供试虫源 | 第79页 |
1.2 实验试剂(盒)与仪器 | 第79页 |
1.3 dsRNA引物的设计 | 第79-80页 |
1.4 dsRNA的体外合成 | 第80-83页 |
1.5 注射dsRNA | 第83页 |
1.6 20E注射 | 第83页 |
1.7 几丁质合成通路基因的表达分析 | 第83-84页 |
1.8 数据分析 | 第84页 |
2 结果与分析 | 第84-89页 |
2.1 沉默效率检测 | 第84-86页 |
2.2 RNA干扰效果的观察 | 第86页 |
2.3 RNA干扰对海藻糖和葡萄糖含量的影响 | 第86-87页 |
2.4 RNA干扰对几丁质通路基因表达的影响 | 第87-88页 |
2.5 20E注射对化蛹率和关键基因表达量的影响 | 第88-89页 |
3 讨论 | 第89-93页 |
第七章 主要结论与展望 | 第93-97页 |
1 主要结论 | 第93-94页 |
1.1 明确了柑橘大实蝇滞育发生和结束的时间点 | 第93页 |
1.2 完成了柑橘大实蝇不同滞育期基因表达谱的测序及分析 | 第93页 |
1.3 克隆获得了柑橘大实蝇5条海藻糖代谢相关基因 | 第93-94页 |
1.4 解析了柑橘大实蝇海藻糖代谢相关基因表达模式、酶活力及糖含量 | 第94页 |
1.5 初步构建了柑橘大实蝇RNA干扰体系 | 第94页 |
2 展望 | 第94-97页 |
参考文献 | 第97-105页 |
硕士在读期间发表的论文 | 第105-107页 |
致谢 | 第107-108页 |